Flair技術(shù)
Klaus Hahn et al.在Science上報道了一種新的技術(shù),F(xiàn)LAIR,來達(dá)到這個目的。他們將PAK1的能結(jié)合并激活Rac-GTP的domain
PDB與熒光染料Alexa標(biāo)記,微注射入表達(dá)GFP與Rac融合蛋白的細(xì)胞中。
這樣,當(dāng)Rac與PDB相互作用時,GFP和Alexa就會足夠接近以致發(fā)生FRET(fluorescence resonance energy transfer),這個熒光基因的設(shè)計要使FRET出生。
用這種方法,作者就能實時的檢測,在一個活的細(xì)胞中Rac的定位改變與Rac激活之間的關(guān)系,結(jié)果發(fā)現(xiàn)兩者顯著的沒有相關(guān)性。
這種被叫做FLAIR,是'fluorescence activation indicator for Rho proteins'的縮寫,而且正如名字所表示的這樣如果將適宜的結(jié)合蛋白結(jié)合域代替PDB,這種新技術(shù)也能用來研究Rho家族其他的GTPase。
了解肌動蛋白多聚化的時間和區(qū)域,將有利于我們更深入的研究如細(xì)胞移動,形態(tài)變化,吞噬行為等與肌動蛋白相關(guān)的過程。
相關(guān)文章:
ORIGINAL RESEARCH PAPER
Kraynov, V. S. et al. Localized Rac activation dynamics visualized in
living cells. Science 290, 333–337 (2000), http://www.www.srpcoatings.com
PDB與熒光染料Alexa標(biāo)記,微注射入表達(dá)GFP與Rac融合蛋白的細(xì)胞中。
這樣,當(dāng)Rac與PDB相互作用時,GFP和Alexa就會足夠接近以致發(fā)生FRET(fluorescence resonance energy transfer),這個熒光基因的設(shè)計要使FRET出生。
用這種方法,作者就能實時的檢測,在一個活的細(xì)胞中Rac的定位改變與Rac激活之間的關(guān)系,結(jié)果發(fā)現(xiàn)兩者顯著的沒有相關(guān)性。
這種被叫做FLAIR,是'fluorescence activation indicator for Rho proteins'的縮寫,而且正如名字所表示的這樣如果將適宜的結(jié)合蛋白結(jié)合域代替PDB,這種新技術(shù)也能用來研究Rho家族其他的GTPase。
了解肌動蛋白多聚化的時間和區(qū)域,將有利于我們更深入的研究如細(xì)胞移動,形態(tài)變化,吞噬行為等與肌動蛋白相關(guān)的過程。
相關(guān)文章:
ORIGINAL RESEARCH PAPER
Kraynov, V. S. et al. Localized Rac activation dynamics visualized in
living cells. Science 290, 333–337 (2000), http://www.www.srpcoatings.com
百拇醫(yī)藥網(wǎng) http://www.www.srpcoatings.com/Html/Info/News/67/06762.htm