主動(dòng)特異性免疫療法治療腫瘤
以樹突狀細(xì)胞為基礎(chǔ)，應(yīng)用主動(dòng)特異性免疫療法治療腫瘤，是近幾年醫(yī)學(xué)界研究人體樹突狀細(xì)胞領(lǐng)域最受關(guān)注的熱點(diǎn)。隨著越來越多的人類腫瘤特異性抗原被醫(yī)生確認(rèn)和發(fā)現(xiàn)，為應(yīng)用腫瘤抗原致敏的樹突狀細(xì)胞回輸機(jī)體而激發(fā)人體特異性抗腫瘤免疫應(yīng)答奠定了基礎(chǔ)。目前，應(yīng)用腫瘤抗原體外致敏樹突狀細(xì)胞的方式有多種。例如，腫瘤細(xì)胞凍融物、基因工程腫瘤蛋白抗原或人工合成的腫瘤抗原多肽在體外沖擊致敏樹突狀細(xì)胞；或?qū)⒛[瘤抗原基因通過腺病毒、逆轉(zhuǎn)錄病毒載體等轉(zhuǎn)入樹突狀細(xì)胞。人癌胚抗原重組痘苗病毒是以天壇株痘苗病毒761株為載體所構(gòu)建的、表達(dá)人癌胚抗原的重組減毒疫苗。它已被證實(shí)，能在真核系統(tǒng)高效而準(zhǔn)確地表達(dá)細(xì)胞膜糖蛋白人癌胚抗原。現(xiàn)在，我們在以下兩個(gè)相關(guān)方面的認(rèn)識已所進(jìn)展：一是，腫瘤抗原基因，即人癌胚抗原DNA，通過減毒的痘苗病毒載體轉(zhuǎn)入人體樹突狀細(xì)胞后，機(jī)體內(nèi)的相關(guān)反應(yīng)；二是，對人癌胚抗原重組痘苗病毒轉(zhuǎn)染的樹突狀細(xì)胞在機(jī)體內(nèi)所發(fā)揮的治療作用，即其所激發(fā)的抗人癌胚抗原分泌性腫瘤免疫狀態(tài)。
在人體內(nèi)，成熟的樹突狀細(xì)胞表現(xiàn)出4個(gè)主要特征：一是，細(xì)胞形狀不規(guī)則，表面有許多樹枝狀突起；二是，細(xì)胞表面具有豐富的、有助于抗原提呈的分子，如高表達(dá)MHCⅠ、Ⅱ分子，共刺激分子B7-1、B7-2，細(xì)胞間粘附分子CD40、ICAM-1等；三是，在混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)中具有激活靜止T細(xì)胞的能力；四是，具有向局部淋巴細(xì)胞，即T細(xì)胞區(qū)遷移的能力。
, http://www.www.srpcoatings.com
我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：人體外周血單核細(xì)胞在體外，經(jīng)人重組粒-巨噬細(xì)胞集落刺激因子及人重組白細(xì)胞介素-4聯(lián)合刺激后具有典型的樹突狀突起，細(xì)胞表面的MHCⅡ類分子、共刺激分子B7-2和細(xì)胞間粘附分子ICAM-1、CD40的表達(dá)明顯上調(diào)。它們能在自體混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)中激發(fā)T細(xì)胞的增殖，其中，轉(zhuǎn)染了人癌胚抗原重組痘苗病毒的樹突狀細(xì)胞對T細(xì)胞的激發(fā)作用最強(qiáng)。轉(zhuǎn)染了人癌胚抗原重組痘苗病毒的樹突狀細(xì)胞，所激發(fā)的T細(xì)胞對自體腫瘤細(xì)胞的抑制作用比天壇株痘苗病毒761組T細(xì)胞及無病毒組T細(xì)胞明顯增強(qiáng)；但是，這3個(gè)組的T細(xì)胞，對于不屬于人癌胚抗原分泌性的腫瘤細(xì)胞SMMC-7721的抑制作用均較低，而且3組間無明顯差別。這提示，轉(zhuǎn)染了人癌胚抗原重組痘苗病毒的樹突狀細(xì)胞細(xì)胞表面能更好地提呈MHC分子-人癌胚抗原的抗原肽復(fù)合物，供T細(xì)胞識別，進(jìn)而激活人癌胚抗原特異性T細(xì)胞。
我們在實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)：與腺病毒和逆轉(zhuǎn)錄病毒相比，痘苗病毒具有高效的真核表達(dá)載體，而且其表達(dá)的外源性蛋白質(zhì)可被有效糖基化而保持原有的特性點(diǎn)�；谝陨蠈�(shí)驗(yàn)結(jié)果我們與中山醫(yī)科大學(xué)共同研制了人癌胚抗原重組痘苗病毒。它是以中國天壇株痘苗病毒761株為載體所構(gòu)建的、表達(dá)人癌胚抗原的重組減毒疫苗�，F(xiàn)已被證實(shí)，它能在真核系統(tǒng)高效而準(zhǔn)確
地表達(dá)細(xì)胞膜糖蛋白人癌胚抗原。在實(shí)驗(yàn)中，我們將腫瘤抗原基因人癌胚抗原DNA通過減毒的痘苗病毒載體轉(zhuǎn)入樹突狀細(xì)胞內(nèi)，其目的是使樹突狀細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性、持續(xù)性表達(dá)人癌胚抗原多個(gè)腫瘤抗原表位，并通過MHCⅠ類分子得到充分提呈。我們的實(shí)驗(yàn)證明了：轉(zhuǎn)染了人癌胚抗原-重組痘苗病毒的樹突狀細(xì)胞所激發(fā)的T細(xì)胞對人癌胚抗原分泌性腫瘤細(xì)胞具有特異性殺傷作用。
盡管我們的實(shí)驗(yàn)已取得了頗具意義的結(jié)果，但是尚有以下問題須要進(jìn)一步探討與完善：一是，轉(zhuǎn)染時(shí)所需病毒的劑量；二是，進(jìn)行轉(zhuǎn)染時(shí)所需要的時(shí)間；三是，經(jīng)病毒轉(zhuǎn)染后，樹突狀細(xì)胞的表面標(biāo)志物的改變；四是，樹突狀細(xì)胞與T細(xì)胞共同孵育的最佳比例及時(shí)間；五是，被激活的T細(xì)胞其表面所分化抗原的改變。, 百拇醫(yī)藥(吳軍 楊太成)
在人體內(nèi)，成熟的樹突狀細(xì)胞表現(xiàn)出4個(gè)主要特征：一是，細(xì)胞形狀不規(guī)則，表面有許多樹枝狀突起；二是，細(xì)胞表面具有豐富的、有助于抗原提呈的分子，如高表達(dá)MHCⅠ、Ⅱ分子，共刺激分子B7-1、B7-2，細(xì)胞間粘附分子CD40、ICAM-1等；三是，在混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)中具有激活靜止T細(xì)胞的能力；四是，具有向局部淋巴細(xì)胞，即T細(xì)胞區(qū)遷移的能力。
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我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：人體外周血單核細(xì)胞在體外，經(jīng)人重組粒-巨噬細(xì)胞集落刺激因子及人重組白細(xì)胞介素-4聯(lián)合刺激后具有典型的樹突狀突起，細(xì)胞表面的MHCⅡ類分子、共刺激分子B7-2和細(xì)胞間粘附分子ICAM-1、CD40的表達(dá)明顯上調(diào)。它們能在自體混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)中激發(fā)T細(xì)胞的增殖，其中，轉(zhuǎn)染了人癌胚抗原重組痘苗病毒的樹突狀細(xì)胞對T細(xì)胞的激發(fā)作用最強(qiáng)。轉(zhuǎn)染了人癌胚抗原重組痘苗病毒的樹突狀細(xì)胞，所激發(fā)的T細(xì)胞對自體腫瘤細(xì)胞的抑制作用比天壇株痘苗病毒761組T細(xì)胞及無病毒組T細(xì)胞明顯增強(qiáng)；但是，這3個(gè)組的T細(xì)胞，對于不屬于人癌胚抗原分泌性的腫瘤細(xì)胞SMMC-7721的抑制作用均較低，而且3組間無明顯差別。這提示，轉(zhuǎn)染了人癌胚抗原重組痘苗病毒的樹突狀細(xì)胞細(xì)胞表面能更好地提呈MHC分子-人癌胚抗原的抗原肽復(fù)合物，供T細(xì)胞識別，進(jìn)而激活人癌胚抗原特異性T細(xì)胞。
我們在實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)：與腺病毒和逆轉(zhuǎn)錄病毒相比，痘苗病毒具有高效的真核表達(dá)載體，而且其表達(dá)的外源性蛋白質(zhì)可被有效糖基化而保持原有的特性點(diǎn)�；谝陨蠈�(shí)驗(yàn)結(jié)果我們與中山醫(yī)科大學(xué)共同研制了人癌胚抗原重組痘苗病毒。它是以中國天壇株痘苗病毒761株為載體所構(gòu)建的、表達(dá)人癌胚抗原的重組減毒疫苗�，F(xiàn)已被證實(shí)，它能在真核系統(tǒng)高效而準(zhǔn)確
地表達(dá)細(xì)胞膜糖蛋白人癌胚抗原。在實(shí)驗(yàn)中，我們將腫瘤抗原基因人癌胚抗原DNA通過減毒的痘苗病毒載體轉(zhuǎn)入樹突狀細(xì)胞內(nèi)，其目的是使樹突狀細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性、持續(xù)性表達(dá)人癌胚抗原多個(gè)腫瘤抗原表位，并通過MHCⅠ類分子得到充分提呈。我們的實(shí)驗(yàn)證明了：轉(zhuǎn)染了人癌胚抗原-重組痘苗病毒的樹突狀細(xì)胞所激發(fā)的T細(xì)胞對人癌胚抗原分泌性腫瘤細(xì)胞具有特異性殺傷作用。
盡管我們的實(shí)驗(yàn)已取得了頗具意義的結(jié)果，但是尚有以下問題須要進(jìn)一步探討與完善：一是，轉(zhuǎn)染時(shí)所需病毒的劑量；二是，進(jìn)行轉(zhuǎn)染時(shí)所需要的時(shí)間；三是，經(jīng)病毒轉(zhuǎn)染后，樹突狀細(xì)胞的表面標(biāo)志物的改變；四是，樹突狀細(xì)胞與T細(xì)胞共同孵育的最佳比例及時(shí)間；五是，被激活的T細(xì)胞其表面所分化抗原的改變。, 百拇醫(yī)藥(吳軍 楊太成)
百拇醫(yī)藥網(wǎng) http://www.www.srpcoatings.com/html/Dir/2003/05/29/3477.htm