組織標(biāo)記新方法
對組織進(jìn)行選擇性標(biāo)記對研究神經(jīng)系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)和功能是非常重要的。盡管這幾年對于GFP(green fluorescent protein)等可對轉(zhuǎn)基因動(dòng)物細(xì)胞進(jìn)行標(biāo)記的研究進(jìn)展非常迅速,但對于這些方法,都有一些局限。例如用編碼GFP基因的質(zhì)粒轉(zhuǎn)化細(xì)胞時(shí),GFP基因的表達(dá)在轉(zhuǎn)染后大約6個(gè)小時(shí)后才會(huì)出現(xiàn)。而這個(gè)延遲過程對某些研究過程中就成為了障礙。還有基因槍技術(shù),將DNA包裹在小珠上打入組織,這種轉(zhuǎn)化雖然密度可以很高,但卻以組織的損傷為代價(jià)。 Neuron 8月號上Gan and colleagues開創(chuàng)了一種新的方法,他們用基因槍把親脂性的染料(DiOlistic)打入細(xì)胞進(jìn)行標(biāo)記。這個(gè)方法除了基因槍轉(zhuǎn)化本身的高密度優(yōu)點(diǎn)之外,由于在基因槍和組織之間放置了一張膜,減少了對組織的損傷及粒子的聚集。
在對活體組織轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)中顯示,樹突和膠質(zhì)細(xì)胞在粒子打入后5分鐘就完成了完全標(biāo)記,而且這種方法的優(yōu)點(diǎn)還有對不同神經(jīng)元用不同的親脂性染料標(biāo)記,還能夠觀察神經(jīng)元之間的相互作用。
盡管這個(gè)方法在某些條件下的使用還有限制,但用DiOlistic進(jìn)行多顏色標(biāo)記的技術(shù),對研究神經(jīng)生理學(xué)還是十分有價(jià)值的。
相關(guān)文章:
ORIGINAL RESEARCH PAPER
Gan , W.-B. et al. Multicolor"DiOlistic" labeling of the nervous system using lipophilic
dye combinations. Neuron 27, 219—225 ( 2000). PubMed REVIEWS
Tsien, R. Y. The green fluorescent protein. Annu. Rev. Biochem. 67, 509—544 ( 1998). PubMed
FURTHER READING
Chalfie, M. et al. Green fluorescent protein as a marker for gene expression. Science 263,802— 805 (1994). PubMed, 百拇醫(yī)藥
在對活體組織轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)中顯示,樹突和膠質(zhì)細(xì)胞在粒子打入后5分鐘就完成了完全標(biāo)記,而且這種方法的優(yōu)點(diǎn)還有對不同神經(jīng)元用不同的親脂性染料標(biāo)記,還能夠觀察神經(jīng)元之間的相互作用。
盡管這個(gè)方法在某些條件下的使用還有限制,但用DiOlistic進(jìn)行多顏色標(biāo)記的技術(shù),對研究神經(jīng)生理學(xué)還是十分有價(jià)值的。
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ORIGINAL RESEARCH PAPER
Gan , W.-B. et al. Multicolor"DiOlistic" labeling of the nervous system using lipophilic
dye combinations. Neuron 27, 219—225 ( 2000). PubMed REVIEWS
Tsien, R. Y. The green fluorescent protein. Annu. Rev. Biochem. 67, 509—544 ( 1998). PubMed
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Chalfie, M. et al. Green fluorescent protein as a marker for gene expression. Science 263,802— 805 (1994). PubMed, 百拇醫(yī)藥
百拇醫(yī)藥網(wǎng) http://www.www.srpcoatings.com/Html/Info/News/67/06733.htm