蛋白質(zhì)芯片
現(xiàn)在DNA芯片的研究正值熱火朝天之時。利用此高通量手段,研究者可以一次研究眾多的mRNA在某種特定情況下的水平變化。但是這方法始終不能與編碼的蛋白質(zhì)聯(lián)系起來。Science
9月8日Gavin MacBeath and Stuart Schreiber首先報道了利用蛋白質(zhì)微型方陣研究蛋白質(zhì)相互作用及與小分子作用的研究。
蛋白質(zhì)方陣要解決的問題不外有三,一保持蛋白的活性,二保證蛋白質(zhì)正確定位,三與現(xiàn)存的mRNA微型方陣研究工具要相兼容。他們是如何解決以上問題的呢?非常簡單。
首先在點樣的nanaliter級溶液中加入40%甘油,防止蛋白變性。在膜表面覆蓋一層與氨基反應(yīng)的試劑。這樣,蛋白質(zhì)的氨基末端或賴氨酸殘基就會與此試劑反應(yīng)而固定于膜上。每一中蛋白質(zhì)都會以多種不同的方向進(jìn)行定位,保證有正確的定位。然后用BSA進(jìn)行封閉,降低膜上的背景,這樣就可以與蛋白質(zhì)進(jìn)行雜交了。
Gavin MacBeath and Stuart Schreiber利用這些簡單的手段制成了每平方厘米有1600個點的蛋白質(zhì)微型方陣。
研究者用熒光基因標(biāo)記蛋白,ATP標(biāo)記的激酶底物,都可與膜上的蛋白進(jìn)行反應(yīng)。這些都是用小部分的膜進(jìn)行實驗的。最終他們將一個有1萬個點的芯片與一個FRB(FKBP12–rapamycin
binding protein)結(jié)合蛋白和G-protein結(jié)合蛋白的探針進(jìn)行雜交。發(fā)現(xiàn)在一大片G-protein點的中央,單獨的一個FRB的點被區(qū)分了出來。
接下來,我們就要等待蛋白質(zhì)芯片進(jìn)一步開發(fā),商業(yè)化,進(jìn)入我們的實驗室了。
相關(guān)文章:
ORIGINAL RESEARCH PAPER MacBeath, G. & Schreiber, S. L. Printing proteins as microarrays
for high-throughput function determination. Science 289, 1760–1763 (2000) PubMed, http://www.www.srpcoatings.com
9月8日Gavin MacBeath and Stuart Schreiber首先報道了利用蛋白質(zhì)微型方陣研究蛋白質(zhì)相互作用及與小分子作用的研究。
蛋白質(zhì)方陣要解決的問題不外有三,一保持蛋白的活性,二保證蛋白質(zhì)正確定位,三與現(xiàn)存的mRNA微型方陣研究工具要相兼容。他們是如何解決以上問題的呢?非常簡單。
首先在點樣的nanaliter級溶液中加入40%甘油,防止蛋白變性。在膜表面覆蓋一層與氨基反應(yīng)的試劑。這樣,蛋白質(zhì)的氨基末端或賴氨酸殘基就會與此試劑反應(yīng)而固定于膜上。每一中蛋白質(zhì)都會以多種不同的方向進(jìn)行定位,保證有正確的定位。然后用BSA進(jìn)行封閉,降低膜上的背景,這樣就可以與蛋白質(zhì)進(jìn)行雜交了。
Gavin MacBeath and Stuart Schreiber利用這些簡單的手段制成了每平方厘米有1600個點的蛋白質(zhì)微型方陣。
研究者用熒光基因標(biāo)記蛋白,ATP標(biāo)記的激酶底物,都可與膜上的蛋白進(jìn)行反應(yīng)。這些都是用小部分的膜進(jìn)行實驗的。最終他們將一個有1萬個點的芯片與一個FRB(FKBP12–rapamycin
binding protein)結(jié)合蛋白和G-protein結(jié)合蛋白的探針進(jìn)行雜交。發(fā)現(xiàn)在一大片G-protein點的中央,單獨的一個FRB的點被區(qū)分了出來。
接下來,我們就要等待蛋白質(zhì)芯片進(jìn)一步開發(fā),商業(yè)化,進(jìn)入我們的實驗室了。
相關(guān)文章:
ORIGINAL RESEARCH PAPER MacBeath, G. & Schreiber, S. L. Printing proteins as microarrays
for high-throughput function determination. Science 289, 1760–1763 (2000) PubMed, http://www.www.srpcoatings.com
參見:首頁 > 新聞 > 醫(yī)藥前沿 > 生物芯片
百拇醫(yī)藥網(wǎng) http://www.www.srpcoatings.com/Html/Info/News/67/06728.htm