慢性淋巴性白血病的基因治療
本報訊 William 等用CD40配體基因治療慢性淋巴性白血病(CLL),療效顯著。(Blood 2000, 96 ∶2917)
體外研究表明,激活的T細胞可通過CD40配體(CD154)的介導誘導CLL的B細胞成為有效的抗原呈遞細胞(APC),引起自身T細胞免疫反應,導致CLL特異的殺傷T細胞產(chǎn)生。William探討了一次性輸入用腺病毒載體轉(zhuǎn)導的自身CLL細胞后病人的免疫學和臨床療效。
共有11例病人入選,根據(jù)修訂RAI標準所有病人均為進行性中危和高危CLL,一般狀況為0~2級,估計壽命超過3個月,腎、肝、肺功能正常,且均有抗AD5腺病毒抗體。用密度梯度離心法分離病人外周血單個核細胞,與高滴度的復制缺陷腺病毒載體( AD-CD154)感染24小時后洗滌凍存,治療當天解凍,靜脈輸入。病人共分四組,預試驗組和I組共5例,接受約3×108個細胞,II組3例接受為1×109個細胞,III組3例接受3×109個的轉(zhuǎn)導細胞。預試驗組2例僅< 8%的白血病細胞表達,而I、II、III組49%±11%的CLL細胞表達CD154轉(zhuǎn)基因。不僅表達CD154轉(zhuǎn)基因的細胞,而且不表達CD154轉(zhuǎn)基因的旁觀白血病細胞也高表達了一些新的免疫輔助分子如CD80、CD86、CD54、CD95。I~III組病人治療后血漿中TH1型細胞因子IL-2和IFN-γ水平升高,T細胞絕對數(shù)也升高,一般超過4000~5000/μl,平均升高240%以上,且維持幾周。自身Elispot分析和混合淋巴細胞培養(yǎng)(MLR)證明,升高的T細胞是白血病特異性T細胞。
從臨床看,I~III組病人的淋巴細胞數(shù)明顯下降了30%~87%,1~4周持續(xù)降低49%~66%,而且治療后3個月以上,血淋巴細胞數(shù)無進行性升高。治療1~4周后淋巴結(jié)縮小33%~90%,持續(xù)3個月以上。治療中未觀察到自身免疫性血小板減少、溶血性貧血和劑量限制性毒性的發(fā)生。由于預試驗組旁觀白血病細胞無表型改變,揭示輸入細胞可能需要一定的閾值才有治療作用,而表型改變及細胞因子升高峰值與輸入細胞數(shù)無相關(guān)性,而與絕對T細胞數(shù)相關(guān)。故研究者認為,治療后CD4+T細胞水平對免疫和臨床反應有明顯影響;并提出多次輸入可能會產(chǎn)生更大、更持久的T細胞升高反應,而治療前的T細胞數(shù)可能對早期療效有影響。
總之,這次嘗試可能為CLL病人提供一種嶄新且有效的基因治療途徑。
(陳松鶴) , http://www.www.srpcoatings.com
體外研究表明,激活的T細胞可通過CD40配體(CD154)的介導誘導CLL的B細胞成為有效的抗原呈遞細胞(APC),引起自身T細胞免疫反應,導致CLL特異的殺傷T細胞產(chǎn)生。William探討了一次性輸入用腺病毒載體轉(zhuǎn)導的自身CLL細胞后病人的免疫學和臨床療效。
共有11例病人入選,根據(jù)修訂RAI標準所有病人均為進行性中危和高危CLL,一般狀況為0~2級,估計壽命超過3個月,腎、肝、肺功能正常,且均有抗AD5腺病毒抗體。用密度梯度離心法分離病人外周血單個核細胞,與高滴度的復制缺陷腺病毒載體( AD-CD154)感染24小時后洗滌凍存,治療當天解凍,靜脈輸入。病人共分四組,預試驗組和I組共5例,接受約3×108個細胞,II組3例接受為1×109個細胞,III組3例接受3×109個的轉(zhuǎn)導細胞。預試驗組2例僅< 8%的白血病細胞表達,而I、II、III組49%±11%的CLL細胞表達CD154轉(zhuǎn)基因。不僅表達CD154轉(zhuǎn)基因的細胞,而且不表達CD154轉(zhuǎn)基因的旁觀白血病細胞也高表達了一些新的免疫輔助分子如CD80、CD86、CD54、CD95。I~III組病人治療后血漿中TH1型細胞因子IL-2和IFN-γ水平升高,T細胞絕對數(shù)也升高,一般超過4000~5000/μl,平均升高240%以上,且維持幾周。自身Elispot分析和混合淋巴細胞培養(yǎng)(MLR)證明,升高的T細胞是白血病特異性T細胞。
從臨床看,I~III組病人的淋巴細胞數(shù)明顯下降了30%~87%,1~4周持續(xù)降低49%~66%,而且治療后3個月以上,血淋巴細胞數(shù)無進行性升高。治療1~4周后淋巴結(jié)縮小33%~90%,持續(xù)3個月以上。治療中未觀察到自身免疫性血小板減少、溶血性貧血和劑量限制性毒性的發(fā)生。由于預試驗組旁觀白血病細胞無表型改變,揭示輸入細胞可能需要一定的閾值才有治療作用,而表型改變及細胞因子升高峰值與輸入細胞數(shù)無相關(guān)性,而與絕對T細胞數(shù)相關(guān)。故研究者認為,治療后CD4+T細胞水平對免疫和臨床反應有明顯影響;并提出多次輸入可能會產(chǎn)生更大、更持久的T細胞升高反應,而治療前的T細胞數(shù)可能對早期療效有影響。
總之,這次嘗試可能為CLL病人提供一種嶄新且有效的基因治療途徑。
(陳松鶴) , http://www.www.srpcoatings.com
百拇醫(yī)藥網(wǎng) http://www.www.srpcoatings.com/Html/Dir0/15/89/40.htm