現(xiàn)代味覺電生理技術(shù)在中藥五味定性和定量研究中的作用
【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】 A 【文章編號】 1606-8106(2003)11-1667-02
性味理論是中醫(yī)藥理論的核心之一，五味辨證是中醫(yī)遣方施藥的重要依據(jù)。在中藥五味的研究中，一方面要注意嚴(yán)謹(jǐn)規(guī)范，使中藥五味在客觀化、規(guī)范化方面取得進(jìn)展;另一方面要加強(qiáng)學(xué)科交叉，結(jié)合現(xiàn)代多學(xué)科的研究，更深入地探索其內(nèi)涵，揭示其實質(zhì)。為此要加強(qiáng)宏觀研究與微觀研究相結(jié)合，臨床分析與理論探討相結(jié)合，傳統(tǒng)方法與現(xiàn)代方法相結(jié)合，以期進(jìn)入新的領(lǐng)域，在理論上有所突破。本文結(jié)合中藥五味定性、定量研究的必要性和現(xiàn)代味覺電生理學(xué)技術(shù)的特點及其在中藥五味定性、定量研究中的可能作用進(jìn)行綜述。
1 中藥五味定性和定量研究的意義
中藥“味”的概念最早見于《黃帝內(nèi)經(jīng)》:“精不足者，補(bǔ)之以味”。有酸、苦、甘、辛、咸，謂之五味，最早是由古人口嘗而得的感受 [1] 。在臨床實踐中，人們發(fā)現(xiàn)不同味感的物質(zhì)有不同的功能�！端貑枴づK氣法時論》記載:“辛散、酸收、甘緩、苦堅、咸軟”;《藥性賦》中指出:“辛能散能行，具有發(fā)汗解表、透疹散風(fēng)、行氣行血等功效;甘能緩能補(bǔ)，具有緩中止痛、調(diào)和藥性、補(bǔ)養(yǎng)氣血等功能;苦能燥濕降瀉，具有燥濕祛邪、瀉下利尿、導(dǎo)瘀血下行等作用;酸能收斂固脫，具有止汗、止血、止瀉、縮小便、固遺精等效應(yīng);咸能軟堅潤下，具有軟堅積、破積、消癭瘤瘰疬等功能”。人們根據(jù)藥物的功能將藥味進(jìn)行適當(dāng)?shù)恼{(diào)整，最終形成中藥的五味定性 [2] 。
, http://www.www.srpcoatings.com
現(xiàn)代味覺理論證明，味覺的產(chǎn)生是由味覺分子與分布于口腔中的舌、軟腭和會厭等處的味蕾化學(xué)感受器作用，產(chǎn)生電信號傳輸?shù)酱竽X的味覺皮質(zhì)區(qū)而得到的一種感覺 [3] 。有四種基本味覺:甘、苦、酸、咸，辛味則是熱感與痛感的綜合感覺。不同的味覺有不同的味蕾，對應(yīng)著不同的化學(xué)感受，它們只對特定的分子結(jié)構(gòu)類型產(chǎn)生作用 [4] ，即不同的味覺是由不同結(jié)構(gòu)類型的分子產(chǎn)生的。如辛味藥多含揮發(fā)油，苦味藥多含生物堿，甘味藥則是糖類、脂肪、蛋白質(zhì)、維生素等營養(yǎng)素，酸味藥多含有有機(jī)酸、鞣質(zhì)，咸味藥含鈉、鉀、鈣、鎂、碘等無機(jī)鹽 [5] 。中藥的療效可以通過味覺與中藥化學(xué)成分和結(jié)構(gòu)相聯(lián)系進(jìn)行藥理分析 [6] 。同時西藥也可以根據(jù)其化學(xué)結(jié)構(gòu)與味覺的聯(lián)系引入中醫(yī)的知識系統(tǒng)，從而達(dá)到真正的中西醫(yī)結(jié)合 [7] 。
中藥典籍中記載的味多是一種定性的描述，一些藥物的味經(jīng)過與功能相聯(lián)系調(diào)整后與實際品嘗的味不相符，這給中藥性味研究和將味作為中西醫(yī)藥結(jié)合的樞紐作用帶來了困難，我們認(rèn)為，味是特定化學(xué)結(jié)構(gòu)分子與味蕾味覺感受器相互作用產(chǎn)生的感覺，而多數(shù)中藥是多成分的化學(xué)分子的混合物，口嘗中藥而得的味是混合物造成的混合味覺。有些起主要功能作用的化學(xué)分子產(chǎn)生的味可能被其它分子引起的味覺所掩蓋，根據(jù)藥效對中藥味進(jìn)行調(diào)整后的味可能反映了實際功能分子的真實味覺。為了揭示中藥混合味覺中可能被掩蓋的功能分子的實際味，有必要建立一整套對中藥混合成分中所含的四種基本味覺同時進(jìn)行定性、定量測定的分析方法，現(xiàn)代味覺電生理技術(shù)可以滿足這種要求。
, http://www.www.srpcoatings.com
總之，中藥五味定性與定量研究可以系統(tǒng)修正現(xiàn)有的中藥五味的模糊定性，建立一整套中藥味覺數(shù)據(jù)庫，借此完善中藥性味理論。根據(jù)中藥五味及中醫(yī)五味辨證同現(xiàn)代藥物化學(xué)理論的聯(lián)系，可以全面而準(zhǔn)確地指導(dǎo)中醫(yī)遣方施藥并進(jìn)行現(xiàn)代的藥理解釋。通過修正中藥藥劑中的味感構(gòu)成來綜合配伍各種藥味物質(zhì)，適應(yīng)中醫(yī)證候的變化，體現(xiàn)理、法、方、藥的整體性與系統(tǒng)性，可以為開發(fā)新藥提供理論指導(dǎo)，為中醫(yī)藥的科學(xué)化、實證化、數(shù)字化以及中西醫(yī)的真正結(jié)合作出貢獻(xiàn) [8] 。
2 味覺電生理技術(shù)在中藥五味定性和定量研究中的可能作用
現(xiàn)代生理學(xué)把味覺分為酸、甜、苦、咸四種基本味，這些味覺信息的傳遞同機(jī)體的其它感覺信息一樣，有其專門的神經(jīng)傳入通路。簡言之，口腔的特殊感覺———味覺主要通過由集中于舌背部和軟腭粘膜上皮的味蕾感覺酸、甜、苦、咸，分別通過面神經(jīng)、舌咽神經(jīng)和迷走神經(jīng)至延髓孤束核，經(jīng)二級神經(jīng)元到達(dá)橋腦味覺區(qū)，再經(jīng)三級神經(jīng)元到達(dá)丘腦味覺中繼核后經(jīng)四級神經(jīng)元到達(dá)大腦皮質(zhì)蓋島部的味覺區(qū) [9] 。味蕾的化學(xué)感受器細(xì)胞監(jiān)控著口腔的化學(xué)環(huán)境變化，并能發(fā)出信號到大腦產(chǎn)生味覺感知，不同味覺感受器選擇性地對不同的味質(zhì)產(chǎn)生反應(yīng)，且反應(yīng)模式不甚相同 [3] 。其中酸和咸味質(zhì)通過味覺感受器細(xì)胞膜上的特異性H + 和Na + 離子通道使細(xì)胞去極化;甜、苦味質(zhì)則可能通過GTP結(jié)合蛋白受體進(jìn)行信號轉(zhuǎn)導(dǎo) [10，11] 。經(jīng)口腔的味覺刺激物通過激活味蕾上相應(yīng)的味感覺神經(jīng)元而產(chǎn)生用于編碼特定味覺信號的電位變化(動作電位)，這些編碼味覺信息的電位變化可在味覺傳入通路的各個環(huán)節(jié)上通過電生理方法記錄到，這成為應(yīng)用現(xiàn)代電生理學(xué)技術(shù)研究味覺的理論基礎(chǔ)。
, http://www.www.srpcoatings.com
為深層次的揭示味覺產(chǎn)生機(jī)制，目前的味覺研究在多層次上廣泛采用了多種現(xiàn)代電生理學(xué)技術(shù)，不同的味覺電生理技術(shù)在進(jìn)行味覺研究中各有其特點。有用于記錄整個味覺皮層活動的味覺誘發(fā)電位(gustatory evoked potentials，GEPs)，作為味覺皮層眾多神經(jīng)元功能活動的整合，記錄GEPs的電生理學(xué)技術(shù)可以客觀定性評估病人味覺功能的紊亂狀態(tài)，但因GEPs的測量受多因素的影響，不宜作為味覺刺激強(qiáng)度的定量描述 [12] 。有測定各級味覺神經(jīng)元 [13，14] 和味覺感受器細(xì)胞膜上離子通道活動的全細(xì)胞膜片鉗記錄技術(shù) [15] ，該技術(shù)一般針對離體細(xì)胞進(jìn)行記錄，雖可進(jìn)行味覺刺激的定量研究，但由于是離體記錄，不能客觀反映機(jī)體的味覺整體功能，更不能進(jìn)行長時程記錄;在體膜片鉗技術(shù)可以克服離體記錄部分之不足，但技術(shù)難度大，儀器性能要求高，而且也不能進(jìn)行長時程記錄，故不宜廣泛開展。目前使用的比較多的是活體動物單個神經(jīng)元細(xì)胞外記錄技術(shù) [16，17] ，該技術(shù)記錄的是味覺傳入通路上單個味覺細(xì)胞對味覺刺激的反應(yīng)，通過不同味覺刺激物所誘發(fā)的不同味覺神經(jīng)元的放電頻率改變來定性和定量研究味覺刺激物的種類和刺激強(qiáng)度。
, http://www.www.srpcoatings.com
不同種類的味覺刺激物有其專門的味覺感受器。在體全細(xì)胞膜片鉗記錄表明舌和軟腭味蕾上的大多數(shù)味感覺神經(jīng)元的反應(yīng)性與不同的味覺刺激物—氯化鈉(咸味)、蔗糖(甜味)、氯化奎寧(苦味)及檸檬酸(酸味)之間具有一一對應(yīng)關(guān)系，某種味感覺神經(jīng)元僅對一種味覺刺激物起反應(yīng) [15] 。不同種類的味覺感受器有其相對專一的傳入通路，這一點已通過單細(xì)胞外記錄在味覺傳入通路的各個水平上得以證實。細(xì)胞外記錄技術(shù)表明大鼠孤束核存在著專門對不同的味覺刺激物—氯化鈉(咸味)、蔗糖(甜味)、氯化奎寧(苦味)及檸檬酸(酸味)敏感的神經(jīng)元 [18，19] 。這一現(xiàn)象同樣可在相對比較高級的味覺傳入神經(jīng)元上記錄到，如大鼠丘腦腹側(cè)中后部神經(jīng)元 [20] 、臂旁核神經(jīng)元 [21] 、膝狀體神經(jīng)元 [22] 等。此外，可以根據(jù)細(xì)胞外記錄結(jié)果將獼猴皮層味覺中樞神經(jīng)元分為對氯化鈉(咸味)、蔗糖(甜味)、氯化奎寧(苦味)及檸檬酸(酸味)專一敏感性神經(jīng)元四類 [23] 。這些研究結(jié)果表明味覺電生理學(xué)技術(shù)可以對中藥五味進(jìn)行定性研究，可用于揭示中藥混合味中被掩蓋的功能分子實際的味。
, 百拇醫(yī)藥
味覺電生理技術(shù)除可對中藥五味進(jìn)行定性研究，尚可根據(jù)電生理記錄結(jié)果定量刻畫味覺刺激強(qiáng)度。細(xì)胞外記錄發(fā)現(xiàn)味覺神經(jīng)元的放電頻率隨著味覺刺激物濃度的增加而增加，表現(xiàn)為濃度依賴性特征 [20，22] 。借助細(xì)胞外記錄技術(shù)，選定味覺傳入通路上的特定記錄位點(孤束核、丘腦腹側(cè)中后部、臂旁核、膝狀體等)，先用標(biāo)準(zhǔn)味覺刺激物氯化鈉(咸味)、蔗糖(甜味)、氯化奎寧(苦味)及檸檬酸(酸味)來確定專一感受各類味覺刺激的味覺神經(jīng)元，再根據(jù)細(xì)胞外記錄結(jié)果，將味覺神經(jīng)元的放電頻率作為觀測指標(biāo)，來逐一對中藥混合味中的各單一藥味進(jìn)行定性鑒定和定量描述。
3 結(jié)語
中藥五味定性與定量研究在實現(xiàn)中藥現(xiàn)代化的過程中起著極其重要的作用。適應(yīng)現(xiàn)代味覺生理學(xué)研究而發(fā)展起來的味覺電生理學(xué)技術(shù)可以滿足中藥五味定性和定量研究的要求。在多種味覺電生理技術(shù)中，活體動物細(xì)胞外記錄技術(shù)通過不同味覺刺激物所誘發(fā)的不同味覺神經(jīng)元的放電頻率改變來定性和定量研究味覺刺激物的種類和刺激強(qiáng)度，可用于揭示中藥混合味中被掩蓋的味并對每一藥味進(jìn)行量化�；铙w動物細(xì)胞外記錄技術(shù)以單個細(xì)胞的動作電位發(fā)放頻率為觀測指標(biāo)，而不過分考慮動作電位的發(fā)放幅度，具有技術(shù)難度小、儀器性能要求相對較低、對同一細(xì)胞可以實現(xiàn)長時間記錄的特點，可以在國內(nèi)絕大多數(shù)電生理實驗室中廣泛開展[24，25] 。將味覺電生理技術(shù)尤其是活體動物細(xì)胞外記錄技術(shù)應(yīng)用到中藥五味定性和定量研究中，必將在中藥現(xiàn)代化進(jìn)程中發(fā)揮重要作用。
, 百拇醫(yī)藥
參考文獻(xiàn)
1 李松峰，馬云漢.中醫(yī)循證飲食調(diào)護(hù)體會.山東中醫(yī)雜志，2001，20(6):376-377.
2 杭傳珍.五味的藥性特征及配伍應(yīng)用.湖南中醫(yī)藥導(dǎo)報，2001，7(3):134-135.
3 宋秉智，施懷生.肝毒性中藥及其與藥性和有效成分的關(guān)系———對55種中藥肝毒性文獻(xiàn)資料的分析報告.山西中醫(yī)學(xué)院學(xué) 報，2001，2(1):18-19.
4 丁耐克.食品風(fēng)味化學(xué).北京:北京輕工業(yè)出版社，1996，11-15.5 李濤，胡洪民.淺述藥性理論的物質(zhì)基礎(chǔ).國醫(yī)論壇，2001，16(2):47.
6 洪宗國，程旺元.酸味中藥及其功能的化學(xué)基礎(chǔ)研究.中醫(yī)藥學(xué)刊，2001，18:92-93.
, 百拇醫(yī)藥
7 洪宗國.性味分類法及其意義.中醫(yī)函授通訊，1999，1:43-44.
8 洪宗國.新時紀(jì)中醫(yī)藥學(xué)的發(fā)展方向.中醫(yī)藥學(xué)報，2001，16(增刊):176-177.
9 劉洪臣.口腔功能和腦功能研究.口腔頜面修復(fù)學(xué)雜志，2002，3(3):138-139.
10 張家雄，胡繼云.鼓室成形術(shù)中鼓索神經(jīng)處理的探討.鐵道醫(yī)學(xué)，2000，28(1):31-32.
11 Herness MS，Gilbertson TA.Cellular mechanisms of taste transduction.Annu Rev Physiol，1999，61:873-900.
12 Mizoguchi C，Kobayakawa T，Saito S，et al.Gustatory evoked cortical activity in humans studied by simultaneous EEG and MEG recording.Chem Senses，2002，27(7):629-634.
, http://www.www.srpcoatings.com
13 Grabauskas G，Bradley RM.Frequency-dependent properties of inˉhibitory synapses in the rostral nucleus of the solitary tract.J Neuroˉphysiol，2003，89(1):199-211.
14 Grabauskas G，Bradley RM.Postnatal development of inhibitory synapˉtic transmission in the rostral nucleus of the solitary tract.J Neurophysˉiol，2001，85(5):2203-2212.
15 Gilbertson TA，Boughter JD Jr，Zhang H，et al.Distribution of gustatory sensitivities in rat taste cells:whole-cell responses to apical chemical stimulation.J Neurosci，2001，21(13):4931-4941.
, 百拇醫(yī)藥
16 McCaughey SA，Tordoff MG.Calcium deprivation alters gustatory-eˉvoked activity in the rat nucleus of the solitary tract.Am J Physiol Regˉul Integr Comp
Physiol，2001，281(3):971-978.
17 McCaughey SA，Scott TR.Rapid induction of sodium appetite modifies taste-evoked activity in the rat nucleus of the solitary tract.Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol，2000，279(3):1121-1131.
18 St John SJ，Smith DV，Neural representation of salts in the rat solitary nucleus:brain stem correlates of taste discrimination.J Neurophysiol，2000，84(2):628-638.
, http://www.www.srpcoatings.com
19 Smith DV.Li CS.GABA-mediated corticofugal inhibition of taste-responsive neurons in the nucleus of the solitary tract.Brain Res，2000，858(2):408-415.
20 Verhagen JV，Giza BK，Scott TR.Responses to taste stimulation in the ventroposteromedial nucleus of the thalamus in rats.J Neurophysiol，2003，89(1):265-275.
21 Lundy RF Jr，Norgren R.Pontine gustatory activity is altered by electriˉcal stimulation in the central nucleus of the amygdale.J Neurophysiol，2001，85(2):770-783.
, 百拇醫(yī)藥
22 Robert F，Lundy Jr，Robert J.Contreras.Gustatory neuron types in rat geniculate ganglion.J Neurophysiol，1991，82(6):2970-2988.
23 Scott TR，Plata-Salaman CR.Taste in the monkey cortex.Physiol Beˉhav，1999，67(4):489-511.
24 尹世金，韓丹，黎莉.強(qiáng)直電刺激右背海馬誘發(fā)雙側(cè)海馬神經(jīng)元癲癇相關(guān)性單位放電特征.中國應(yīng)用生理學(xué)雜志，2001，17(3):262-266.
25 康怡，閆劍群，黃濤.電毀損大鼠杏仁中央核對腦橋臂核味覺神經(jīng)元的影響.生理學(xué)報，2003，55(3):317-323.
作者單位:1 430074武漢中南民族大學(xué)生物醫(yī)學(xué)工程研究所
2 430074武漢中南民族大學(xué)化學(xué)與生命科學(xué)學(xué)院
(編輯 小川), 百拇醫(yī)藥(劉向明)
性味理論是中醫(yī)藥理論的核心之一，五味辨證是中醫(yī)遣方施藥的重要依據(jù)。在中藥五味的研究中，一方面要注意嚴(yán)謹(jǐn)規(guī)范，使中藥五味在客觀化、規(guī)范化方面取得進(jìn)展;另一方面要加強(qiáng)學(xué)科交叉，結(jié)合現(xiàn)代多學(xué)科的研究，更深入地探索其內(nèi)涵，揭示其實質(zhì)。為此要加強(qiáng)宏觀研究與微觀研究相結(jié)合，臨床分析與理論探討相結(jié)合，傳統(tǒng)方法與現(xiàn)代方法相結(jié)合，以期進(jìn)入新的領(lǐng)域，在理論上有所突破。本文結(jié)合中藥五味定性、定量研究的必要性和現(xiàn)代味覺電生理學(xué)技術(shù)的特點及其在中藥五味定性、定量研究中的可能作用進(jìn)行綜述。
1 中藥五味定性和定量研究的意義
中藥“味”的概念最早見于《黃帝內(nèi)經(jīng)》:“精不足者，補(bǔ)之以味”。有酸、苦、甘、辛、咸，謂之五味，最早是由古人口嘗而得的感受 [1] 。在臨床實踐中，人們發(fā)現(xiàn)不同味感的物質(zhì)有不同的功能�！端貑枴づK氣法時論》記載:“辛散、酸收、甘緩、苦堅、咸軟”;《藥性賦》中指出:“辛能散能行，具有發(fā)汗解表、透疹散風(fēng)、行氣行血等功效;甘能緩能補(bǔ)，具有緩中止痛、調(diào)和藥性、補(bǔ)養(yǎng)氣血等功能;苦能燥濕降瀉，具有燥濕祛邪、瀉下利尿、導(dǎo)瘀血下行等作用;酸能收斂固脫，具有止汗、止血、止瀉、縮小便、固遺精等效應(yīng);咸能軟堅潤下，具有軟堅積、破積、消癭瘤瘰疬等功能”。人們根據(jù)藥物的功能將藥味進(jìn)行適當(dāng)?shù)恼{(diào)整，最終形成中藥的五味定性 [2] 。
, http://www.www.srpcoatings.com
現(xiàn)代味覺理論證明，味覺的產(chǎn)生是由味覺分子與分布于口腔中的舌、軟腭和會厭等處的味蕾化學(xué)感受器作用，產(chǎn)生電信號傳輸?shù)酱竽X的味覺皮質(zhì)區(qū)而得到的一種感覺 [3] 。有四種基本味覺:甘、苦、酸、咸，辛味則是熱感與痛感的綜合感覺。不同的味覺有不同的味蕾，對應(yīng)著不同的化學(xué)感受，它們只對特定的分子結(jié)構(gòu)類型產(chǎn)生作用 [4] ，即不同的味覺是由不同結(jié)構(gòu)類型的分子產(chǎn)生的。如辛味藥多含揮發(fā)油，苦味藥多含生物堿，甘味藥則是糖類、脂肪、蛋白質(zhì)、維生素等營養(yǎng)素，酸味藥多含有有機(jī)酸、鞣質(zhì)，咸味藥含鈉、鉀、鈣、鎂、碘等無機(jī)鹽 [5] 。中藥的療效可以通過味覺與中藥化學(xué)成分和結(jié)構(gòu)相聯(lián)系進(jìn)行藥理分析 [6] 。同時西藥也可以根據(jù)其化學(xué)結(jié)構(gòu)與味覺的聯(lián)系引入中醫(yī)的知識系統(tǒng)，從而達(dá)到真正的中西醫(yī)結(jié)合 [7] 。
中藥典籍中記載的味多是一種定性的描述，一些藥物的味經(jīng)過與功能相聯(lián)系調(diào)整后與實際品嘗的味不相符，這給中藥性味研究和將味作為中西醫(yī)藥結(jié)合的樞紐作用帶來了困難，我們認(rèn)為，味是特定化學(xué)結(jié)構(gòu)分子與味蕾味覺感受器相互作用產(chǎn)生的感覺，而多數(shù)中藥是多成分的化學(xué)分子的混合物，口嘗中藥而得的味是混合物造成的混合味覺。有些起主要功能作用的化學(xué)分子產(chǎn)生的味可能被其它分子引起的味覺所掩蓋，根據(jù)藥效對中藥味進(jìn)行調(diào)整后的味可能反映了實際功能分子的真實味覺。為了揭示中藥混合味覺中可能被掩蓋的功能分子的實際味，有必要建立一整套對中藥混合成分中所含的四種基本味覺同時進(jìn)行定性、定量測定的分析方法，現(xiàn)代味覺電生理技術(shù)可以滿足這種要求。
, http://www.www.srpcoatings.com
總之，中藥五味定性與定量研究可以系統(tǒng)修正現(xiàn)有的中藥五味的模糊定性，建立一整套中藥味覺數(shù)據(jù)庫，借此完善中藥性味理論。根據(jù)中藥五味及中醫(yī)五味辨證同現(xiàn)代藥物化學(xué)理論的聯(lián)系，可以全面而準(zhǔn)確地指導(dǎo)中醫(yī)遣方施藥并進(jìn)行現(xiàn)代的藥理解釋。通過修正中藥藥劑中的味感構(gòu)成來綜合配伍各種藥味物質(zhì)，適應(yīng)中醫(yī)證候的變化，體現(xiàn)理、法、方、藥的整體性與系統(tǒng)性，可以為開發(fā)新藥提供理論指導(dǎo)，為中醫(yī)藥的科學(xué)化、實證化、數(shù)字化以及中西醫(yī)的真正結(jié)合作出貢獻(xiàn) [8] 。
2 味覺電生理技術(shù)在中藥五味定性和定量研究中的可能作用
現(xiàn)代生理學(xué)把味覺分為酸、甜、苦、咸四種基本味，這些味覺信息的傳遞同機(jī)體的其它感覺信息一樣，有其專門的神經(jīng)傳入通路。簡言之，口腔的特殊感覺———味覺主要通過由集中于舌背部和軟腭粘膜上皮的味蕾感覺酸、甜、苦、咸，分別通過面神經(jīng)、舌咽神經(jīng)和迷走神經(jīng)至延髓孤束核，經(jīng)二級神經(jīng)元到達(dá)橋腦味覺區(qū)，再經(jīng)三級神經(jīng)元到達(dá)丘腦味覺中繼核后經(jīng)四級神經(jīng)元到達(dá)大腦皮質(zhì)蓋島部的味覺區(qū) [9] 。味蕾的化學(xué)感受器細(xì)胞監(jiān)控著口腔的化學(xué)環(huán)境變化，并能發(fā)出信號到大腦產(chǎn)生味覺感知，不同味覺感受器選擇性地對不同的味質(zhì)產(chǎn)生反應(yīng)，且反應(yīng)模式不甚相同 [3] 。其中酸和咸味質(zhì)通過味覺感受器細(xì)胞膜上的特異性H + 和Na + 離子通道使細(xì)胞去極化;甜、苦味質(zhì)則可能通過GTP結(jié)合蛋白受體進(jìn)行信號轉(zhuǎn)導(dǎo) [10，11] 。經(jīng)口腔的味覺刺激物通過激活味蕾上相應(yīng)的味感覺神經(jīng)元而產(chǎn)生用于編碼特定味覺信號的電位變化(動作電位)，這些編碼味覺信息的電位變化可在味覺傳入通路的各個環(huán)節(jié)上通過電生理方法記錄到，這成為應(yīng)用現(xiàn)代電生理學(xué)技術(shù)研究味覺的理論基礎(chǔ)。
, http://www.www.srpcoatings.com
為深層次的揭示味覺產(chǎn)生機(jī)制，目前的味覺研究在多層次上廣泛采用了多種現(xiàn)代電生理學(xué)技術(shù)，不同的味覺電生理技術(shù)在進(jìn)行味覺研究中各有其特點。有用于記錄整個味覺皮層活動的味覺誘發(fā)電位(gustatory evoked potentials，GEPs)，作為味覺皮層眾多神經(jīng)元功能活動的整合，記錄GEPs的電生理學(xué)技術(shù)可以客觀定性評估病人味覺功能的紊亂狀態(tài)，但因GEPs的測量受多因素的影響，不宜作為味覺刺激強(qiáng)度的定量描述 [12] 。有測定各級味覺神經(jīng)元 [13，14] 和味覺感受器細(xì)胞膜上離子通道活動的全細(xì)胞膜片鉗記錄技術(shù) [15] ，該技術(shù)一般針對離體細(xì)胞進(jìn)行記錄，雖可進(jìn)行味覺刺激的定量研究，但由于是離體記錄，不能客觀反映機(jī)體的味覺整體功能，更不能進(jìn)行長時程記錄;在體膜片鉗技術(shù)可以克服離體記錄部分之不足，但技術(shù)難度大，儀器性能要求高，而且也不能進(jìn)行長時程記錄，故不宜廣泛開展。目前使用的比較多的是活體動物單個神經(jīng)元細(xì)胞外記錄技術(shù) [16，17] ，該技術(shù)記錄的是味覺傳入通路上單個味覺細(xì)胞對味覺刺激的反應(yīng)，通過不同味覺刺激物所誘發(fā)的不同味覺神經(jīng)元的放電頻率改變來定性和定量研究味覺刺激物的種類和刺激強(qiáng)度。
, http://www.www.srpcoatings.com
不同種類的味覺刺激物有其專門的味覺感受器。在體全細(xì)胞膜片鉗記錄表明舌和軟腭味蕾上的大多數(shù)味感覺神經(jīng)元的反應(yīng)性與不同的味覺刺激物—氯化鈉(咸味)、蔗糖(甜味)、氯化奎寧(苦味)及檸檬酸(酸味)之間具有一一對應(yīng)關(guān)系，某種味感覺神經(jīng)元僅對一種味覺刺激物起反應(yīng) [15] 。不同種類的味覺感受器有其相對專一的傳入通路，這一點已通過單細(xì)胞外記錄在味覺傳入通路的各個水平上得以證實。細(xì)胞外記錄技術(shù)表明大鼠孤束核存在著專門對不同的味覺刺激物—氯化鈉(咸味)、蔗糖(甜味)、氯化奎寧(苦味)及檸檬酸(酸味)敏感的神經(jīng)元 [18，19] 。這一現(xiàn)象同樣可在相對比較高級的味覺傳入神經(jīng)元上記錄到，如大鼠丘腦腹側(cè)中后部神經(jīng)元 [20] 、臂旁核神經(jīng)元 [21] 、膝狀體神經(jīng)元 [22] 等。此外，可以根據(jù)細(xì)胞外記錄結(jié)果將獼猴皮層味覺中樞神經(jīng)元分為對氯化鈉(咸味)、蔗糖(甜味)、氯化奎寧(苦味)及檸檬酸(酸味)專一敏感性神經(jīng)元四類 [23] 。這些研究結(jié)果表明味覺電生理學(xué)技術(shù)可以對中藥五味進(jìn)行定性研究，可用于揭示中藥混合味中被掩蓋的功能分子實際的味。
, 百拇醫(yī)藥
味覺電生理技術(shù)除可對中藥五味進(jìn)行定性研究，尚可根據(jù)電生理記錄結(jié)果定量刻畫味覺刺激強(qiáng)度。細(xì)胞外記錄發(fā)現(xiàn)味覺神經(jīng)元的放電頻率隨著味覺刺激物濃度的增加而增加，表現(xiàn)為濃度依賴性特征 [20，22] 。借助細(xì)胞外記錄技術(shù)，選定味覺傳入通路上的特定記錄位點(孤束核、丘腦腹側(cè)中后部、臂旁核、膝狀體等)，先用標(biāo)準(zhǔn)味覺刺激物氯化鈉(咸味)、蔗糖(甜味)、氯化奎寧(苦味)及檸檬酸(酸味)來確定專一感受各類味覺刺激的味覺神經(jīng)元，再根據(jù)細(xì)胞外記錄結(jié)果，將味覺神經(jīng)元的放電頻率作為觀測指標(biāo)，來逐一對中藥混合味中的各單一藥味進(jìn)行定性鑒定和定量描述。
3 結(jié)語
中藥五味定性與定量研究在實現(xiàn)中藥現(xiàn)代化的過程中起著極其重要的作用。適應(yīng)現(xiàn)代味覺生理學(xué)研究而發(fā)展起來的味覺電生理學(xué)技術(shù)可以滿足中藥五味定性和定量研究的要求。在多種味覺電生理技術(shù)中，活體動物細(xì)胞外記錄技術(shù)通過不同味覺刺激物所誘發(fā)的不同味覺神經(jīng)元的放電頻率改變來定性和定量研究味覺刺激物的種類和刺激強(qiáng)度，可用于揭示中藥混合味中被掩蓋的味并對每一藥味進(jìn)行量化�；铙w動物細(xì)胞外記錄技術(shù)以單個細(xì)胞的動作電位發(fā)放頻率為觀測指標(biāo)，而不過分考慮動作電位的發(fā)放幅度，具有技術(shù)難度小、儀器性能要求相對較低、對同一細(xì)胞可以實現(xiàn)長時間記錄的特點，可以在國內(nèi)絕大多數(shù)電生理實驗室中廣泛開展[24，25] 。將味覺電生理技術(shù)尤其是活體動物細(xì)胞外記錄技術(shù)應(yīng)用到中藥五味定性和定量研究中，必將在中藥現(xiàn)代化進(jìn)程中發(fā)揮重要作用。
, 百拇醫(yī)藥
參考文獻(xiàn)
1 李松峰，馬云漢.中醫(yī)循證飲食調(diào)護(hù)體會.山東中醫(yī)雜志，2001，20(6):376-377.
2 杭傳珍.五味的藥性特征及配伍應(yīng)用.湖南中醫(yī)藥導(dǎo)報，2001，7(3):134-135.
3 宋秉智，施懷生.肝毒性中藥及其與藥性和有效成分的關(guān)系———對55種中藥肝毒性文獻(xiàn)資料的分析報告.山西中醫(yī)學(xué)院學(xué) 報，2001，2(1):18-19.
4 丁耐克.食品風(fēng)味化學(xué).北京:北京輕工業(yè)出版社，1996，11-15.5 李濤，胡洪民.淺述藥性理論的物質(zhì)基礎(chǔ).國醫(yī)論壇，2001，16(2):47.
6 洪宗國，程旺元.酸味中藥及其功能的化學(xué)基礎(chǔ)研究.中醫(yī)藥學(xué)刊，2001，18:92-93.
, 百拇醫(yī)藥
7 洪宗國.性味分類法及其意義.中醫(yī)函授通訊，1999，1:43-44.
8 洪宗國.新時紀(jì)中醫(yī)藥學(xué)的發(fā)展方向.中醫(yī)藥學(xué)報，2001，16(增刊):176-177.
9 劉洪臣.口腔功能和腦功能研究.口腔頜面修復(fù)學(xué)雜志，2002，3(3):138-139.
10 張家雄，胡繼云.鼓室成形術(shù)中鼓索神經(jīng)處理的探討.鐵道醫(yī)學(xué)，2000，28(1):31-32.
11 Herness MS，Gilbertson TA.Cellular mechanisms of taste transduction.Annu Rev Physiol，1999，61:873-900.
12 Mizoguchi C，Kobayakawa T，Saito S，et al.Gustatory evoked cortical activity in humans studied by simultaneous EEG and MEG recording.Chem Senses，2002，27(7):629-634.
, http://www.www.srpcoatings.com
13 Grabauskas G，Bradley RM.Frequency-dependent properties of inˉhibitory synapses in the rostral nucleus of the solitary tract.J Neuroˉphysiol，2003，89(1):199-211.
14 Grabauskas G，Bradley RM.Postnatal development of inhibitory synapˉtic transmission in the rostral nucleus of the solitary tract.J Neurophysˉiol，2001，85(5):2203-2212.
15 Gilbertson TA，Boughter JD Jr，Zhang H，et al.Distribution of gustatory sensitivities in rat taste cells:whole-cell responses to apical chemical stimulation.J Neurosci，2001，21(13):4931-4941.
, 百拇醫(yī)藥
16 McCaughey SA，Tordoff MG.Calcium deprivation alters gustatory-eˉvoked activity in the rat nucleus of the solitary tract.Am J Physiol Regˉul Integr Comp
Physiol，2001，281(3):971-978.
17 McCaughey SA，Scott TR.Rapid induction of sodium appetite modifies taste-evoked activity in the rat nucleus of the solitary tract.Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol，2000，279(3):1121-1131.
18 St John SJ，Smith DV，Neural representation of salts in the rat solitary nucleus:brain stem correlates of taste discrimination.J Neurophysiol，2000，84(2):628-638.
, http://www.www.srpcoatings.com
19 Smith DV.Li CS.GABA-mediated corticofugal inhibition of taste-responsive neurons in the nucleus of the solitary tract.Brain Res，2000，858(2):408-415.
20 Verhagen JV，Giza BK，Scott TR.Responses to taste stimulation in the ventroposteromedial nucleus of the thalamus in rats.J Neurophysiol，2003，89(1):265-275.
21 Lundy RF Jr，Norgren R.Pontine gustatory activity is altered by electriˉcal stimulation in the central nucleus of the amygdale.J Neurophysiol，2001，85(2):770-783.
, 百拇醫(yī)藥
22 Robert F，Lundy Jr，Robert J.Contreras.Gustatory neuron types in rat geniculate ganglion.J Neurophysiol，1991，82(6):2970-2988.
23 Scott TR，Plata-Salaman CR.Taste in the monkey cortex.Physiol Beˉhav，1999，67(4):489-511.
24 尹世金，韓丹，黎莉.強(qiáng)直電刺激右背海馬誘發(fā)雙側(cè)海馬神經(jīng)元癲癇相關(guān)性單位放電特征.中國應(yīng)用生理學(xué)雜志，2001，17(3):262-266.
25 康怡，閆劍群，黃濤.電毀損大鼠杏仁中央核對腦橋臂核味覺神經(jīng)元的影響.生理學(xué)報，2003，55(3):317-323.
作者單位:1 430074武漢中南民族大學(xué)生物醫(yī)學(xué)工程研究所
2 430074武漢中南民族大學(xué)化學(xué)與生命科學(xué)學(xué)院
(編輯 小川), 百拇醫(yī)藥(劉向明)
參見：首頁 > 醫(yī)學(xué)版 > 醫(yī)學(xué)知識 > 神經(jīng)系統(tǒng) > 感覺器官 > 味覺
百拇醫(yī)藥網(wǎng) http://www.www.srpcoatings.com/html/Dir/2004/05/10/39/94/06.htm