膽囊癌中bFGF的表達(dá)及其與微血管計(jì)數(shù)的關(guān)系
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中華醫(yī)學(xué)研究雜志
【摘要】 目的 研究原發(fā)性膽囊癌組織中bFGF的表達(dá)及其與微血管計(jì)數(shù)的關(guān)系。方法應(yīng)用免疫組化SP法對(duì)49例膽囊癌組織常規(guī)石蠟包埋切片檢測(cè)MVC和bFGF的表達(dá)。結(jié)果 49例膽囊癌MVC為(35±12)個(gè)/HP。MVC與膽囊癌Nevin分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和分化程度密切相關(guān)(P<0.01，P<0.01和P<0.05)。49例膽囊癌中bFGF表達(dá)的陽(yáng)性率為53.1%(26/49)。bFGF在Nevin臨床分期S1～S3和淋巴結(jié)未轉(zhuǎn)移者中的表達(dá)顯著低于S4～S5和有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者(P<0.05)。bFGF的表達(dá)與腫瘤分化程度無(wú)明顯相關(guān)(P>0.05)。bFGF的表達(dá)與MVC值呈顯著相關(guān)(t=4.04，P<0.01)。結(jié)論 bFGF的表達(dá)和MVC與原發(fā)性膽囊癌的生物學(xué)行為密切相關(guān);bFGF是膽囊癌中重要的促血管生成因子。
關(guān)鍵詞 膽囊腫瘤 新生血管化 病理性 堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子
【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】 A 【文章編號(hào)】 1680-6115(2003)09-0781-03
, 百拇醫(yī)藥
The relationship between the expression of basic fibroblast growth
factor(bFGF)and microvessel count(MVC)in gallbladder carcinoma
Tian Yu，Wu Xiaofei，Zhu Lili，et al.
2nd Department of General Surgery，F(xiàn)irst Affiliated Hospital，
China MedicalUniversity，Shenyang110001.
【Abstract】 Objective To study the relationship between the expression of bFGF and microvessel count in gallbladder carcinoma.Methods The stains of bFGF and MV were completed by the Streptavidin-Peroxidase comˉplex immunohistochemicalmethod in routine paraffin-embedded sections of49cases of gallbladder carcinoma.Reˉsults MVC in49cases with gallbladder cacinoma was(35±12)/HP.The value of MVC was correlated with Nevin staging，lymph node metastasis and tumor differen tiation(P<0.01，P<0.01，P<0.05).The positive rates of bFGF in49cases with gallbladder cacinoma was53.1%(26/49).The expression of bFGFwas significantly lowerin cases of Nevin staging S1～S3and without metastasis than that of Nevin staging S4～S5and with metastasis(P<0.05).The expression of bFGF was not correlatedwith tumor differentiation(P>0.05).The expression of bFGF was markedly correlated with MVC(t=4.04，P<0.01).Conclusion The expressions of bFGF and MVC closely related to the biological behaviors of gallbladder carcinoma;bFGF was one of the most important angiogenic factors.
, 百拇醫(yī)藥
Key words gallbladder neoplasms neovascularization pathologic basic fibroblast growth factor
繼Folkman于1971年首次提出“腫瘤生長(zhǎng)取決于血管生成”的理論后，針對(duì)腫瘤血管生成的研究不斷深入，日益成為腫瘤學(xué)界研究的熱點(diǎn)，腫瘤血管生成是一個(gè)十分復(fù)雜的過(guò)程，是多種促血管生成和抗血管生成因子的調(diào)節(jié)平衡破壞的結(jié)果。惡性腫瘤細(xì)胞可自行分泌多種促血管生成因子，堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(basic fibroblast growth factor，bFGF)是第一個(gè)被發(fā)現(xiàn)的參與調(diào)節(jié)血管生成的促血管生成因子。膽囊癌是膽系惡性腫瘤中惡性度最高的一種，多因發(fā)生轉(zhuǎn)移早而預(yù)后差。國(guó)內(nèi)外關(guān)于膽囊癌bFGF表達(dá)與微血管計(jì)數(shù)(Microvessel count，MVC)的報(bào)道不多。本研究探討原發(fā)性膽囊癌組織中bFGF的表達(dá)及其與MVC的關(guān)系和意義，現(xiàn)報(bào)告如下。
1 材料與方法
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1.1 標(biāo)本及臨床病理資料 收集中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬第一、第二醫(yī)院1999年3月～2001年12月間膽囊癌手術(shù)切除標(biāo)本存檔蠟塊49例。男24例，女25例;男性平均年齡(62.0±9.8)歲，女性平均年齡(54.5±9.3)歲;病理組織學(xué)類型均為腺癌;分化程度:高分化16例(32.7%)，中分化17例(34.7%)，低分化10例(20.4%)，另外乳頭狀腺癌6例，占12.2%;臨床分期依據(jù)Nevin分期標(biāo)準(zhǔn) [1] :S1、S2、S319例(38.8%)，S4、S530例(61.2%)。有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者27例(55.1%)，無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者22例(44.9%)。所有病例術(shù)前均未經(jīng)抗腫瘤血管生成治療。上述膽囊癌蠟塊標(biāo)本常規(guī)切片，厚4μm。所有標(biāo)本均經(jīng)蘇木素-伊紅(HE)染色和病理確診。
1.2 方法
1.2.1 主要試劑 鼠抗人第Ⅷ因子相關(guān)抗原單克隆抗體、兔抗人bFGF多克隆抗體、免疫組化SP試劑盒、DAB顯色劑等均由福州邁新生物技術(shù)公司提供。
, 百拇醫(yī)藥
1.2.2 免疫組化染色 MV和bFGF染色方法為常規(guī)ST法，簡(jiǎn)述如下:切片常規(guī)脫蠟，3%過(guò)氧化氫37℃孵育15min，消除內(nèi)源性過(guò)氧化酶的活性，抗原修復(fù):第Ⅷ因子相關(guān)抗原采用胃蛋白酶37℃消化15min，非免疫性山羊血清37℃孵育20min，加一抗4℃冰箱過(guò)夜，加生物素標(biāo)記的二抗37℃20min，加鏈霉素-過(guò)氧化物酶溶液37℃20min，DAB顯色，蘇木素輕度復(fù)染，中性樹(shù)膠封固。
1.2.3 結(jié)果判定 由兩名病理醫(yī)師盲法判定。第Ⅷ因子相關(guān)抗原單克隆抗體標(biāo)記的血管內(nèi)皮細(xì)胞漿呈棕黃色至深棕黃色，其計(jì)數(shù)方法參照Weidner的方法 [2] :在低倍顯微鏡(×40)下對(duì)整張組織切片找出5個(gè)血管內(nèi)皮細(xì)胞染色密集區(qū)域(熱點(diǎn))，然后每個(gè)熱點(diǎn)在高倍(×200)視野下(0.74mm 2 )計(jì)數(shù)，取5個(gè)區(qū)域的平均數(shù)記為MVC值。注意事項(xiàng):(1)直徑大于或等于8個(gè)紅細(xì)胞直徑或管壁有平滑肌組織者不作為微血管;(2)有時(shí)獨(dú)立的典型血管內(nèi)皮細(xì)胞著色，但尚未形成管腔，可作為新生微血管計(jì)數(shù)。bFGF的結(jié)果判定:按bFGF染色強(qiáng)弱及陽(yáng)性細(xì)胞百分比兩個(gè)方面來(lái)計(jì)算bFGF表達(dá)評(píng)分:(1)染色強(qiáng)度(0=無(wú)，1=弱，2=中，3=強(qiáng));(2)陽(yáng)性細(xì)胞百分比(0=無(wú)，1=<20%，2=20%～40%，3=>40%)，計(jì)算(1)+(2)的值即為bFGF評(píng)分，4～6分者評(píng)定為bFGF免疫組化陽(yáng)性。以扁桃體陽(yáng)性切片為第Ⅷ因子相關(guān)抗原陽(yáng)性對(duì)照;以食管癌陽(yáng)性切片為bFGF陽(yáng)性對(duì)照。以0.01M PBS液(pH7.4)替代一抗作為每次染色的陰性對(duì)照。
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1.2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 在SPSS10.0軟件上進(jìn)行。MVC值以ˉx±s表示，采用χ2 檢驗(yàn)和t檢驗(yàn)。
2 結(jié)果
2.1 MV和bFGF在膽囊癌組織中的表達(dá)特征 MV在膽囊癌組織中的分布呈異質(zhì)性，不同區(qū)域MVC不同(圖1)。bFGF免疫反應(yīng)陽(yáng)性物質(zhì)為棕黃色細(xì)顆粒狀，主要定位于癌細(xì)胞胞漿，其分布也呈異質(zhì)性(圖2)。49例膽囊癌的MVC值為(35±12)個(gè)/HP。bFGF表達(dá)的陽(yáng)性率為53.1%(26/49)。(圖1、圖2略)
2.2 bFGF的表達(dá)及MVC與臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系 bFGF在Nevin臨床分期S1～S3和淋巴結(jié)未轉(zhuǎn)移者中的表達(dá)顯著低于S4～S5和有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者(P<0.05)。bFGF的表達(dá)與病理分化程度無(wú)關(guān)(P>0.05)。乳頭狀腺癌、高分化型、Nevin臨床分期S1～S3和淋巴結(jié)未轉(zhuǎn)移者的MVC顯著低于中低分化型、S4～S5和有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者(P<0.05，P<0.01和P<0.01)。見(jiàn)表1。
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表1 bFGF的表達(dá)及MVC與臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系 (略)
2.3 bFGF的表達(dá)與MVC的關(guān)系 26例bFGF表達(dá)陽(yáng)性者 MVC為(40±10)個(gè)/HP，23例bFGF表達(dá)陰性者M(jìn)VC為(28±11)個(gè)/HP，兩者差異有非常顯著性(t=4.04，P<0.01)。
3 討論
腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移是腫瘤治療失敗的主要原因。腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移是一個(gè)復(fù)雜的多階段過(guò)程，可以概括為:原發(fā)瘤增殖、腫瘤新生血管生長(zhǎng);瘤細(xì)胞侵襲基底膜;穿入血管或淋巴管;在循環(huán)系統(tǒng)中存活，形成瘤栓并轉(zhuǎn)運(yùn)到遠(yuǎn)隔靶器官;滯留于靶器官的微小血管中;穿出血管并形成微小轉(zhuǎn)移灶;腫瘤血管形成，轉(zhuǎn)移癌灶增殖。可見(jiàn)在腫瘤發(fā)生侵襲轉(zhuǎn)移的多步驟過(guò)程中，無(wú)論腫瘤轉(zhuǎn)移的起始或終末階段，血管生成均發(fā)揮著重要作用。大量研究證實(shí)血管生成與腫瘤的浸潤(rùn)深度、病理分期及核分級(jí)等呈正相關(guān)。本組研究中MVC與膽囊癌Nevin分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和分化程度密切相關(guān)，提示MVC高的膽囊癌多惡性程度高和易發(fā)生轉(zhuǎn)移，進(jìn)一步證實(shí)了上述結(jié)論。
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bFGF是血管內(nèi)皮細(xì)胞很強(qiáng)的促分裂劑和趨化因子，其作用包括:(1)誘使蛋白酶、尿激酶血漿素激活物受體(uPˉAR)的表達(dá)，調(diào)節(jié)產(chǎn)生整和素(integrines);(2)誘發(fā)血管前改變，如血管樣結(jié)構(gòu)的形成、膠原蛋白的產(chǎn)生等，并最終導(dǎo)致新生血管的生成 [3] ;(3)刺激血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子的分泌，并與其有良好的協(xié)同作用;(4)增強(qiáng)血管內(nèi)皮細(xì)胞抗凋亡能力 [4] 。近年，國(guó)內(nèi)外學(xué)者較廣泛地研究了一些惡性腫瘤bFGF的表達(dá)與腫瘤生物學(xué)行為的關(guān)系。用原位雜交實(shí)驗(yàn)分析腫瘤組織發(fā)現(xiàn)，臨床晚期(出現(xiàn)轉(zhuǎn)移癥狀)腫瘤組織的外圍(侵襲的邊緣)細(xì)胞中bFGF過(guò)度表達(dá)。相比之下，臨床早期的腫瘤組織的bFGF水平較低。本組研究發(fā)現(xiàn)bFGF在Nevin臨床分期S1～S3和淋巴結(jié)未轉(zhuǎn)移者中的表達(dá)顯著低于S4～S5和有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者，提示bFGF的表達(dá)與原發(fā)性膽囊癌生物學(xué)行為、轉(zhuǎn)移發(fā)生等有密切關(guān)系，與國(guó)內(nèi)外的其他研究結(jié)果基本一致。本組膽囊癌VEGF、bFGF的表達(dá)與MVC值呈顯著正相關(guān)，證實(shí)了bFGF具有明顯的促腫瘤血管生成的作用。
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但目前對(duì)bFGF的研究還有很多不明之處。bFGF缺少信號(hào)肽，因此腫瘤細(xì)胞、細(xì)胞外基質(zhì)、巨噬細(xì)胞如何在沒(méi)有信號(hào)傳遞的情況下產(chǎn)生bFGF;bFGF不僅是內(nèi)皮細(xì)胞的分裂原，同時(shí)也是成纖維細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞的分裂原，而在腫瘤組織中毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖卻遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過(guò)成纖維細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞的增殖，在腫瘤血管形成的過(guò)程中bFGF為何對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞有如此高的選擇性等，這些問(wèn)題都有待于進(jìn)一步研究。
血管生成是腫瘤生長(zhǎng)、浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移的先決條件，抑制了其生長(zhǎng)途徑也就遏制住了腫瘤的進(jìn)一步發(fā)展，從而為其它治療手段提供有利時(shí)機(jī)。膽囊癌確診時(shí)多為晚期，手術(shù)切除率低，預(yù)后兇險(xiǎn)，諸如針對(duì)bFGF等促血管生成因子的抗腫瘤血管生成治療就顯得格外有意義。現(xiàn)在，抗腫瘤血管生成方面的研究已取得了一定進(jìn)展，使用血管抑制劑治療腫瘤已在動(dòng)物試驗(yàn)中取得成功 [5] ，并已進(jìn)入臨床試驗(yàn)。本研究結(jié)果不僅提示MVC和bFGF的表達(dá)與原發(fā)性膽囊癌的生物學(xué)行為密切相關(guān)，同時(shí)為針對(duì)促血管生成因子的膽囊癌抗血管新生治療提供了一個(gè)依據(jù)。
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參考文獻(xiàn)
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5 Kim KJ，Li B，Winer J，et al.Inhibition of vascular endothelial growth factor-induced angiogenesis suppresses tumor growth in vivo.Nature，1993，362(6423):841-844.
作者單位:1 110001沈陽(yáng)中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院普外二科
2 遼寧省盤錦市第一人民醫(yī)院
3 中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院普外二科
4 中國(guó)醫(yī)科大學(xué)病理教研室
(收稿日期:2003-05-22) (編輯 于少偉), http://www.www.srpcoatings.com
關(guān)鍵詞 膽囊腫瘤 新生血管化 病理性 堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子
【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】 A 【文章編號(hào)】 1680-6115(2003)09-0781-03
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The relationship between the expression of basic fibroblast growth
factor(bFGF)and microvessel count(MVC)in gallbladder carcinoma
Tian Yu，Wu Xiaofei，Zhu Lili，et al.
2nd Department of General Surgery，F(xiàn)irst Affiliated Hospital，
China MedicalUniversity，Shenyang110001.
【Abstract】 Objective To study the relationship between the expression of bFGF and microvessel count in gallbladder carcinoma.Methods The stains of bFGF and MV were completed by the Streptavidin-Peroxidase comˉplex immunohistochemicalmethod in routine paraffin-embedded sections of49cases of gallbladder carcinoma.Reˉsults MVC in49cases with gallbladder cacinoma was(35±12)/HP.The value of MVC was correlated with Nevin staging，lymph node metastasis and tumor differen tiation(P<0.01，P<0.01，P<0.05).The positive rates of bFGF in49cases with gallbladder cacinoma was53.1%(26/49).The expression of bFGFwas significantly lowerin cases of Nevin staging S1～S3and without metastasis than that of Nevin staging S4～S5and with metastasis(P<0.05).The expression of bFGF was not correlatedwith tumor differentiation(P>0.05).The expression of bFGF was markedly correlated with MVC(t=4.04，P<0.01).Conclusion The expressions of bFGF and MVC closely related to the biological behaviors of gallbladder carcinoma;bFGF was one of the most important angiogenic factors.
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Key words gallbladder neoplasms neovascularization pathologic basic fibroblast growth factor
繼Folkman于1971年首次提出“腫瘤生長(zhǎng)取決于血管生成”的理論后，針對(duì)腫瘤血管生成的研究不斷深入，日益成為腫瘤學(xué)界研究的熱點(diǎn)，腫瘤血管生成是一個(gè)十分復(fù)雜的過(guò)程，是多種促血管生成和抗血管生成因子的調(diào)節(jié)平衡破壞的結(jié)果。惡性腫瘤細(xì)胞可自行分泌多種促血管生成因子，堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(basic fibroblast growth factor，bFGF)是第一個(gè)被發(fā)現(xiàn)的參與調(diào)節(jié)血管生成的促血管生成因子。膽囊癌是膽系惡性腫瘤中惡性度最高的一種，多因發(fā)生轉(zhuǎn)移早而預(yù)后差。國(guó)內(nèi)外關(guān)于膽囊癌bFGF表達(dá)與微血管計(jì)數(shù)(Microvessel count，MVC)的報(bào)道不多。本研究探討原發(fā)性膽囊癌組織中bFGF的表達(dá)及其與MVC的關(guān)系和意義，現(xiàn)報(bào)告如下。
1 材料與方法
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1.1 標(biāo)本及臨床病理資料 收集中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬第一、第二醫(yī)院1999年3月～2001年12月間膽囊癌手術(shù)切除標(biāo)本存檔蠟塊49例。男24例，女25例;男性平均年齡(62.0±9.8)歲，女性平均年齡(54.5±9.3)歲;病理組織學(xué)類型均為腺癌;分化程度:高分化16例(32.7%)，中分化17例(34.7%)，低分化10例(20.4%)，另外乳頭狀腺癌6例，占12.2%;臨床分期依據(jù)Nevin分期標(biāo)準(zhǔn) [1] :S1、S2、S319例(38.8%)，S4、S530例(61.2%)。有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者27例(55.1%)，無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者22例(44.9%)。所有病例術(shù)前均未經(jīng)抗腫瘤血管生成治療。上述膽囊癌蠟塊標(biāo)本常規(guī)切片，厚4μm。所有標(biāo)本均經(jīng)蘇木素-伊紅(HE)染色和病理確診。
1.2 方法
1.2.1 主要試劑 鼠抗人第Ⅷ因子相關(guān)抗原單克隆抗體、兔抗人bFGF多克隆抗體、免疫組化SP試劑盒、DAB顯色劑等均由福州邁新生物技術(shù)公司提供。
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1.2.2 免疫組化染色 MV和bFGF染色方法為常規(guī)ST法，簡(jiǎn)述如下:切片常規(guī)脫蠟，3%過(guò)氧化氫37℃孵育15min，消除內(nèi)源性過(guò)氧化酶的活性，抗原修復(fù):第Ⅷ因子相關(guān)抗原采用胃蛋白酶37℃消化15min，非免疫性山羊血清37℃孵育20min，加一抗4℃冰箱過(guò)夜，加生物素標(biāo)記的二抗37℃20min，加鏈霉素-過(guò)氧化物酶溶液37℃20min，DAB顯色，蘇木素輕度復(fù)染，中性樹(shù)膠封固。
1.2.3 結(jié)果判定 由兩名病理醫(yī)師盲法判定。第Ⅷ因子相關(guān)抗原單克隆抗體標(biāo)記的血管內(nèi)皮細(xì)胞漿呈棕黃色至深棕黃色，其計(jì)數(shù)方法參照Weidner的方法 [2] :在低倍顯微鏡(×40)下對(duì)整張組織切片找出5個(gè)血管內(nèi)皮細(xì)胞染色密集區(qū)域(熱點(diǎn))，然后每個(gè)熱點(diǎn)在高倍(×200)視野下(0.74mm 2 )計(jì)數(shù)，取5個(gè)區(qū)域的平均數(shù)記為MVC值。注意事項(xiàng):(1)直徑大于或等于8個(gè)紅細(xì)胞直徑或管壁有平滑肌組織者不作為微血管;(2)有時(shí)獨(dú)立的典型血管內(nèi)皮細(xì)胞著色，但尚未形成管腔，可作為新生微血管計(jì)數(shù)。bFGF的結(jié)果判定:按bFGF染色強(qiáng)弱及陽(yáng)性細(xì)胞百分比兩個(gè)方面來(lái)計(jì)算bFGF表達(dá)評(píng)分:(1)染色強(qiáng)度(0=無(wú)，1=弱，2=中，3=強(qiáng));(2)陽(yáng)性細(xì)胞百分比(0=無(wú)，1=<20%，2=20%～40%，3=>40%)，計(jì)算(1)+(2)的值即為bFGF評(píng)分，4～6分者評(píng)定為bFGF免疫組化陽(yáng)性。以扁桃體陽(yáng)性切片為第Ⅷ因子相關(guān)抗原陽(yáng)性對(duì)照;以食管癌陽(yáng)性切片為bFGF陽(yáng)性對(duì)照。以0.01M PBS液(pH7.4)替代一抗作為每次染色的陰性對(duì)照。
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1.2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 在SPSS10.0軟件上進(jìn)行。MVC值以ˉx±s表示，采用χ2 檢驗(yàn)和t檢驗(yàn)。
2 結(jié)果
2.1 MV和bFGF在膽囊癌組織中的表達(dá)特征 MV在膽囊癌組織中的分布呈異質(zhì)性，不同區(qū)域MVC不同(圖1)。bFGF免疫反應(yīng)陽(yáng)性物質(zhì)為棕黃色細(xì)顆粒狀，主要定位于癌細(xì)胞胞漿，其分布也呈異質(zhì)性(圖2)。49例膽囊癌的MVC值為(35±12)個(gè)/HP。bFGF表達(dá)的陽(yáng)性率為53.1%(26/49)。(圖1、圖2略)
2.2 bFGF的表達(dá)及MVC與臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系 bFGF在Nevin臨床分期S1～S3和淋巴結(jié)未轉(zhuǎn)移者中的表達(dá)顯著低于S4～S5和有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者(P<0.05)。bFGF的表達(dá)與病理分化程度無(wú)關(guān)(P>0.05)。乳頭狀腺癌、高分化型、Nevin臨床分期S1～S3和淋巴結(jié)未轉(zhuǎn)移者的MVC顯著低于中低分化型、S4～S5和有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者(P<0.05，P<0.01和P<0.01)。見(jiàn)表1。
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表1 bFGF的表達(dá)及MVC與臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系 (略)
2.3 bFGF的表達(dá)與MVC的關(guān)系 26例bFGF表達(dá)陽(yáng)性者 MVC為(40±10)個(gè)/HP，23例bFGF表達(dá)陰性者M(jìn)VC為(28±11)個(gè)/HP，兩者差異有非常顯著性(t=4.04，P<0.01)。
3 討論
腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移是腫瘤治療失敗的主要原因。腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移是一個(gè)復(fù)雜的多階段過(guò)程，可以概括為:原發(fā)瘤增殖、腫瘤新生血管生長(zhǎng);瘤細(xì)胞侵襲基底膜;穿入血管或淋巴管;在循環(huán)系統(tǒng)中存活，形成瘤栓并轉(zhuǎn)運(yùn)到遠(yuǎn)隔靶器官;滯留于靶器官的微小血管中;穿出血管并形成微小轉(zhuǎn)移灶;腫瘤血管形成，轉(zhuǎn)移癌灶增殖。可見(jiàn)在腫瘤發(fā)生侵襲轉(zhuǎn)移的多步驟過(guò)程中，無(wú)論腫瘤轉(zhuǎn)移的起始或終末階段，血管生成均發(fā)揮著重要作用。大量研究證實(shí)血管生成與腫瘤的浸潤(rùn)深度、病理分期及核分級(jí)等呈正相關(guān)。本組研究中MVC與膽囊癌Nevin分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和分化程度密切相關(guān)，提示MVC高的膽囊癌多惡性程度高和易發(fā)生轉(zhuǎn)移，進(jìn)一步證實(shí)了上述結(jié)論。
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bFGF是血管內(nèi)皮細(xì)胞很強(qiáng)的促分裂劑和趨化因子，其作用包括:(1)誘使蛋白酶、尿激酶血漿素激活物受體(uPˉAR)的表達(dá)，調(diào)節(jié)產(chǎn)生整和素(integrines);(2)誘發(fā)血管前改變，如血管樣結(jié)構(gòu)的形成、膠原蛋白的產(chǎn)生等，并最終導(dǎo)致新生血管的生成 [3] ;(3)刺激血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子的分泌，并與其有良好的協(xié)同作用;(4)增強(qiáng)血管內(nèi)皮細(xì)胞抗凋亡能力 [4] 。近年，國(guó)內(nèi)外學(xué)者較廣泛地研究了一些惡性腫瘤bFGF的表達(dá)與腫瘤生物學(xué)行為的關(guān)系。用原位雜交實(shí)驗(yàn)分析腫瘤組織發(fā)現(xiàn)，臨床晚期(出現(xiàn)轉(zhuǎn)移癥狀)腫瘤組織的外圍(侵襲的邊緣)細(xì)胞中bFGF過(guò)度表達(dá)。相比之下，臨床早期的腫瘤組織的bFGF水平較低。本組研究發(fā)現(xiàn)bFGF在Nevin臨床分期S1～S3和淋巴結(jié)未轉(zhuǎn)移者中的表達(dá)顯著低于S4～S5和有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者，提示bFGF的表達(dá)與原發(fā)性膽囊癌生物學(xué)行為、轉(zhuǎn)移發(fā)生等有密切關(guān)系，與國(guó)內(nèi)外的其他研究結(jié)果基本一致。本組膽囊癌VEGF、bFGF的表達(dá)與MVC值呈顯著正相關(guān)，證實(shí)了bFGF具有明顯的促腫瘤血管生成的作用。
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但目前對(duì)bFGF的研究還有很多不明之處。bFGF缺少信號(hào)肽，因此腫瘤細(xì)胞、細(xì)胞外基質(zhì)、巨噬細(xì)胞如何在沒(méi)有信號(hào)傳遞的情況下產(chǎn)生bFGF;bFGF不僅是內(nèi)皮細(xì)胞的分裂原，同時(shí)也是成纖維細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞的分裂原，而在腫瘤組織中毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖卻遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過(guò)成纖維細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞的增殖，在腫瘤血管形成的過(guò)程中bFGF為何對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞有如此高的選擇性等，這些問(wèn)題都有待于進(jìn)一步研究。
血管生成是腫瘤生長(zhǎng)、浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移的先決條件，抑制了其生長(zhǎng)途徑也就遏制住了腫瘤的進(jìn)一步發(fā)展，從而為其它治療手段提供有利時(shí)機(jī)。膽囊癌確診時(shí)多為晚期，手術(shù)切除率低，預(yù)后兇險(xiǎn)，諸如針對(duì)bFGF等促血管生成因子的抗腫瘤血管生成治療就顯得格外有意義。現(xiàn)在，抗腫瘤血管生成方面的研究已取得了一定進(jìn)展，使用血管抑制劑治療腫瘤已在動(dòng)物試驗(yàn)中取得成功 [5] ，并已進(jìn)入臨床試驗(yàn)。本研究結(jié)果不僅提示MVC和bFGF的表達(dá)與原發(fā)性膽囊癌的生物學(xué)行為密切相關(guān)，同時(shí)為針對(duì)促血管生成因子的膽囊癌抗血管新生治療提供了一個(gè)依據(jù)。
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作者單位:1 110001沈陽(yáng)中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院普外二科
2 遼寧省盤錦市第一人民醫(yī)院
3 中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院普外二科
4 中國(guó)醫(yī)科大學(xué)病理教研室
(收稿日期:2003-05-22) (編輯 于少偉), http://www.www.srpcoatings.com
百拇醫(yī)藥網(wǎng) http://www.www.srpcoatings.com/html/Dir/2004/05/10/39/48/68.htm