鹽酸甲氯芬酯聯(lián)合穴位埋線對(duì)血管性癡呆大鼠模型學(xué)習(xí)記憶及海馬齒狀回長(zhǎng)時(shí)程增強(qiáng)的影響.PDF
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埋線與膏藥,埋線療法文獻(xiàn)資料,埋線2008
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· 1 4 6 0· 中國(guó)老年學(xué)雜志 2 0 0 7年 8月第 2 7卷
鹽酸甲氯芬酯聯(lián)合穴位埋線對(duì)血管性癡呆大鼠模型學(xué)習(xí)記憶及海馬齒狀 回
長(zhǎng)時(shí)程增強(qiáng)的影響
陳 粲 楊 瓊 戴桃李 潘 婭 王旭東 張 敏 ( 貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院生理學(xué)教研室， 貴州 貴陽(yáng) 5 5 o o o 4 )
[ 摘 要] 目的 探討鹽酸甲氯芬酯和穴位埋線聯(lián)合作用對(duì)血管性癡呆( V D) 大鼠學(xué)習(xí)記憶的影響及可能的機(jī)制。方法 改良P u l s i n e l l i s四
血管阻斷法建立 V D大鼠模型； 在造模后給予鹽酸甲氯芬酯和穴位埋線聯(lián)合治療； 采用Mo r r i s 迷宮檢測(cè)學(xué)習(xí)記憶能力； 在體記錄海馬齒狀回長(zhǎng)時(shí)程增
強(qiáng)( I 胛 ) ， 觀察并比較各組于高頻刺激( H F S ) 后的變化。結(jié)果 經(jīng)鹽酸甲氯芬酯聯(lián)合穴位埋線作用后 ， 與模型組相 比， 水迷宮成績(jī)顯著提高( P<
0 . 0 1 ) ； 與鹽酸甲氯芬酯組比成績(jī)提高明顯( P . 0 1 ， P< O . 0 5 ) 。在 H F S后海馬齒狀回I P 群體峰電位( P s ) 幅值、 P s斜率聯(lián)合組比模型組顯著提高
( P0 . 0 5) 。結(jié)論 鹽酸甲氯芬酯和穴位
埋線聯(lián)合作用可改善VD大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力( 比鹽酸甲氯芬酯單獨(dú)作用更為明顯) ， 其聯(lián)合作用對(duì) V D大鼠海馬齒狀回 I 的易化作用可能是其
改善學(xué)習(xí)記憶能力的機(jī)制之一。
[ 關(guān)鍵詞] 血管性癡呆； 學(xué)習(xí)記憶； 長(zhǎng)時(shí)程增強(qiáng)； 海馬齒狀回； 埋線； 鹽酸甲氯芬酯
[ 中圖分類號(hào)] 1 1 9 7 1 ； R 3 3 8 . 6 4 [ 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [ 文章編號(hào)] 1 0 0 5 - 9 2 0 2( 2 O O 7) 1 5 - 1 4 6 0 - 0 3
血管性癡呆( V D) 發(fā)病的確切病理生理機(jī)制尚不明了， 至
今也無(wú)特效藥和治療手段。鹽酸甲氯芬酯( 氯酯醒) 是使用多
年的中樞興奮藥 ， 主要用于腦外傷的治療等 ， 隨著研究的不斷
深入， 發(fā)現(xiàn)它不僅是腦細(xì)胞代謝功能活化劑， 還具有促智及抗
腦缺血等多種藥理作用…。穴位埋線 的治療方法有扶正為主
的治療作用。本實(shí)驗(yàn)采用氯酯醒聯(lián)合穴位埋線觀察對(duì) V D大
鼠學(xué)習(xí)記憶能力的作用并在體記錄海 馬齒狀 回長(zhǎng)時(shí)程增強(qiáng)
( 1 o n g t e r m p o t e n t i a t i o n ， m ) 變化， 探討氯酯醒聯(lián)合穴位埋線治
療 V D的可能機(jī)制， 為臨床治療 V D提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
1 材料 與方 法
1 . 1 實(shí)驗(yàn)器材及藥品 B L - 4 2 0 E生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)( 成都泰
盟科技生產(chǎn)) ； S WF 一 1 B型高阻抗微電極放大器( 成都儀器廠生
產(chǎn)) ； D Y T 一 1 型微電極推進(jìn)器和腦立體定位儀( 天津醫(yī)療器械研
究所生產(chǎn)) 。鹽酸甲氯芬酯膠囊( 廣東先強(qiáng)藥業(yè)有限公司產(chǎn)品
批號(hào)： 0 6 0 1 0 6 ) 。
1 . 2 動(dòng)物分組及 V D模型制作 健康雄性 S D大鼠 6 0只， 體
重 2 8 0～ 3 0 0 g ， 由貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院動(dòng)物中心提供。將動(dòng)物隨機(jī)分為
假手術(shù)組、 V D模型組、 氯酯醒組和氯酯醒和穴位埋線組( 聯(lián)合
組) 。采用改良P u l s i n e l l i S四血管阻斷法( f o u r · v e s s e l o c c l u s i o n ，4 一 V O ) 建立 V D大 鼠模 型。模型組、 氯酯醛組和聯(lián)合組用
1 0 %水合氯醛( 0 . 3 5 m l / l O 0 g ) 腹腔麻醉， 伏臥固定， 行背側(cè)頸
正中切口， 暴露雙側(cè)第一頸椎橫突翼小孔 。 用電凝針燒灼雙側(cè)
翼小孔內(nèi)的椎動(dòng)脈， 造成永久性閉塞。再將大鼠仰臥固定 ， 行
腹側(cè)頸正中切口， 分離雙側(cè)頸總動(dòng)脈， 穿線備用。2 4 h后再用
水合氯醛腹腔麻醉。 用微動(dòng)脈夾夾閉雙側(cè)頸總動(dòng)脈 5 m i n 。 共夾
閉3次， 每次間隔 I h 。假手術(shù)組處理步驟同上， 但不進(jìn)行椎動(dòng)
脈燒灼和頸總動(dòng)脈夾閉。
1 . 3 治療方法 待動(dòng)物造模清醒后， 開(kāi)始灌 胃給藥。氯酯醒
基金項(xiàng) 目： 貴陽(yáng)市科技局資助項(xiàng)目( T 2 0 0 6 — 1 2 )
作者簡(jiǎn)介 ： 陳 粲( 1 9 4 9 一 ) ， 女， 副教授 ， 碩士生導(dǎo)師， 主要從事神經(jīng)生理
研究 。
組和聯(lián)合組用氯酯醒按人鼠換算的量( 1 0 0 m g· k g ～ · d ) 溶
于2 m l 水中灌胃， 假手術(shù)組和模型組給予相同體積的蒸餾水灌
胃， 連續(xù) 3 W， 同時(shí)聯(lián)合組按照?qǐng)D譜定位， 在雙側(cè)腎俞穴、 足三里
穴常規(guī)消毒后， 用 8號(hào)注射針頭埋入 0 ， 5 c m長(zhǎng)的( 4 - 0 ) 醫(yī)用羊
腸線， 每 2 0 d埋線一次 ， 共 2次。
1 . 4 M o r r i r s 水迷宮測(cè)試 第 3周開(kāi)始。水迷宮為直徑 1 6 0
c m， 高5 0 c m的圓形水池， 水深 3 0 c m， 水溫保持 ( 2 5±I ) ℃， 水
內(nèi)放入墨汁并混勻。水池等分為四個(gè)象限， 在第三象限置于一
個(gè)直徑 1 2 c m， 高 2 8 c m的站臺(tái)， 沒(méi)于水下2 c m。實(shí)驗(yàn)期間水迷
宮周圍 參照物保持不變。①定位航行實(shí)驗(yàn)： 實(shí)驗(yàn)歷時(shí) 6 d ， 每
天上、 下午兩個(gè)時(shí)間段， 早上 I、 Ⅱ象限， 下午Ⅲ、 Ⅳ象限。將大
鼠面朝池壁放入水中， 記錄6 0 S內(nèi)從入水到爬上站臺(tái)所需時(shí)間
即逃避潛伏期( 以在站臺(tái)上停留達(dá)到或超過(guò) 1 0 s 為上臺(tái)， 不足
1 0 S 不作為上臺(tái)) 。若大鼠未找到站臺(tái)， 引導(dǎo)大鼠上站 臺(tái)并停
留 1 0 S ， 潛伏期記為6 0 S 。②空間探索實(shí)驗(yàn)： 第 7天撤出站臺(tái)，記錄大鼠2 m i n內(nèi)穿過(guò)原站臺(tái)位置的次數(shù)。
1 . 5 L T P的測(cè)定 用 2 0 %烏拉坦( 0 . 3 g / k g )+0 . 5 %氯醛糖
( 0 . 2 5 g / k g ) 腹腔麻醉大鼠后 固定于腦立體定位儀上， 電極定
位參照 G e o r g e P a x i n o s腦定位圖譜 ， 刺激電極插入內(nèi)嗅區(qū)前穿
通纖 維 ( p e r f o r a n t p a t h ， P P)間 ( A P 7 . 8 m i l l ， I A. 2 m i l l ， t t 3 . 5
m i l 1 ) ； 記錄電極插 入同側(cè)齒狀回顆粒細(xì)胞層 ( A P 3 . 5 m m， L 2
mm， t t 3 . 5 m i l 1 ) 。先給予波寬0 . 1 m s 的單個(gè)刺激誘發(fā)群峰電位
( p o p u l a t i o n s p i k e ， P S ) ， 然后用 1次/ m i n ， 強(qiáng)度為能引起最大 P S
強(qiáng)度的 1 / 2為測(cè)試刺激強(qiáng)度 ， 連續(xù)刺激 3 0 m i n ， 之后用同樣刺
激強(qiáng)度的高頻刺激( h i g h f r e q u e n c y s t i m u l a t i o n ......
鹽酸甲氯芬酯聯(lián)合穴位埋線對(duì)血管性癡呆大鼠模型學(xué)習(xí)記憶及海馬齒狀 回
長(zhǎng)時(shí)程增強(qiáng)的影響
陳 粲 楊 瓊 戴桃李 潘 婭 王旭東 張 敏 ( 貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院生理學(xué)教研室， 貴州 貴陽(yáng) 5 5 o o o 4 )
[ 摘 要] 目的 探討鹽酸甲氯芬酯和穴位埋線聯(lián)合作用對(duì)血管性癡呆( V D) 大鼠學(xué)習(xí)記憶的影響及可能的機(jī)制。方法 改良P u l s i n e l l i s四
血管阻斷法建立 V D大鼠模型； 在造模后給予鹽酸甲氯芬酯和穴位埋線聯(lián)合治療； 采用Mo r r i s 迷宮檢測(cè)學(xué)習(xí)記憶能力； 在體記錄海馬齒狀回長(zhǎng)時(shí)程增
強(qiáng)( I 胛 ) ， 觀察并比較各組于高頻刺激( H F S ) 后的變化。結(jié)果 經(jīng)鹽酸甲氯芬酯聯(lián)合穴位埋線作用后 ， 與模型組相 比， 水迷宮成績(jī)顯著提高( P<
0 . 0 1 ) ； 與鹽酸甲氯芬酯組比成績(jī)提高明顯( P . 0 1 ， P< O . 0 5 ) 。在 H F S后海馬齒狀回I P 群體峰電位( P s ) 幅值、 P s斜率聯(lián)合組比模型組顯著提高
( P
埋線聯(lián)合作用可改善VD大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力( 比鹽酸甲氯芬酯單獨(dú)作用更為明顯) ， 其聯(lián)合作用對(duì) V D大鼠海馬齒狀回 I 的易化作用可能是其
改善學(xué)習(xí)記憶能力的機(jī)制之一。
[ 關(guān)鍵詞] 血管性癡呆； 學(xué)習(xí)記憶； 長(zhǎng)時(shí)程增強(qiáng)； 海馬齒狀回； 埋線； 鹽酸甲氯芬酯
[ 中圖分類號(hào)] 1 1 9 7 1 ； R 3 3 8 . 6 4 [ 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [ 文章編號(hào)] 1 0 0 5 - 9 2 0 2( 2 O O 7) 1 5 - 1 4 6 0 - 0 3
血管性癡呆( V D) 發(fā)病的確切病理生理機(jī)制尚不明了， 至
今也無(wú)特效藥和治療手段。鹽酸甲氯芬酯( 氯酯醒) 是使用多
年的中樞興奮藥 ， 主要用于腦外傷的治療等 ， 隨著研究的不斷
深入， 發(fā)現(xiàn)它不僅是腦細(xì)胞代謝功能活化劑， 還具有促智及抗
腦缺血等多種藥理作用…。穴位埋線 的治療方法有扶正為主
的治療作用。本實(shí)驗(yàn)采用氯酯醒聯(lián)合穴位埋線觀察對(duì) V D大
鼠學(xué)習(xí)記憶能力的作用并在體記錄海 馬齒狀 回長(zhǎng)時(shí)程增強(qiáng)
( 1 o n g t e r m p o t e n t i a t i o n ， m ) 變化， 探討氯酯醒聯(lián)合穴位埋線治
療 V D的可能機(jī)制， 為臨床治療 V D提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
1 材料 與方 法
1 . 1 實(shí)驗(yàn)器材及藥品 B L - 4 2 0 E生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)( 成都泰
盟科技生產(chǎn)) ； S WF 一 1 B型高阻抗微電極放大器( 成都儀器廠生
產(chǎn)) ； D Y T 一 1 型微電極推進(jìn)器和腦立體定位儀( 天津醫(yī)療器械研
究所生產(chǎn)) 。鹽酸甲氯芬酯膠囊( 廣東先強(qiáng)藥業(yè)有限公司產(chǎn)品
批號(hào)： 0 6 0 1 0 6 ) 。
1 . 2 動(dòng)物分組及 V D模型制作 健康雄性 S D大鼠 6 0只， 體
重 2 8 0～ 3 0 0 g ， 由貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院動(dòng)物中心提供。將動(dòng)物隨機(jī)分為
假手術(shù)組、 V D模型組、 氯酯醒組和氯酯醒和穴位埋線組( 聯(lián)合
組) 。采用改良P u l s i n e l l i S四血管阻斷法( f o u r · v e s s e l o c c l u s i o n ，4 一 V O ) 建立 V D大 鼠模 型。模型組、 氯酯醛組和聯(lián)合組用
1 0 %水合氯醛( 0 . 3 5 m l / l O 0 g ) 腹腔麻醉， 伏臥固定， 行背側(cè)頸
正中切口， 暴露雙側(cè)第一頸椎橫突翼小孔 。 用電凝針燒灼雙側(cè)
翼小孔內(nèi)的椎動(dòng)脈， 造成永久性閉塞。再將大鼠仰臥固定 ， 行
腹側(cè)頸正中切口， 分離雙側(cè)頸總動(dòng)脈， 穿線備用。2 4 h后再用
水合氯醛腹腔麻醉。 用微動(dòng)脈夾夾閉雙側(cè)頸總動(dòng)脈 5 m i n 。 共夾
閉3次， 每次間隔 I h 。假手術(shù)組處理步驟同上， 但不進(jìn)行椎動(dòng)
脈燒灼和頸總動(dòng)脈夾閉。
1 . 3 治療方法 待動(dòng)物造模清醒后， 開(kāi)始灌 胃給藥。氯酯醒
基金項(xiàng) 目： 貴陽(yáng)市科技局資助項(xiàng)目( T 2 0 0 6 — 1 2 )
作者簡(jiǎn)介 ： 陳 粲( 1 9 4 9 一 ) ， 女， 副教授 ， 碩士生導(dǎo)師， 主要從事神經(jīng)生理
研究 。
組和聯(lián)合組用氯酯醒按人鼠換算的量( 1 0 0 m g· k g ～ · d ) 溶
于2 m l 水中灌胃， 假手術(shù)組和模型組給予相同體積的蒸餾水灌
胃， 連續(xù) 3 W， 同時(shí)聯(lián)合組按照?qǐng)D譜定位， 在雙側(cè)腎俞穴、 足三里
穴常規(guī)消毒后， 用 8號(hào)注射針頭埋入 0 ， 5 c m長(zhǎng)的( 4 - 0 ) 醫(yī)用羊
腸線， 每 2 0 d埋線一次 ， 共 2次。
1 . 4 M o r r i r s 水迷宮測(cè)試 第 3周開(kāi)始。水迷宮為直徑 1 6 0
c m， 高5 0 c m的圓形水池， 水深 3 0 c m， 水溫保持 ( 2 5±I ) ℃， 水
內(nèi)放入墨汁并混勻。水池等分為四個(gè)象限， 在第三象限置于一
個(gè)直徑 1 2 c m， 高 2 8 c m的站臺(tái)， 沒(méi)于水下2 c m。實(shí)驗(yàn)期間水迷
宮周圍 參照物保持不變。①定位航行實(shí)驗(yàn)： 實(shí)驗(yàn)歷時(shí) 6 d ， 每
天上、 下午兩個(gè)時(shí)間段， 早上 I、 Ⅱ象限， 下午Ⅲ、 Ⅳ象限。將大
鼠面朝池壁放入水中， 記錄6 0 S內(nèi)從入水到爬上站臺(tái)所需時(shí)間
即逃避潛伏期( 以在站臺(tái)上停留達(dá)到或超過(guò) 1 0 s 為上臺(tái)， 不足
1 0 S 不作為上臺(tái)) 。若大鼠未找到站臺(tái)， 引導(dǎo)大鼠上站 臺(tái)并停
留 1 0 S ， 潛伏期記為6 0 S 。②空間探索實(shí)驗(yàn)： 第 7天撤出站臺(tái)，記錄大鼠2 m i n內(nèi)穿過(guò)原站臺(tái)位置的次數(shù)。
1 . 5 L T P的測(cè)定 用 2 0 %烏拉坦( 0 . 3 g / k g )+0 . 5 %氯醛糖
( 0 . 2 5 g / k g ) 腹腔麻醉大鼠后 固定于腦立體定位儀上， 電極定
位參照 G e o r g e P a x i n o s腦定位圖譜 ， 刺激電極插入內(nèi)嗅區(qū)前穿
通纖 維 ( p e r f o r a n t p a t h ， P P)間 ( A P 7 . 8 m i l l ， I A. 2 m i l l ， t t 3 . 5
m i l 1 ) ； 記錄電極插 入同側(cè)齒狀回顆粒細(xì)胞層 ( A P 3 . 5 m m， L 2
mm， t t 3 . 5 m i l 1 ) 。先給予波寬0 . 1 m s 的單個(gè)刺激誘發(fā)群峰電位
( p o p u l a t i o n s p i k e ， P S ) ， 然后用 1次/ m i n ， 強(qiáng)度為能引起最大 P S
強(qiáng)度的 1 / 2為測(cè)試刺激強(qiáng)度 ， 連續(xù)刺激 3 0 m i n ， 之后用同樣刺
激強(qiáng)度的高頻刺激( h i g h f r e q u e n c y s t i m u l a t i o n ......
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