檢測(cè)磷酸肌醇的探針蛋白
許多年前,當(dāng)研究者們?cè)噲D找到一種調(diào)控蛋白的蛋白因子時(shí),他們意外的發(fā)現(xiàn)此因子并非蛋白而是磷酸肌醇。因此,很多實(shí)驗(yàn)室都對(duì)磷酸肌醇或多或少產(chǎn)生了興趣。
EMBO J 最近的一篇文章,Harald Stenmark and Rob Parton設(shè)計(jì)了一種全新的探針用來(lái)研究phosphatidylinositol-3-phosphate (PtdIns(3)P)的胞內(nèi)定位。
PI3K作用的產(chǎn)物在信號(hào)傳導(dǎo)的過(guò)程中廣泛存在。產(chǎn)物之一PtdIns(3)P主要在模運(yùn)輸過(guò)程中發(fā)揮作用,被認(rèn)為調(diào)控很多物種的胞飲過(guò)程。PtdIns(3)P的一個(gè)活性是可以將包含F(xiàn)YVE
finger domain的蛋白招募至膜上。
Gillooly et al.認(rèn)為,既然IP與FYVE finger domain相結(jié)合,那么探針蛋白也應(yīng)具有此結(jié)構(gòu)域。他們將Hrs一個(gè)胞飲過(guò)程中的蛋白嵌入兩個(gè)FYVE
domain 命名為2XFYVE。一系列的對(duì)照實(shí)驗(yàn)證明2XFYVE僅與IP結(jié)合,而且此探針蛋白與內(nèi)源性的PtdIns(3)P–binding蛋白相互競(jìng)爭(zhēng),還可用免疫熒光技術(shù),免疫電鏡技術(shù)加以檢測(cè)。
一個(gè)已知的FYVE finger蛋白EEA1是只定位在早期包含體上的,同時(shí)PtdIns(3)P也定位于早期包含體上。用2XFYVE證明了這一觀點(diǎn)。研究者們接著發(fā)現(xiàn),2XFYVE顯示PtdIns(3)P也定位于晚期包含體多囊泡的內(nèi)膜上,這說(shuō)明包含PtdIns(3)P的膜應(yīng)該是包含體膜內(nèi)陷而形成。這就使PtdIns(3)P不能再招募諸如EEA1之類的蛋白。此發(fā)現(xiàn)的意義還在研究,但此新技術(shù)無(wú)疑已為我們研究PtdIns(3)P開(kāi)辟了新的道路。
相關(guān)文章:
ORIGINAL RESEARCH PAPER
Gillooly, D. J. et al. Localization of phosphatidylinositol 3-phosphate in
yeast and mammalian cells. EMBO J. 17 , 4577–4588 (2000) [ PubMed]
FURTHER READING
Corvera, S., D'arrigo, A. &
Stenmark, H. Phosphoinositides in membrane traffic . Curr. Opin. Cell
Biol. 11, 460– 465 (1999) PubMed, 百拇醫(yī)藥
EMBO J 最近的一篇文章,Harald Stenmark and Rob Parton設(shè)計(jì)了一種全新的探針用來(lái)研究phosphatidylinositol-3-phosphate (PtdIns(3)P)的胞內(nèi)定位。
PI3K作用的產(chǎn)物在信號(hào)傳導(dǎo)的過(guò)程中廣泛存在。產(chǎn)物之一PtdIns(3)P主要在模運(yùn)輸過(guò)程中發(fā)揮作用,被認(rèn)為調(diào)控很多物種的胞飲過(guò)程。PtdIns(3)P的一個(gè)活性是可以將包含F(xiàn)YVE
finger domain的蛋白招募至膜上。
Gillooly et al.認(rèn)為,既然IP與FYVE finger domain相結(jié)合,那么探針蛋白也應(yīng)具有此結(jié)構(gòu)域。他們將Hrs一個(gè)胞飲過(guò)程中的蛋白嵌入兩個(gè)FYVE
domain 命名為2XFYVE。一系列的對(duì)照實(shí)驗(yàn)證明2XFYVE僅與IP結(jié)合,而且此探針蛋白與內(nèi)源性的PtdIns(3)P–binding蛋白相互競(jìng)爭(zhēng),還可用免疫熒光技術(shù),免疫電鏡技術(shù)加以檢測(cè)。
一個(gè)已知的FYVE finger蛋白EEA1是只定位在早期包含體上的,同時(shí)PtdIns(3)P也定位于早期包含體上。用2XFYVE證明了這一觀點(diǎn)。研究者們接著發(fā)現(xiàn),2XFYVE顯示PtdIns(3)P也定位于晚期包含體多囊泡的內(nèi)膜上,這說(shuō)明包含PtdIns(3)P的膜應(yīng)該是包含體膜內(nèi)陷而形成。這就使PtdIns(3)P不能再招募諸如EEA1之類的蛋白。此發(fā)現(xiàn)的意義還在研究,但此新技術(shù)無(wú)疑已為我們研究PtdIns(3)P開(kāi)辟了新的道路。
相關(guān)文章:
ORIGINAL RESEARCH PAPER
Gillooly, D. J. et al. Localization of phosphatidylinositol 3-phosphate in
yeast and mammalian cells. EMBO J. 17 , 4577–4588 (2000) [ PubMed]
FURTHER READING
Corvera, S., D'arrigo, A. &
Stenmark, H. Phosphoinositides in membrane traffic . Curr. Opin. Cell
Biol. 11, 460– 465 (1999) PubMed, 百拇醫(yī)藥
百拇醫(yī)藥網(wǎng) http://www.www.srpcoatings.com/Html/Info/News/67/06727.htm