流行性出血熱診斷標(biāo)準(zhǔn)及處理原則.doc
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參見附件(71kb)。
流行性出血熱診斷標(biāo)準(zhǔn)及處理原則GB 15996-1995
前 言
國際上將流行性出血熱(EHF)與流行性腎病(Nephopathia epidemica，NE)等統(tǒng)稱腎綜合征出血熱(Hemorrhagic fever with renal syhndrome，HFRS)。HFRS是由布尼亞病毒科(Bunyaviridae)漢坦病毒屬(Hantavirus)中某些病毒引起和由某些嚙齒動(dòng)物攜帶傳播的一類自然疫原性疾病。在我國流行的是EHF，黑線姬鼠和褐家鼠為其主要宿主動(dòng)物和傳染源，其傳播主要通過與宿主動(dòng)物或其排泄物(尿、糞)/分泌物(唾液)接融。EHF起病急，進(jìn)展快，病死率高，早期診斷對(duì)降低病死率有著特殊的重要意義。
本標(biāo)準(zhǔn)的附錄A，附錄B，附錄C都是標(biāo)準(zhǔn)的附錄；
附錄D是提示的附錄。
本標(biāo)準(zhǔn)由中華人民共和國衛(wèi)生部提出。
本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：中國預(yù)防醫(yī)學(xué)科學(xué)院病毒學(xué)研究所、中國預(yù)防醫(yī)學(xué)科學(xué)院流行病學(xué)和微生物學(xué)研究所、西安醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院。
本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：宋干、杭長(zhǎng)壽、陳化新、張成文。
本標(biāo)準(zhǔn)由衛(wèi)生部委托技術(shù)歸口單位衛(wèi)生部傳染病監(jiān)督管理辦公室負(fù)責(zé)解釋。
1 范圍
本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了流行性出血熱(EHF)的診斷標(biāo)準(zhǔn)及處理原則。
本標(biāo)準(zhǔn)適用于各級(jí)、各類醫(yī)療、衛(wèi)生、保健機(jī)構(gòu)工作人員對(duì)EHF病人的診斷、預(yù)防和治療。
2 診斷原則
依據(jù)患者的流行病學(xué)史、臨床表現(xiàn)及實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果的綜合判斷進(jìn)行診斷，確診須有血清學(xué)或病原學(xué)檢查結(jié)果。
3 診斷標(biāo)準(zhǔn)
3.1 流行病學(xué)史
發(fā)病在EHF疫區(qū)及流行季節(jié)，或病前兩月內(nèi)有疫區(qū)旅居史，或病前兩月內(nèi)有與鼠類或其排泄物(尿、糞)/分泌物(唾液)直接或間接接觸史。
3.2 臨床表現(xiàn)
3.2.1 早期癥狀和體征：起病急，發(fā)冷，發(fā)熱(38℃以上)；全身酸痛，乏力，呈衰竭狀；頭痛，眼眶痛，腰痛(三痛)；面、頸、上胸部充血潮紅(三紅)，呈酒醉貌；眼瞼浮腫、結(jié)膜充血，水腫，有點(diǎn)狀或片狀出血；上腭粘膜呈網(wǎng)狀充血，點(diǎn)狀出血；腋下皮膚有線狀或簇狀排列的出血點(diǎn)；束臂試驗(yàn)陽性。
3.2.2 病程經(jīng)過：典型病例有發(fā)熱期、低血壓期、少尿期、多尿期和恢復(fù)期五期經(jīng)過。前三期可有重疊，并存在有大量五期不全的異型或輕型非典型病例。
3.3 實(shí)驗(yàn)室檢查
3.3.1 血檢查：早期白細(xì)胞數(shù)低或正常，3～4病日后明顯增多，桿狀核細(xì)胞增多，出現(xiàn)較多的異型淋巴細(xì)胞；血小板明顯減少。
3.3.2 尿檢查：尿蛋白陽性，并迅速加重，伴顯微血尿、管型尿。
3.3.3 血清特異性IgM抗體陽性，見附錄A。
3.3.4 恢復(fù)期血清特異性IgG抗體比急性期有4倍以上增高，見附錄A。
3.3.5 從病人血液白細(xì)胞或尿沉渣細(xì)胞檢查到EHF病毒抗原或EHF病毒RNA，見附錄D。
3.4 病例分類
3.4.1 疑似病例：具備3.1及3.2.1。
3.4.2 臨床診斷病例：疑似病例加3.2.2，3.3.1，3.3.2。
3.4.3 確診病例：疑似病例或臨床診斷病例加3.3.3，3.3.4，3.3.5中的任一項(xiàng)。
4 預(yù)防原則
采取以防鼠滅鼠及疫苗預(yù)防接種為主的綜合性措施，抓好人間和鼠間的疫情監(jiān)測(cè)，及時(shí)報(bào)告疫情，見附錄B。
4.1 防鼠滅鼠
滅鼠應(yīng)與防鼠緊密結(jié)合。搞好環(huán)境衛(wèi)生及衛(wèi)生整頓，清除鼠類棲息活動(dòng)的隱蔽場(chǎng)所，開展以藥物殺滅為主，居民區(qū)及其周圍地區(qū)為主的滅鼠措施，在流行高峰期半個(gè)月前開展一次突擊性滅鼠活動(dòng)。根據(jù)疫區(qū)不同類型(家鼠型、姬鼠型、混合型)確定滅鼠重點(diǎn)，一般春季重點(diǎn)在居民區(qū)滅鼠，秋季重點(diǎn)在居民區(qū)周圍及野外滅鼠。
4.2 野外作業(yè)工地及生活區(qū)的預(yù)防措施
進(jìn)入前對(duì)施工區(qū)及宿營(yíng)地區(qū)進(jìn)行流行病學(xué)特別是疫源地的監(jiān)測(cè)，施工期內(nèi)做好防鼠滅鼠工作，加強(qiáng)個(gè)人防護(hù)措施。
4.3 個(gè)人防護(hù)
避免與鼠類及其排泄物/分泌物接觸，以減少受感染的危險(xiǎn)；對(duì)高發(fā)病區(qū)人群及對(duì)其他疫區(qū)高危人群接種疫苗。
5 治療原則
抓好"三早一就"(早發(fā)現(xiàn)、早休息、早治療、就近治療)措施及發(fā)熱期的治療，包括抗病毒治療、預(yù)防性治療(預(yù)防低血壓、少尿期出現(xiàn))。通過綜合性搶救治療措施預(yù)防/控制低血壓休克、腎功能衰竭、大出血(三關(guān))，做好搶救治療中的護(hù)理工作，見附錄C。
附錄A
(標(biāo)準(zhǔn)的附錄)
流行性出血熱血清學(xué)診斷方法
A1 應(yīng)用IgM捕獲ELISA法檢測(cè)EHF IgM抗體
A1.1 原理
根據(jù)抗原抗體特異性結(jié)合的原理，利用抗人μ鏈多克隆或單克隆抗體捕獲待測(cè)血清中的IgM，然后加入特異性抗原和酶標(biāo)特異性抗體(單克隆抗體或多克隆抗體)，加底物顯色。顯色程度與特異性抗體中的IgM抗體含量呈正相關(guān)。以待檢血清與特異性抗原和陰性(對(duì)照)抗原反應(yīng)()D值的比值，作為判定IgM抗體反應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)。
A1.2 材料
a)聚苯乙烯塑料板：40孔或96孔板，U型。
b)可變微量加樣器：20μL和100μL各一支。
c)抗人IgM(μ鏈)：鼠抗人IgM(μ鏈)單克隆抗體或羊抗人IgM(μ鏈)多克隆抗體。
d)抗原：陽性抗原：細(xì)胞培養(yǎng)EHFV滅活抗原或基因工程表達(dá)抗原；
陰性抗原：未接種病毒的細(xì)胞培養(yǎng)抗原或無外源基因的相應(yīng)表達(dá)系統(tǒng)抗原。
e)抗IgM陰性或陽性對(duì)照血清。
f)辣根過氧化物酶-EHF單克隆抗體標(biāo)記物(HRP-McAb)。
g)包被液：0.1mol pH9.6的碳酸鹽緩沖液(Na(下標(biāo)始)2(下標(biāo)終)CO(下標(biāo)始)3(下標(biāo)終))3.18g，NaHCO(下標(biāo)始)3(下標(biāo)終)5.88g，加蒸餾水至1000mL。
h)洗滌液(×10)：0.2mol pH7.4 PBS-T(Na(下標(biāo)始)2(下標(biāo)終)HPO(下標(biāo)始)4(下標(biāo)終)·12H(下標(biāo)始)2(下標(biāo)終)O 51.6g，NaH(下標(biāo)始)2(下標(biāo)終)PO(下標(biāo)始)4(下標(biāo)終)·2H(下標(biāo)始)2(下標(biāo)終)O 8.7g，NaCl 76g，Tween-20 5mL，溶解至1000mL)高壓后使用，臨用前10倍稀釋。
i)稀釋液：上述10倍稀釋的PBS-T液，含5%牛血清。
j)底物液：臨用前取檸檬酸磷酸鹽緩沖液(pH5.0)(檸檬酸10.2g，Na(下標(biāo)始)2(下標(biāo)終)HPO(下標(biāo)始)4(下標(biāo)終)·12H(下標(biāo)始)2(下標(biāo)終)O 36.8g，加水至1000mL)。
k)終止液：2mol/LH(下標(biāo)始)2(下標(biāo)終)SO(下標(biāo)始)4(下標(biāo)終)。
A1.3 檢測(cè)步驟
a)用0.1 molpH9.6的碳酸鹽緩沖液稀釋抗人IgM(μ鏈)單克隆抗體(或羊抗人IgM(μ鏈)，包被聚苯乙烯塑料板，每孔100μL，4℃過夜(或37℃ 2h)。
b)棄去包被液，用洗滌液重復(fù)洗3次，甩干。
c)加待檢血清：將血清用PBS-T液稀釋100倍 ......
流行性出血熱診斷標(biāo)準(zhǔn)及處理原則GB 15996-1995
前 言
國際上將流行性出血熱(EHF)與流行性腎病(Nephopathia epidemica，NE)等統(tǒng)稱腎綜合征出血熱(Hemorrhagic fever with renal syhndrome，HFRS)。HFRS是由布尼亞病毒科(Bunyaviridae)漢坦病毒屬(Hantavirus)中某些病毒引起和由某些嚙齒動(dòng)物攜帶傳播的一類自然疫原性疾病。在我國流行的是EHF，黑線姬鼠和褐家鼠為其主要宿主動(dòng)物和傳染源，其傳播主要通過與宿主動(dòng)物或其排泄物(尿、糞)/分泌物(唾液)接融。EHF起病急，進(jìn)展快，病死率高，早期診斷對(duì)降低病死率有著特殊的重要意義。
本標(biāo)準(zhǔn)的附錄A，附錄B，附錄C都是標(biāo)準(zhǔn)的附錄；
附錄D是提示的附錄。
本標(biāo)準(zhǔn)由中華人民共和國衛(wèi)生部提出。
本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：中國預(yù)防醫(yī)學(xué)科學(xué)院病毒學(xué)研究所、中國預(yù)防醫(yī)學(xué)科學(xué)院流行病學(xué)和微生物學(xué)研究所、西安醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院。
本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：宋干、杭長(zhǎng)壽、陳化新、張成文。
本標(biāo)準(zhǔn)由衛(wèi)生部委托技術(shù)歸口單位衛(wèi)生部傳染病監(jiān)督管理辦公室負(fù)責(zé)解釋。
1 范圍
本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了流行性出血熱(EHF)的診斷標(biāo)準(zhǔn)及處理原則。
本標(biāo)準(zhǔn)適用于各級(jí)、各類醫(yī)療、衛(wèi)生、保健機(jī)構(gòu)工作人員對(duì)EHF病人的診斷、預(yù)防和治療。
2 診斷原則
依據(jù)患者的流行病學(xué)史、臨床表現(xiàn)及實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果的綜合判斷進(jìn)行診斷，確診須有血清學(xué)或病原學(xué)檢查結(jié)果。
3 診斷標(biāo)準(zhǔn)
3.1 流行病學(xué)史
發(fā)病在EHF疫區(qū)及流行季節(jié)，或病前兩月內(nèi)有疫區(qū)旅居史，或病前兩月內(nèi)有與鼠類或其排泄物(尿、糞)/分泌物(唾液)直接或間接接觸史。
3.2 臨床表現(xiàn)
3.2.1 早期癥狀和體征：起病急，發(fā)冷，發(fā)熱(38℃以上)；全身酸痛，乏力，呈衰竭狀；頭痛，眼眶痛，腰痛(三痛)；面、頸、上胸部充血潮紅(三紅)，呈酒醉貌；眼瞼浮腫、結(jié)膜充血，水腫，有點(diǎn)狀或片狀出血；上腭粘膜呈網(wǎng)狀充血，點(diǎn)狀出血；腋下皮膚有線狀或簇狀排列的出血點(diǎn)；束臂試驗(yàn)陽性。
3.2.2 病程經(jīng)過：典型病例有發(fā)熱期、低血壓期、少尿期、多尿期和恢復(fù)期五期經(jīng)過。前三期可有重疊，并存在有大量五期不全的異型或輕型非典型病例。
3.3 實(shí)驗(yàn)室檢查
3.3.1 血檢查：早期白細(xì)胞數(shù)低或正常，3～4病日后明顯增多，桿狀核細(xì)胞增多，出現(xiàn)較多的異型淋巴細(xì)胞；血小板明顯減少。
3.3.2 尿檢查：尿蛋白陽性，并迅速加重，伴顯微血尿、管型尿。
3.3.3 血清特異性IgM抗體陽性，見附錄A。
3.3.4 恢復(fù)期血清特異性IgG抗體比急性期有4倍以上增高，見附錄A。
3.3.5 從病人血液白細(xì)胞或尿沉渣細(xì)胞檢查到EHF病毒抗原或EHF病毒RNA，見附錄D。
3.4 病例分類
3.4.1 疑似病例：具備3.1及3.2.1。
3.4.2 臨床診斷病例：疑似病例加3.2.2，3.3.1，3.3.2。
3.4.3 確診病例：疑似病例或臨床診斷病例加3.3.3，3.3.4，3.3.5中的任一項(xiàng)。
4 預(yù)防原則
采取以防鼠滅鼠及疫苗預(yù)防接種為主的綜合性措施，抓好人間和鼠間的疫情監(jiān)測(cè)，及時(shí)報(bào)告疫情，見附錄B。
4.1 防鼠滅鼠
滅鼠應(yīng)與防鼠緊密結(jié)合。搞好環(huán)境衛(wèi)生及衛(wèi)生整頓，清除鼠類棲息活動(dòng)的隱蔽場(chǎng)所，開展以藥物殺滅為主，居民區(qū)及其周圍地區(qū)為主的滅鼠措施，在流行高峰期半個(gè)月前開展一次突擊性滅鼠活動(dòng)。根據(jù)疫區(qū)不同類型(家鼠型、姬鼠型、混合型)確定滅鼠重點(diǎn)，一般春季重點(diǎn)在居民區(qū)滅鼠，秋季重點(diǎn)在居民區(qū)周圍及野外滅鼠。
4.2 野外作業(yè)工地及生活區(qū)的預(yù)防措施
進(jìn)入前對(duì)施工區(qū)及宿營(yíng)地區(qū)進(jìn)行流行病學(xué)特別是疫源地的監(jiān)測(cè)，施工期內(nèi)做好防鼠滅鼠工作，加強(qiáng)個(gè)人防護(hù)措施。
4.3 個(gè)人防護(hù)
避免與鼠類及其排泄物/分泌物接觸，以減少受感染的危險(xiǎn)；對(duì)高發(fā)病區(qū)人群及對(duì)其他疫區(qū)高危人群接種疫苗。
5 治療原則
抓好"三早一就"(早發(fā)現(xiàn)、早休息、早治療、就近治療)措施及發(fā)熱期的治療，包括抗病毒治療、預(yù)防性治療(預(yù)防低血壓、少尿期出現(xiàn))。通過綜合性搶救治療措施預(yù)防/控制低血壓休克、腎功能衰竭、大出血(三關(guān))，做好搶救治療中的護(hù)理工作，見附錄C。
附錄A
(標(biāo)準(zhǔn)的附錄)
流行性出血熱血清學(xué)診斷方法
A1 應(yīng)用IgM捕獲ELISA法檢測(cè)EHF IgM抗體
A1.1 原理
根據(jù)抗原抗體特異性結(jié)合的原理，利用抗人μ鏈多克隆或單克隆抗體捕獲待測(cè)血清中的IgM，然后加入特異性抗原和酶標(biāo)特異性抗體(單克隆抗體或多克隆抗體)，加底物顯色。顯色程度與特異性抗體中的IgM抗體含量呈正相關(guān)。以待檢血清與特異性抗原和陰性(對(duì)照)抗原反應(yīng)()D值的比值，作為判定IgM抗體反應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)。
A1.2 材料
a)聚苯乙烯塑料板：40孔或96孔板，U型。
b)可變微量加樣器：20μL和100μL各一支。
c)抗人IgM(μ鏈)：鼠抗人IgM(μ鏈)單克隆抗體或羊抗人IgM(μ鏈)多克隆抗體。
d)抗原：陽性抗原：細(xì)胞培養(yǎng)EHFV滅活抗原或基因工程表達(dá)抗原；
陰性抗原：未接種病毒的細(xì)胞培養(yǎng)抗原或無外源基因的相應(yīng)表達(dá)系統(tǒng)抗原。
e)抗IgM陰性或陽性對(duì)照血清。
f)辣根過氧化物酶-EHF單克隆抗體標(biāo)記物(HRP-McAb)。
g)包被液：0.1mol pH9.6的碳酸鹽緩沖液(Na(下標(biāo)始)2(下標(biāo)終)CO(下標(biāo)始)3(下標(biāo)終))3.18g，NaHCO(下標(biāo)始)3(下標(biāo)終)5.88g，加蒸餾水至1000mL。
h)洗滌液(×10)：0.2mol pH7.4 PBS-T(Na(下標(biāo)始)2(下標(biāo)終)HPO(下標(biāo)始)4(下標(biāo)終)·12H(下標(biāo)始)2(下標(biāo)終)O 51.6g，NaH(下標(biāo)始)2(下標(biāo)終)PO(下標(biāo)始)4(下標(biāo)終)·2H(下標(biāo)始)2(下標(biāo)終)O 8.7g，NaCl 76g，Tween-20 5mL，溶解至1000mL)高壓后使用，臨用前10倍稀釋。
i)稀釋液：上述10倍稀釋的PBS-T液，含5%牛血清。
j)底物液：臨用前取檸檬酸磷酸鹽緩沖液(pH5.0)(檸檬酸10.2g，Na(下標(biāo)始)2(下標(biāo)終)HPO(下標(biāo)始)4(下標(biāo)終)·12H(下標(biāo)始)2(下標(biāo)終)O 36.8g，加水至1000mL)。
k)終止液：2mol/LH(下標(biāo)始)2(下標(biāo)終)SO(下標(biāo)始)4(下標(biāo)終)。
A1.3 檢測(cè)步驟
a)用0.1 molpH9.6的碳酸鹽緩沖液稀釋抗人IgM(μ鏈)單克隆抗體(或羊抗人IgM(μ鏈)，包被聚苯乙烯塑料板，每孔100μL，4℃過夜(或37℃ 2h)。
b)棄去包被液，用洗滌液重復(fù)洗3次，甩干。
c)加待檢血清：將血清用PBS-T液稀釋100倍 ......
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