不同濃度菌尿?qū)F-100檢測(cè)紅細(xì)胞的影響
【摘要】 目的 探討不同濃度菌尿?qū)F-100型尿沉渣分析儀進(jìn)行尿紅細(xì)胞測(cè)定時(shí)的影響。方法 用UF-100型全自動(dòng)尿沉渣分析儀對(duì)清潔中段尿進(jìn)行檢測(cè),并利用DiaSys R/S2003尿沉渣定量分析系統(tǒng)對(duì)僅紅細(xì)胞陽性的樣本鏡檢。結(jié)果 標(biāo)本以細(xì)菌濃度分四組,0~4000/μl組假陽性率為9.6%,4001~8000/μl組假陽性率為15.6%,8001~12000/μl組假陽性率為36.5%,>12000/μl組假陽性率為75.4%。結(jié)論 UF-100檢測(cè)紅細(xì)胞的假陽性率隨細(xì)菌數(shù)的增加而升高,隨著細(xì)菌數(shù)的增加,紅細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果可信度下降,以鏡檢確診。
【關(guān)鍵詞】 UF-100;菌尿;紅細(xì)胞;DiaSys
尿沉渣檢驗(yàn)有較高的臨床價(jià)值,但傳統(tǒng)的鏡檢方法存在費(fèi)時(shí)、誤差大、重復(fù)性差、不能定量、受人為影響、難以進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控等的缺點(diǎn)。UF-100型全自動(dòng)尿沉渣分析儀(以下簡(jiǎn)稱UF-100)是對(duì)尿樣本直接作熒光染色后,利用流式細(xì)胞原理對(duì)尿中有形成分進(jìn)行分析和計(jì)數(shù),它具有操作簡(jiǎn)便,重復(fù)性好等特點(diǎn)。但我們?cè)诠ぷ髦邪l(fā)現(xiàn)尿中的細(xì)菌、結(jié)晶、精子等可影響紅細(xì)胞的測(cè)定[1,2],而細(xì)菌對(duì)其影響比較常見。為提高尿沉渣檢驗(yàn)質(zhì)量,我們對(duì)UF-100和DiaSys R/S2003尿沉渣定量分析系統(tǒng)鏡檢法的尿紅細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行了比較。
1 材料與方法
1.1 材料
1.1.1 儀器 UF-100型全自動(dòng)尿沉渣分析儀及配套試劑和質(zhì)控物(日本Sysmex公司)。DiaSys R/S2003尿沉渣定量分析系統(tǒng)(美國(guó)DiaSys公司)。
1.1.2 標(biāo)本來源 順德第一人民醫(yī)院7354例住院患者第一次晨尿,男3251例,女4103例。
1.2 方法 (1)用一次性塑料杯收集患者清潔中段尿,人工充分混勻后分別裝于兩支清潔的Kova尿沉渣管內(nèi),每管10ml,一管用于UF-100檢測(cè),另一管用于鏡檢。(2)用UF-100檢測(cè)標(biāo)本,嚴(yán)格按照UF-100操作說明書操作。檢測(cè)前用Sysmex公司提供的尿沉渣質(zhì)控物對(duì)儀器進(jìn)行監(jiān)控。立即觀察UF-100分析數(shù)據(jù),取僅紅細(xì)胞陽性的樣本進(jìn)行鏡檢,以排除其他影響因素如白細(xì)胞、結(jié)晶等對(duì)本實(shí)驗(yàn)的干擾。(3)DiaSys R/S2003尿沉渣定量分析系統(tǒng)鏡檢法:取100ml尿液倒入刻度離心管,以1500rpm離心5min,留取管底沉渣約200μl,直接在DiaSys R/S2003尿沉渣定量分析系統(tǒng)鏡檢。所有試驗(yàn)均在取樣后2h內(nèi)完成。(4)以尿細(xì)菌濃度將標(biāo)本分為四組:0~4000/μl組,4001~8000/μl組,8001~12000/μl組,>12000/μl組,進(jìn)行統(tǒng)計(jì),比較兩種儀器檢測(cè)紅細(xì)胞的結(jié)果,分別計(jì)算每組的假陽性率。
2 結(jié)果
2.1 判斷標(biāo)準(zhǔn) 超出UF-100儀器紅細(xì)胞報(bào)警限值和DiaSys R/S2003儀器參考值的結(jié)果即為兩種方法各自的陽性結(jié)果。UF-100陽性而DiaSys R/S2003陰性的結(jié)果即為UF-100的假陽性結(jié)果。兩種儀器的陽性結(jié)果的判定標(biāo)準(zhǔn)見表1(根據(jù)廠商提供)。
表1 紅細(xì)胞陽性結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn) (略)
2.2 比較 所統(tǒng)計(jì)7354份標(biāo)本中,UF-100檢測(cè)出僅紅細(xì)胞陽性的標(biāo)本數(shù)為473份,經(jīng)DiaSys R/S2003尿沉渣定量分析系統(tǒng)鏡檢復(fù)查符合例數(shù)為305例,即真陽性率為64.7%,假陽性率為35.3%。隨著細(xì)菌數(shù)的增加,UF-100檢測(cè)紅細(xì)胞的假陽性率升高。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表2。
表2 紅細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果對(duì)比(略)
3 討論
利用UF-100檢測(cè)尿沉渣具有操作簡(jiǎn)便,重復(fù)性好的特點(diǎn)。UF-100主要應(yīng)用流式細(xì)胞原理和電阻抗原理,通過測(cè)定各種有形成分的熒光強(qiáng)度(Fl)和熒光脈沖寬度(Flw),前向散射光強(qiáng)度(Fsc)和前向散射光脈沖寬度(Fscw)以及電阻抗(Imp)的大小,識(shí)別和計(jì)數(shù)尿中紅細(xì)胞、白細(xì)胞、上皮細(xì)胞、管型、細(xì)菌、結(jié)晶、精子和酵母菌等[3]。
UF-100利用對(duì)細(xì)胞膜和核酸親合力不一樣的兩種熒光染料進(jìn)行染色,其中紅細(xì)胞僅細(xì)胞膜被染色,產(chǎn)生的熒光強(qiáng)度弱,位于散點(diǎn)圖的低熒光區(qū)。細(xì)菌由DNA或RNA構(gòu)成,UF-100菲啶對(duì)膜的透性低,染色后其熒光(Fl)和前向散射光強(qiáng)度(Fsc)均較低,且與紅細(xì)胞相近,散點(diǎn)圖上散點(diǎn)分布與紅細(xì)胞有所重疊。因而當(dāng)細(xì)菌濃度較高,細(xì)菌聚集,大小與紅細(xì)胞相近時(shí),儀器有可能將其誤認(rèn)為紅細(xì)胞,造成紅細(xì)胞計(jì)數(shù)的假陽性。
本實(shí)驗(yàn)的各項(xiàng)結(jié)果表明,利用UF-100檢測(cè)尿沉渣時(shí),細(xì)菌能影響紅細(xì)胞測(cè)定的準(zhǔn)確性,并且隨著細(xì)菌數(shù)的增加,UF-100檢測(cè)紅細(xì)胞的假陽性率升高。雖然UF-100檢測(cè)尿沉渣簡(jiǎn)單快捷,可以以批量的形式由儀器自動(dòng)完成。但在實(shí)際工作中,應(yīng)用UF-100主要起過篩作用,應(yīng)與鏡檢有機(jī)結(jié)合,以提高尿沉渣檢驗(yàn)的質(zhì)量。
【參考文獻(xiàn)】
1 葉應(yīng)嫵,王敏三.全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程.第二版.北京:衛(wèi)生部醫(yī)政司,1997,133-134.
2 馬駿龍,叢玉隆.菌尿?qū)δ蛞悍治鰞x測(cè)定紅細(xì)胞的影響.中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志,1999,22:205-207.
3 金大鳴.UF-100型尿沉渣全自動(dòng)檢測(cè)儀評(píng)價(jià).中華醫(yī)學(xué)雜志,1998,22:190-191.
作者單位: 528300 廣東佛山,佛山市順德第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科
(編輯:海 濤), http://www.www.srpcoatings.com(林志遠(yuǎn),賴永坤)
【關(guān)鍵詞】 UF-100;菌尿;紅細(xì)胞;DiaSys
尿沉渣檢驗(yàn)有較高的臨床價(jià)值,但傳統(tǒng)的鏡檢方法存在費(fèi)時(shí)、誤差大、重復(fù)性差、不能定量、受人為影響、難以進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控等的缺點(diǎn)。UF-100型全自動(dòng)尿沉渣分析儀(以下簡(jiǎn)稱UF-100)是對(duì)尿樣本直接作熒光染色后,利用流式細(xì)胞原理對(duì)尿中有形成分進(jìn)行分析和計(jì)數(shù),它具有操作簡(jiǎn)便,重復(fù)性好等特點(diǎn)。但我們?cè)诠ぷ髦邪l(fā)現(xiàn)尿中的細(xì)菌、結(jié)晶、精子等可影響紅細(xì)胞的測(cè)定[1,2],而細(xì)菌對(duì)其影響比較常見。為提高尿沉渣檢驗(yàn)質(zhì)量,我們對(duì)UF-100和DiaSys R/S2003尿沉渣定量分析系統(tǒng)鏡檢法的尿紅細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行了比較。
1 材料與方法
1.1 材料
1.1.1 儀器 UF-100型全自動(dòng)尿沉渣分析儀及配套試劑和質(zhì)控物(日本Sysmex公司)。DiaSys R/S2003尿沉渣定量分析系統(tǒng)(美國(guó)DiaSys公司)。
1.1.2 標(biāo)本來源 順德第一人民醫(yī)院7354例住院患者第一次晨尿,男3251例,女4103例。
1.2 方法 (1)用一次性塑料杯收集患者清潔中段尿,人工充分混勻后分別裝于兩支清潔的Kova尿沉渣管內(nèi),每管10ml,一管用于UF-100檢測(cè),另一管用于鏡檢。(2)用UF-100檢測(cè)標(biāo)本,嚴(yán)格按照UF-100操作說明書操作。檢測(cè)前用Sysmex公司提供的尿沉渣質(zhì)控物對(duì)儀器進(jìn)行監(jiān)控。立即觀察UF-100分析數(shù)據(jù),取僅紅細(xì)胞陽性的樣本進(jìn)行鏡檢,以排除其他影響因素如白細(xì)胞、結(jié)晶等對(duì)本實(shí)驗(yàn)的干擾。(3)DiaSys R/S2003尿沉渣定量分析系統(tǒng)鏡檢法:取100ml尿液倒入刻度離心管,以1500rpm離心5min,留取管底沉渣約200μl,直接在DiaSys R/S2003尿沉渣定量分析系統(tǒng)鏡檢。所有試驗(yàn)均在取樣后2h內(nèi)完成。(4)以尿細(xì)菌濃度將標(biāo)本分為四組:0~4000/μl組,4001~8000/μl組,8001~12000/μl組,>12000/μl組,進(jìn)行統(tǒng)計(jì),比較兩種儀器檢測(cè)紅細(xì)胞的結(jié)果,分別計(jì)算每組的假陽性率。
2 結(jié)果
2.1 判斷標(biāo)準(zhǔn) 超出UF-100儀器紅細(xì)胞報(bào)警限值和DiaSys R/S2003儀器參考值的結(jié)果即為兩種方法各自的陽性結(jié)果。UF-100陽性而DiaSys R/S2003陰性的結(jié)果即為UF-100的假陽性結(jié)果。兩種儀器的陽性結(jié)果的判定標(biāo)準(zhǔn)見表1(根據(jù)廠商提供)。
表1 紅細(xì)胞陽性結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn) (略)
2.2 比較 所統(tǒng)計(jì)7354份標(biāo)本中,UF-100檢測(cè)出僅紅細(xì)胞陽性的標(biāo)本數(shù)為473份,經(jīng)DiaSys R/S2003尿沉渣定量分析系統(tǒng)鏡檢復(fù)查符合例數(shù)為305例,即真陽性率為64.7%,假陽性率為35.3%。隨著細(xì)菌數(shù)的增加,UF-100檢測(cè)紅細(xì)胞的假陽性率升高。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表2。
表2 紅細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果對(duì)比(略)
3 討論
利用UF-100檢測(cè)尿沉渣具有操作簡(jiǎn)便,重復(fù)性好的特點(diǎn)。UF-100主要應(yīng)用流式細(xì)胞原理和電阻抗原理,通過測(cè)定各種有形成分的熒光強(qiáng)度(Fl)和熒光脈沖寬度(Flw),前向散射光強(qiáng)度(Fsc)和前向散射光脈沖寬度(Fscw)以及電阻抗(Imp)的大小,識(shí)別和計(jì)數(shù)尿中紅細(xì)胞、白細(xì)胞、上皮細(xì)胞、管型、細(xì)菌、結(jié)晶、精子和酵母菌等[3]。
UF-100利用對(duì)細(xì)胞膜和核酸親合力不一樣的兩種熒光染料進(jìn)行染色,其中紅細(xì)胞僅細(xì)胞膜被染色,產(chǎn)生的熒光強(qiáng)度弱,位于散點(diǎn)圖的低熒光區(qū)。細(xì)菌由DNA或RNA構(gòu)成,UF-100菲啶對(duì)膜的透性低,染色后其熒光(Fl)和前向散射光強(qiáng)度(Fsc)均較低,且與紅細(xì)胞相近,散點(diǎn)圖上散點(diǎn)分布與紅細(xì)胞有所重疊。因而當(dāng)細(xì)菌濃度較高,細(xì)菌聚集,大小與紅細(xì)胞相近時(shí),儀器有可能將其誤認(rèn)為紅細(xì)胞,造成紅細(xì)胞計(jì)數(shù)的假陽性。
本實(shí)驗(yàn)的各項(xiàng)結(jié)果表明,利用UF-100檢測(cè)尿沉渣時(shí),細(xì)菌能影響紅細(xì)胞測(cè)定的準(zhǔn)確性,并且隨著細(xì)菌數(shù)的增加,UF-100檢測(cè)紅細(xì)胞的假陽性率升高。雖然UF-100檢測(cè)尿沉渣簡(jiǎn)單快捷,可以以批量的形式由儀器自動(dòng)完成。但在實(shí)際工作中,應(yīng)用UF-100主要起過篩作用,應(yīng)與鏡檢有機(jī)結(jié)合,以提高尿沉渣檢驗(yàn)的質(zhì)量。
【參考文獻(xiàn)】
1 葉應(yīng)嫵,王敏三.全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程.第二版.北京:衛(wèi)生部醫(yī)政司,1997,133-134.
2 馬駿龍,叢玉隆.菌尿?qū)δ蛞悍治鰞x測(cè)定紅細(xì)胞的影響.中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志,1999,22:205-207.
3 金大鳴.UF-100型尿沉渣全自動(dòng)檢測(cè)儀評(píng)價(jià).中華醫(yī)學(xué)雜志,1998,22:190-191.
作者單位: 528300 廣東佛山,佛山市順德第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科
(編輯:海 濤), http://www.www.srpcoatings.com(林志遠(yuǎn),賴永坤)