有益芽胞桿菌受體菌研究
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倪學(xué)勤;何明清;蔡寶祥
芽胞桿菌|原生質(zhì)體轉(zhuǎn)化|賴(lài)氨酸,關(guān)鍵詞:
參見(jiàn)附件(122kb)。
倪學(xué)勤;何明清;蔡寶祥 四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院;四川雅安625014;南京農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院;江蘇南京210095 中國(guó)微生態(tài)學(xué)雜志 2001 3
關(guān)鍵詞:芽胞桿菌;原生質(zhì)體轉(zhuǎn)化;賴(lài)氨酸
采用酸性茚三酮法測(cè)定了 30株有益芽胞桿菌的賴(lài)氨酸產(chǎn)量 ,然后在不同的溶菌酶濃度下 ,對(duì)賴(lài)氨酸產(chǎn)量超過(guò) 0 .0 7g/ L 的 2 1株菌進(jìn)行原生質(zhì)體轉(zhuǎn)化質(zhì)粒 p UB110 ,測(cè)定原生質(zhì)體形成率、原生質(zhì)體再生率及轉(zhuǎn)化頻率 ,結(jié)果 6 10 3,6 10 4,6 12 0 ,6 12 9四株菌的轉(zhuǎn)化頻率較高。然后 ,采用經(jīng)典遺傳學(xué)方法選育AEC抗性突變株 ,使賴(lài)氨酸積累提高。其中 ,B.licheniformis 6 10 4誘變菌株 6 10 40 1能積累賴(lài)氨酸 2 .91g/L,比出發(fā)菌株提高了 17倍左右 ,轉(zhuǎn)化率也提高了一個(gè)數(shù)量級(jí)。通過(guò)質(zhì)粒的再轉(zhuǎn)化試驗(yàn)及傳代穩(wěn)定性試驗(yàn) ,進(jìn)一步證實(shí) B.licheniformis 6 10 4及其突變菌株610401是較好的受體菌,尤其是用于賴(lài)氨酸合成酶基因的表達(dá)。
關(guān)鍵詞:芽胞桿菌;原生質(zhì)體轉(zhuǎn)化;賴(lài)氨酸
采用酸性茚三酮法測(cè)定了 30株有益芽胞桿菌的賴(lài)氨酸產(chǎn)量 ,然后在不同的溶菌酶濃度下 ,對(duì)賴(lài)氨酸產(chǎn)量超過(guò) 0 .0 7g/ L 的 2 1株菌進(jìn)行原生質(zhì)體轉(zhuǎn)化質(zhì)粒 p UB110 ,測(cè)定原生質(zhì)體形成率、原生質(zhì)體再生率及轉(zhuǎn)化頻率 ,結(jié)果 6 10 3,6 10 4,6 12 0 ,6 12 9四株菌的轉(zhuǎn)化頻率較高。然后 ,采用經(jīng)典遺傳學(xué)方法選育AEC抗性突變株 ,使賴(lài)氨酸積累提高。其中 ,B.licheniformis 6 10 4誘變菌株 6 10 40 1能積累賴(lài)氨酸 2 .91g/L,比出發(fā)菌株提高了 17倍左右 ,轉(zhuǎn)化率也提高了一個(gè)數(shù)量級(jí)。通過(guò)質(zhì)粒的再轉(zhuǎn)化試驗(yàn)及傳代穩(wěn)定性試驗(yàn) ,進(jìn)一步證實(shí) B.licheniformis 6 10 4及其突變菌株610401是較好的受體菌,尤其是用于賴(lài)氨酸合成酶基因的表達(dá)。
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