百會(huì)穴埋線(xiàn)療法對(duì)血管性癡呆大鼠學(xué)習(xí)記憶及SOD、NO的影響.PDF
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埋線(xiàn)與膏藥,埋線(xiàn)療法文獻(xiàn)資料,埋線(xiàn)2008
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針灸臨床雜志 2 O O 8年第 2 4卷第 6 期
實(shí) 驗(yàn) 研 究
百會(huì)穴埋線(xiàn)療法對(duì)血管性
癡呆大鼠學(xué)習(xí)記憶及 S O D、 N O的影響*
’ 王延武 ， 陳華德2
( 1 . 浙江中醫(yī)藥大學(xué)附屬?gòu)V興醫(yī)院， 浙江 杭州 3 1 0 0 0 7 ； 2 . 浙江中醫(yī)藥大學(xué)， 浙江 杭州 3 1 0 0 5 3 )
摘 要： 目的： 觀察百會(huì)穴埋線(xiàn)療法對(duì)血管性癡呆大鼠學(xué)習(xí)記憶及 S O D、 N O的影響。方法： 采用夾閉再
通大鼠雙側(cè)頸總動(dòng)脈的方法建立缺血再灌注損傷 V D模型。設(shè)立假手術(shù)對(duì)照組、 模型對(duì)照組、 電針組和
埋線(xiàn)組。通過(guò) M o r r i s 水迷宮觀察 V D大鼠的學(xué)習(xí)和記憶能力； 并檢測(cè) V D大鼠腦組織 s o D活性和 N O含
量。結(jié)果： 百會(huì)穴位埋線(xiàn)療法能顯著縮短 V D大鼠定位航行試驗(yàn)的潛伏期； 在空間探索試驗(yàn)中， 能提高
跨越原平臺(tái)位置的次數(shù)； 埋線(xiàn)組較模型組腦內(nèi)S O D活性和 N O含量均明顯升高。結(jié)論： 埋線(xiàn)療法能改善
V D大鼠的空間學(xué)習(xí)和記憶能力， 提高V D大鼠腦組織 N O的含量、 增強(qiáng) S O D活力， 療效與電針相近。
關(guān)鍵詞： 埋線(xiàn)療法； 百會(huì)穴； 血管性癡呆； 學(xué)習(xí)記憶
中圖分類(lèi)號(hào)： R 2 4 5 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼： A 文章編號(hào)： 1 0 0 5— 0 7 7 9 ( 2 0 0 8 ) 0 6—0 0 4 7 —0 3
血管性癡呆 ( V a s c u l a r d e m e n t i a ， V D) 是我 國(guó)最常見(jiàn)
的老年期癡呆類(lèi)型…， 不僅影響病人的健康和生活質(zhì)
量， 而且造成巨大的社會(huì)和家庭負(fù)擔(dān)。學(xué)習(xí)記憶障礙
是血管性癡呆的首要表現(xiàn)， 改善學(xué)習(xí)記憶能力是防治
V D的關(guān)鍵。對(duì) V D的治療， 目前國(guó)內(nèi)外尚無(wú)特效療
法， 針灸對(duì) V D有肯定的治療作用[ 。穴位埋線(xiàn)療法
與針灸療法相比， 具有操作簡(jiǎn)單、 作用時(shí)間長(zhǎng)、 療效持
久的優(yōu)點(diǎn)， 目前未見(jiàn)有穴位埋線(xiàn)療法治療血管性癡呆
的研究報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)觀察了百會(huì)穴埋線(xiàn)療法對(duì) V D大
鼠學(xué)習(xí)記憶的影響及 S O D、 N O含量的變化�，F(xiàn)將結(jié)
果報(bào)告如下。
1 材料
1 . 1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 選用健康雄性 S p r a g u e —D a w l e y ( S D )
大鼠6 5只， 體重 1 8 0～2 0 0 g ， 購(gòu)自中國(guó)科學(xué)院上海實(shí)
驗(yàn)動(dòng)物中心， 由浙江中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心飼養(yǎng)。
1 . 2 主要儀器設(shè)備 穴位埋線(xiàn)器： 北京任曉艷穴位埋
線(xiàn)醫(yī)學(xué)研究中心； 藥物羊腸線(xiàn)： 北京任曉艷穴位埋線(xiàn)醫(yī)
學(xué)研究中心； 韓氏穴位神經(jīng)刺激儀： 北京華衛(wèi)產(chǎn)業(yè)開(kāi)發(fā)
公司， I J - I 2 02 H； B T S 1 5 A半 自動(dòng)生化分析儀： 上海精宏
實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司； Mo r r i s 水迷宮實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)： 北京現(xiàn)代
太極電子有限公司；
1 . 3 試劑 S O D檢測(cè)試劑盒： 南京建成生物工程研究
所， 批號(hào)： 2 0 0 5 . 1 2 . 1 4 ； N O檢測(cè)試劑盒： 南京建成生物
*基金項(xiàng)目： 浙江省中醫(yī)藥管理局資助課題， 編號(hào)： 2 0 0 6 0 2 1 2
作者簡(jiǎn)介： 王延武( 1 9 7 9 一) ， 男， 醫(yī)師， 醫(yī)學(xué)碩士， 主要從事針灸調(diào)節(jié)腦功
能障礙的研究。
工程研究所 ， 批號(hào)： 2 0 0 5 . 1 2 . 1 5 ； 考馬斯亮藍(lán)檢測(cè)試劑
盒： 南京建成生物工程研究所， 批號(hào)： 2 0 0 5 . 1 2 . 1 4 。
2 方法
2 . 1 Mo r r i s 水迷宮游泳訓(xùn)練 把大鼠置于 M o r r i s 水迷
宮學(xué)習(xí)訓(xùn)練 3天， 訓(xùn)練過(guò)程具體如下： M o r r i s 水迷宮為
一
圓形不銹鋼水池， 直徑 1 2 0 c m， 高5 8 c m， 池壁池底黑
色， 水池內(nèi)水深約 3 1 . 5 c m， 水溫保持 2 3±2 ~ C， 池壁上
4個(gè)等距離點(diǎn)將水池均分為第 1至第4個(gè)象限， 任選 1
個(gè)象限( 第 1 象限) 并在其中央放置一直徑 1 1 c m， 高
3 0 . 5 c m的圓形透明站臺(tái)， 站臺(tái)頂沒(méi)于水面下 1 c m， 距
離池壁 3 0 c m， 站臺(tái)在整個(gè)實(shí)驗(yàn)中位置保持不變， 水池
正上方懸掛攝像頭， 通過(guò)視頻采集系統(tǒng)采集水迷宮內(nèi)
信息并輸入計(jì)算機(jī)。把每只大鼠從第一象限的中點(diǎn)，頭貼水池壁放入水池中， 讓大鼠在迷宮里游 2 n l l ‘ n 。將
2 m i n內(nèi)不能找到站臺(tái)的大鼠引導(dǎo)至平臺(tái)， 使大鼠在平
臺(tái)站立 1 m i n ； 2 r ai n內(nèi)能找到站臺(tái)的大鼠， 也使之在平
臺(tái)站立 1 m i n ， 使大鼠熟悉周?chē)沫h(huán)境和站臺(tái)的位置。
每只大鼠在第 1 象限做完以后， 再依次將大鼠從第 2 、第 3 、 第 4象限放入水池中， 方法同上。第 1天和第 2
天為訓(xùn)練期， 不記錄成績(jī)。第 3天開(kāi)始記錄大鼠游泳
成績(jī)。記錄大鼠從入水到尋找并爬上站臺(tái)的時(shí)間( 定
位航行實(shí)驗(yàn)) ， 2 r ai n內(nèi)不能找到站臺(tái)的大鼠， 其逃避潛
伏期以2 m i n 計(jì)。將6 5只大鼠全部完成定位航行實(shí)驗(yàn)
后， 撤去站臺(tái)， 按順序從第 3 象限池壁中點(diǎn)頭貼壁放入
水中， 讓大鼠在水池中游 2 m i n ， 系統(tǒng)將自動(dòng)記錄大鼠
在水池的運(yùn)動(dòng)軌跡( 空間探索實(shí)驗(yàn)) 。這樣每只大鼠共
記錄5次實(shí)驗(yàn)成績(jī)， 其中前 4次為與 1 、 2 、 3 、 4象限相
維普資訊 http://www.cqvip.com 對(duì)應(yīng)的定位航行實(shí)驗(yàn)成績(jī)， 第 5次為空間探索成績(jī)。
實(shí)驗(yàn)過(guò)程中， M o r r i s 水迷宮分析參數(shù)、 水溫、 室溫、 周?chē)?br/>
環(huán)境等基本保持不變， 以避免外界因素對(duì)實(shí)驗(yàn)的干擾。
2 . 2 造模方法 V D大鼠模型制備參考李氏[ 3 ] 的方法
并加以改進(jìn)： 用 3 %異戊巴比妥鈉( 0 . 1 5 m l / 1 0 0 g體
重) 腹腔注射麻醉大鼠， 把大鼠頭部朝上固定于自制大
鼠固定儀上， 充分暴露頸部， 頸正中行約 1 c m長(zhǎng)的縱
向切口， 分離雙側(cè)頸總動(dòng)脈， 套以“ 4 ” 號(hào)醫(yī)用絲線(xiàn)， 阻斷
雙側(cè)頸總動(dòng)脈血流 2 0 mi n后再灌注 1 0 m i n ， 然后再阻
斷2 0 m i n ， 再灌注后縫合切口。第 1 次阻斷頸總動(dòng)脈
的同時(shí)在距大鼠尾端約 1 c m處剪尾放血， 放血量為大
鼠總血容量( 占體重的7 . 4 %) 的 1 0 %， 然后結(jié)扎止血。
假手術(shù)對(duì)照組大鼠只分離雙側(cè)頸總動(dòng)脈， 不阻斷血流
和剪尾放血， 其余同模型制備的操作。術(shù)后常規(guī)飼養(yǎng)
大鼠2 天， 造模后第 3天選擇符合腦缺血征象以及無(wú)
肢體殘疾和視力受損的大鼠作為合格的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模
型。
2 . 3 實(shí)驗(yàn)分組 把造模成功的 V D大鼠模型隨機(jī)分
為模型對(duì)照組、 電針治療組和埋線(xiàn)治療組， 加上假手術(shù)
對(duì)照組， 實(shí)驗(yàn)共分4組。每組有9只大鼠。實(shí)驗(yàn)處理：
①埋線(xiàn)治療組： 對(duì)百會(huì)穴進(jìn)行埋線(xiàn)治療。埋線(xiàn)時(shí)需 2
人配合， 一人左手固定大鼠頭頸部， 右手固定大鼠后
肢， 另一人穿刺埋線(xiàn)。埋線(xiàn)方法： 先將羊腸線(xiàn)置于消毒
彎盤(pán)中， 并剪成 0 . 6 c m長(zhǎng)的小段。參照《 實(shí)驗(yàn)針灸
學(xué)》 ] 中大鼠穴位定位方法取“ 百會(huì)” 穴( 頂骨正中處) ......
實(shí) 驗(yàn) 研 究
百會(huì)穴埋線(xiàn)療法對(duì)血管性
癡呆大鼠學(xué)習(xí)記憶及 S O D、 N O的影響*
’ 王延武 ， 陳華德2
( 1 . 浙江中醫(yī)藥大學(xué)附屬?gòu)V興醫(yī)院， 浙江 杭州 3 1 0 0 0 7 ； 2 . 浙江中醫(yī)藥大學(xué)， 浙江 杭州 3 1 0 0 5 3 )
摘 要： 目的： 觀察百會(huì)穴埋線(xiàn)療法對(duì)血管性癡呆大鼠學(xué)習(xí)記憶及 S O D、 N O的影響。方法： 采用夾閉再
通大鼠雙側(cè)頸總動(dòng)脈的方法建立缺血再灌注損傷 V D模型。設(shè)立假手術(shù)對(duì)照組、 模型對(duì)照組、 電針組和
埋線(xiàn)組。通過(guò) M o r r i s 水迷宮觀察 V D大鼠的學(xué)習(xí)和記憶能力； 并檢測(cè) V D大鼠腦組織 s o D活性和 N O含
量。結(jié)果： 百會(huì)穴位埋線(xiàn)療法能顯著縮短 V D大鼠定位航行試驗(yàn)的潛伏期； 在空間探索試驗(yàn)中， 能提高
跨越原平臺(tái)位置的次數(shù)； 埋線(xiàn)組較模型組腦內(nèi)S O D活性和 N O含量均明顯升高。結(jié)論： 埋線(xiàn)療法能改善
V D大鼠的空間學(xué)習(xí)和記憶能力， 提高V D大鼠腦組織 N O的含量、 增強(qiáng) S O D活力， 療效與電針相近。
關(guān)鍵詞： 埋線(xiàn)療法； 百會(huì)穴； 血管性癡呆； 學(xué)習(xí)記憶
中圖分類(lèi)號(hào)： R 2 4 5 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼： A 文章編號(hào)： 1 0 0 5— 0 7 7 9 ( 2 0 0 8 ) 0 6—0 0 4 7 —0 3
血管性癡呆 ( V a s c u l a r d e m e n t i a ， V D) 是我 國(guó)最常見(jiàn)
的老年期癡呆類(lèi)型…， 不僅影響病人的健康和生活質(zhì)
量， 而且造成巨大的社會(huì)和家庭負(fù)擔(dān)。學(xué)習(xí)記憶障礙
是血管性癡呆的首要表現(xiàn)， 改善學(xué)習(xí)記憶能力是防治
V D的關(guān)鍵。對(duì) V D的治療， 目前國(guó)內(nèi)外尚無(wú)特效療
法， 針灸對(duì) V D有肯定的治療作用[ 。穴位埋線(xiàn)療法
與針灸療法相比， 具有操作簡(jiǎn)單、 作用時(shí)間長(zhǎng)、 療效持
久的優(yōu)點(diǎn)， 目前未見(jiàn)有穴位埋線(xiàn)療法治療血管性癡呆
的研究報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)觀察了百會(huì)穴埋線(xiàn)療法對(duì) V D大
鼠學(xué)習(xí)記憶的影響及 S O D、 N O含量的變化�，F(xiàn)將結(jié)
果報(bào)告如下。
1 材料
1 . 1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 選用健康雄性 S p r a g u e —D a w l e y ( S D )
大鼠6 5只， 體重 1 8 0～2 0 0 g ， 購(gòu)自中國(guó)科學(xué)院上海實(shí)
驗(yàn)動(dòng)物中心， 由浙江中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心飼養(yǎng)。
1 . 2 主要儀器設(shè)備 穴位埋線(xiàn)器： 北京任曉艷穴位埋
線(xiàn)醫(yī)學(xué)研究中心； 藥物羊腸線(xiàn)： 北京任曉艷穴位埋線(xiàn)醫(yī)
學(xué)研究中心； 韓氏穴位神經(jīng)刺激儀： 北京華衛(wèi)產(chǎn)業(yè)開(kāi)發(fā)
公司， I J - I 2 02 H； B T S 1 5 A半 自動(dòng)生化分析儀： 上海精宏
實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司； Mo r r i s 水迷宮實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)： 北京現(xiàn)代
太極電子有限公司；
1 . 3 試劑 S O D檢測(cè)試劑盒： 南京建成生物工程研究
所， 批號(hào)： 2 0 0 5 . 1 2 . 1 4 ； N O檢測(cè)試劑盒： 南京建成生物
*基金項(xiàng)目： 浙江省中醫(yī)藥管理局資助課題， 編號(hào)： 2 0 0 6 0 2 1 2
作者簡(jiǎn)介： 王延武( 1 9 7 9 一) ， 男， 醫(yī)師， 醫(yī)學(xué)碩士， 主要從事針灸調(diào)節(jié)腦功
能障礙的研究。
工程研究所 ， 批號(hào)： 2 0 0 5 . 1 2 . 1 5 ； 考馬斯亮藍(lán)檢測(cè)試劑
盒： 南京建成生物工程研究所， 批號(hào)： 2 0 0 5 . 1 2 . 1 4 。
2 方法
2 . 1 Mo r r i s 水迷宮游泳訓(xùn)練 把大鼠置于 M o r r i s 水迷
宮學(xué)習(xí)訓(xùn)練 3天， 訓(xùn)練過(guò)程具體如下： M o r r i s 水迷宮為
一
圓形不銹鋼水池， 直徑 1 2 0 c m， 高5 8 c m， 池壁池底黑
色， 水池內(nèi)水深約 3 1 . 5 c m， 水溫保持 2 3±2 ~ C， 池壁上
4個(gè)等距離點(diǎn)將水池均分為第 1至第4個(gè)象限， 任選 1
個(gè)象限( 第 1 象限) 并在其中央放置一直徑 1 1 c m， 高
3 0 . 5 c m的圓形透明站臺(tái)， 站臺(tái)頂沒(méi)于水面下 1 c m， 距
離池壁 3 0 c m， 站臺(tái)在整個(gè)實(shí)驗(yàn)中位置保持不變， 水池
正上方懸掛攝像頭， 通過(guò)視頻采集系統(tǒng)采集水迷宮內(nèi)
信息并輸入計(jì)算機(jī)。把每只大鼠從第一象限的中點(diǎn)，頭貼水池壁放入水池中， 讓大鼠在迷宮里游 2 n l l ‘ n 。將
2 m i n內(nèi)不能找到站臺(tái)的大鼠引導(dǎo)至平臺(tái)， 使大鼠在平
臺(tái)站立 1 m i n ； 2 r ai n內(nèi)能找到站臺(tái)的大鼠， 也使之在平
臺(tái)站立 1 m i n ， 使大鼠熟悉周?chē)沫h(huán)境和站臺(tái)的位置。
每只大鼠在第 1 象限做完以后， 再依次將大鼠從第 2 、第 3 、 第 4象限放入水池中， 方法同上。第 1天和第 2
天為訓(xùn)練期， 不記錄成績(jī)。第 3天開(kāi)始記錄大鼠游泳
成績(jī)。記錄大鼠從入水到尋找并爬上站臺(tái)的時(shí)間( 定
位航行實(shí)驗(yàn)) ， 2 r ai n內(nèi)不能找到站臺(tái)的大鼠， 其逃避潛
伏期以2 m i n 計(jì)。將6 5只大鼠全部完成定位航行實(shí)驗(yàn)
后， 撤去站臺(tái)， 按順序從第 3 象限池壁中點(diǎn)頭貼壁放入
水中， 讓大鼠在水池中游 2 m i n ， 系統(tǒng)將自動(dòng)記錄大鼠
在水池的運(yùn)動(dòng)軌跡( 空間探索實(shí)驗(yàn)) 。這樣每只大鼠共
記錄5次實(shí)驗(yàn)成績(jī)， 其中前 4次為與 1 、 2 、 3 、 4象限相
維普資訊 http://www.cqvip.com 對(duì)應(yīng)的定位航行實(shí)驗(yàn)成績(jī)， 第 5次為空間探索成績(jī)。
實(shí)驗(yàn)過(guò)程中， M o r r i s 水迷宮分析參數(shù)、 水溫、 室溫、 周?chē)?br/>
環(huán)境等基本保持不變， 以避免外界因素對(duì)實(shí)驗(yàn)的干擾。
2 . 2 造模方法 V D大鼠模型制備參考李氏[ 3 ] 的方法
并加以改進(jìn)： 用 3 %異戊巴比妥鈉( 0 . 1 5 m l / 1 0 0 g體
重) 腹腔注射麻醉大鼠， 把大鼠頭部朝上固定于自制大
鼠固定儀上， 充分暴露頸部， 頸正中行約 1 c m長(zhǎng)的縱
向切口， 分離雙側(cè)頸總動(dòng)脈， 套以“ 4 ” 號(hào)醫(yī)用絲線(xiàn)， 阻斷
雙側(cè)頸總動(dòng)脈血流 2 0 mi n后再灌注 1 0 m i n ， 然后再阻
斷2 0 m i n ， 再灌注后縫合切口。第 1 次阻斷頸總動(dòng)脈
的同時(shí)在距大鼠尾端約 1 c m處剪尾放血， 放血量為大
鼠總血容量( 占體重的7 . 4 %) 的 1 0 %， 然后結(jié)扎止血。
假手術(shù)對(duì)照組大鼠只分離雙側(cè)頸總動(dòng)脈， 不阻斷血流
和剪尾放血， 其余同模型制備的操作。術(shù)后常規(guī)飼養(yǎng)
大鼠2 天， 造模后第 3天選擇符合腦缺血征象以及無(wú)
肢體殘疾和視力受損的大鼠作為合格的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模
型。
2 . 3 實(shí)驗(yàn)分組 把造模成功的 V D大鼠模型隨機(jī)分
為模型對(duì)照組、 電針治療組和埋線(xiàn)治療組， 加上假手術(shù)
對(duì)照組， 實(shí)驗(yàn)共分4組。每組有9只大鼠。實(shí)驗(yàn)處理：
①埋線(xiàn)治療組： 對(duì)百會(huì)穴進(jìn)行埋線(xiàn)治療。埋線(xiàn)時(shí)需 2
人配合， 一人左手固定大鼠頭頸部， 右手固定大鼠后
肢， 另一人穿刺埋線(xiàn)。埋線(xiàn)方法： 先將羊腸線(xiàn)置于消毒
彎盤(pán)中， 并剪成 0 . 6 c m長(zhǎng)的小段。參照《 實(shí)驗(yàn)針灸
學(xué)》 ] 中大鼠穴位定位方法取“ 百會(huì)” 穴( 頂骨正中處) ......
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