網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)的方法探討
作者：劉伣 侯淑智
單位：哈爾濱市242醫(yī)院檢驗科,150066
關(guān)鍵詞：
網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)的方法探討 網(wǎng)織紅細(xì)胞是尚未完全成熟的紅細(xì)胞，其胞漿內(nèi)尚存在有嗜鹼性的RYA物質(zhì)，經(jīng)煌焦細(xì)蘭或新亞早蘭活體染色后呈淺蘭或深蘭色網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。經(jīng)多年臨床經(jīng)驗摸索發(fā)現(xiàn)染色劑的pH值對檢測結(jié)果有很大影響，當(dāng)pH值調(diào)至7.4～7.8之間時可提高網(wǎng)織紅細(xì)胞的檢出率，為臨床提供了可靠的依據(jù)。
試劑：
1.煌焦細(xì)蘭 1克
2.枸椽酸納 0.4克
將上述二試劑溶于pH值調(diào)于7.4～7.8(最好7.6)的生理鹽水100ml中
1 方法：
取口徑10mm試管一支，分別加試劑約0.1ml，未梢血2滴(貧血嚴(yán)重者加血4滴)充分混合，置室溫，(冬季放37℃水浴箱或其它溫暖處)20分鐘，然后制片，要求頭、體、尾清楚，在體尾部計數(shù)1000個紅細(xì)胞中網(wǎng)織紅細(xì)胞數(shù)，折算百分率報告之一。
特點：①染色時間長，著色均勻
②含有抗凝劑，防止血液凝固便于計數(shù)：
2 結(jié)果
網(wǎng)織紅細(xì)胞的檢查是對各種貧血的鑒別診斷和抗貧血藥物的療效觀察主要依據(jù)。增生性貧血的網(wǎng)織紅細(xì)胞，經(jīng)改變血液濃度或調(diào)試溶液的pH后，明顯提高網(wǎng)織紅細(xì)胞數(shù)。這可能與紅細(xì)胞帶氧不足所致pH改變有關(guān)。
調(diào)與未調(diào)試劑pH結(jié)果觀察：
pH6.5時(一般生理鹽水pH為6.5)網(wǎng)織紅細(xì)胞
±SD＝1.18±0.594%。
pH7.6時(調(diào)試后)+SD＝1.404±0.86%
經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理t＝20.37，p<0.017，調(diào)與未調(diào)pH比較差異非常顯著。
3 討論
正常人血液pH為7.35～7.45，血液pH大于血紅蛋白等電點，紅細(xì)胞帶負(fù)電，網(wǎng)織紅細(xì)胞是尚未成熟的紅細(xì)胞，其特點是胞漿內(nèi)殘存著多少不等的RNA為嗜鹼性物質(zhì)，顯變性，貧血病人血液pH小于血液pH和血紅蛋白等電點時，紅細(xì)胞中殘系RNA的羧基游離相對受抑制，影響紅細(xì)胞中RNA與染料結(jié)合，使網(wǎng)織紅細(xì)胞檢出率降低。適當(dāng)增加血與試劑比例可提高染色中的pH，或把試劑的pH值調(diào)至7.4～7.8之間，使其大于血紅蛋白等電點，活體染色時，游離的羧基可與煌焦油蘭充分結(jié)合，能提高網(wǎng)織紅細(xì)胞檢出率。
幾點注意事項：
1.試劑pH超過7.8時可出現(xiàn)部分紅細(xì)胞溶解。
2.室溫低時，可延長染色時間，反之縮短染色時間。
3.用氫氧化鈉調(diào)試劑pH，可用pH試紙測之。
4.網(wǎng)織紅細(xì)胞比一般紅細(xì)胞略大，故在涂片的尾部和兩邊分布較多，因此在計數(shù)時要兼顧到這些區(qū)域。
參考文獻(xiàn)：
1 葉應(yīng)嫵，王毓三主編.全國臨床檢驗操作規(guī)程.第一版.東京大學(xué)出版社，1991,10.
2 朱忠勇.陳之航主編.臨床醫(yī)學(xué)檢驗.第一版.上海科學(xué)出版社，1978.4，12.
3 朱忠勇.美國醫(yī)學(xué)檢驗學(xué).第一版.人民軍醫(yī)出版社，1992.11，17.
1996年5月收稿, 百拇醫(yī)藥
單位：哈爾濱市242醫(yī)院檢驗科,150066
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網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)的方法探討 網(wǎng)織紅細(xì)胞是尚未完全成熟的紅細(xì)胞，其胞漿內(nèi)尚存在有嗜鹼性的RYA物質(zhì)，經(jīng)煌焦細(xì)蘭或新亞早蘭活體染色后呈淺蘭或深蘭色網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。經(jīng)多年臨床經(jīng)驗摸索發(fā)現(xiàn)染色劑的pH值對檢測結(jié)果有很大影響，當(dāng)pH值調(diào)至7.4～7.8之間時可提高網(wǎng)織紅細(xì)胞的檢出率，為臨床提供了可靠的依據(jù)。
試劑：
1.煌焦細(xì)蘭 1克
2.枸椽酸納 0.4克
將上述二試劑溶于pH值調(diào)于7.4～7.8(最好7.6)的生理鹽水100ml中
1 方法：
取口徑10mm試管一支，分別加試劑約0.1ml，未梢血2滴(貧血嚴(yán)重者加血4滴)充分混合，置室溫，(冬季放37℃水浴箱或其它溫暖處)20分鐘，然后制片，要求頭、體、尾清楚，在體尾部計數(shù)1000個紅細(xì)胞中網(wǎng)織紅細(xì)胞數(shù)，折算百分率報告之一。
特點：①染色時間長，著色均勻
②含有抗凝劑，防止血液凝固便于計數(shù)：
2 結(jié)果
網(wǎng)織紅細(xì)胞的檢查是對各種貧血的鑒別診斷和抗貧血藥物的療效觀察主要依據(jù)。增生性貧血的網(wǎng)織紅細(xì)胞，經(jīng)改變血液濃度或調(diào)試溶液的pH后，明顯提高網(wǎng)織紅細(xì)胞數(shù)。這可能與紅細(xì)胞帶氧不足所致pH改變有關(guān)。
調(diào)與未調(diào)試劑pH結(jié)果觀察：
pH6.5時(一般生理鹽水pH為6.5)網(wǎng)織紅細(xì)胞
±SD＝1.18±0.594%。pH7.6時(調(diào)試后)
+SD＝1.404±0.86%經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理t＝20.37，p<0.017，調(diào)與未調(diào)pH比較差異非常顯著。
3 討論
正常人血液pH為7.35～7.45，血液pH大于血紅蛋白等電點，紅細(xì)胞帶負(fù)電，網(wǎng)織紅細(xì)胞是尚未成熟的紅細(xì)胞，其特點是胞漿內(nèi)殘存著多少不等的RNA為嗜鹼性物質(zhì)，顯變性，貧血病人血液pH小于血液pH和血紅蛋白等電點時，紅細(xì)胞中殘系RNA的羧基游離相對受抑制，影響紅細(xì)胞中RNA與染料結(jié)合，使網(wǎng)織紅細(xì)胞檢出率降低。適當(dāng)增加血與試劑比例可提高染色中的pH，或把試劑的pH值調(diào)至7.4～7.8之間，使其大于血紅蛋白等電點，活體染色時，游離的羧基可與煌焦油蘭充分結(jié)合，能提高網(wǎng)織紅細(xì)胞檢出率。
幾點注意事項：
1.試劑pH超過7.8時可出現(xiàn)部分紅細(xì)胞溶解。
2.室溫低時，可延長染色時間，反之縮短染色時間。
3.用氫氧化鈉調(diào)試劑pH，可用pH試紙測之。
4.網(wǎng)織紅細(xì)胞比一般紅細(xì)胞略大，故在涂片的尾部和兩邊分布較多，因此在計數(shù)時要兼顧到這些區(qū)域。
參考文獻(xiàn)：
1 葉應(yīng)嫵，王毓三主編.全國臨床檢驗操作規(guī)程.第一版.東京大學(xué)出版社，1991,10.
2 朱忠勇.陳之航主編.臨床醫(yī)學(xué)檢驗.第一版.上海科學(xué)出版社，1978.4，12.
3 朱忠勇.美國醫(yī)學(xué)檢驗學(xué).第一版.人民軍醫(yī)出版社，1992.11，17.
1996年5月收稿, 百拇醫(yī)藥