干眼癥結(jié)膜印跡細胞學研究
作者：宋麗紅 金秀英 孫旭光 楊寶玲
單位：北京市眼科研究所(100005)
關(guān)鍵詞：結(jié)膜印跡細胞學(CIC)；杯狀細胞；SS干眼；非SS干眼
眼視光學雜志/990309摘 要 目的：探討結(jié)膜印跡細胞學檢查(CIC)在干眼診斷中的作用。方法：對45人90眼正常組和80人160眼實驗組除采用淚液分泌實驗I(S-I-T)、淚膜破裂時間(BUT)、虎紅染色(RBS)及熒光素染色(FLS)計分等常用眼表淚功能檢查外，重點采用CIC，通過觀察結(jié)膜上皮細胞情況及杯狀細胞數(shù)來了解正常眼、干眼的淚膜粘液層的情況。結(jié)果：印跡細胞學分級及杯狀細胞數(shù)組間均有顯著的差異，正常組分級主要集中于0級；非SS干眼組的分級主要集中于1級和2級；SS干眼組的分級主要集中于2級及3級。杯狀細胞與虎紅色計分呈負相關(guān)。結(jié)論：結(jié)膜印跡細胞學檢查通過分級、觀察杯狀細胞數(shù)變化，了解淚膜粘液層的情況可用于區(qū)分正常人與干眼癥患者并可了解干眼的病程變化。
, 百拇醫(yī)藥
A study of conjunctival impression cytology for dry eye
Song Lihong,Jin Xiuying，Sun Xuguang，et al.
Beijing Institute of Ophthalmology,Beijing 100005
Abstract Objective:To evaluate the applicability of Conjunctival Impression Cytology(CIC) to the diagnosis of dry eye.Methods:In addition to the Schirmer Test for Tear Break-Up Time，Rose Bengal Staining and Fluorescein Staining were used.We tested the tear film mucous layer by CIC for a control group and for dry eye patients.Results:CIC grading of the controls revealed 80% of the eyes to be grade 0 and 20% to be grade 1;for the dry eyes,70% were grade 2 and grade 3.This demonstrates a significant differences between the two groups.There is a negative correlation between goblet cell density and RBS results.Conclusion:CIC grading and goblet cell density can be used to assess the mucous layer to distinguish between normal and dry eye patients as well as to track the progression of dry eye.
, 百拇醫(yī)藥
Key words Conjunctival Impression Cytology(CIC) Goblet cell Sjogren Syndrome(SS) dry eye Non-SS dry eye
淚膜最內(nèi)層為粘液層，粘液層粘附于角膜微絨毛、微皺壁上，使淚膜能均勻地覆蓋于眼表，并可降低眼表面張力。粘液主要由結(jié)膜杯狀細胞產(chǎn)生，而結(jié)膜杯狀細胞數(shù)目及結(jié)膜表層細胞形態(tài)學改變可通過結(jié)膜印跡細胞學(CIC)來觀察。
1 材料和方法
1.1 研究對象
正常對照組：1997年11月至1998年10月間同仁醫(yī)院驗光中心診斷無眼病的人群共45人(90眼)。年齡36歲至68歲(平均51.6±9.7歲)，男8人、女37人。經(jīng)裂隙燈仔細檢查，排除干眼、瞼緣炎及眼過敏癥，無眼瞼及眼表異常，無角膜接觸鏡配戴史，無影響淚液分泌的全身與局部用藥史，無眼部手術(shù)史，無膠原血管病或其它全身疾病史。
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實驗組：經(jīng)檢查符合角結(jié)膜干燥癥(KCS)診斷標準[1]即納入實驗組，共80人。實驗組又分為非Sjogren綜合征(SS)干眼組與SS干眼組。
SS干眼組：經(jīng)內(nèi)科、口腔科會診，符合Tsubota K等[2]診斷標準納入此組。具體標準如下：a.KCS；b.口腔干燥；c.唇腺活檢廣泛淋巴細胞侵潤；d.實驗室檢查：RF(+)，ANA(+)或抗SS—A抗體(+)/抗SS—B抗體(+)。凡具以上至少3個條件，則診斷為SS。本組患者30人。年齡35歲至73歲(平均50.2±11.6歲)，男3人，女27人。
非SS干眼組：另外無SS診斷指征的50人既被納入非SS干眼組。年齡35歲至70歲(48.6±10.6歲)，男10人、女40人，其中很大一部分患者抗核抗體或和自身抗體陽性。
1.2 常用淚液檢查方法
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1.2.1 淚液分泌試驗I(S-I-T)：室內(nèi)普通光線下，采用標準淚液分泌量測試條(SHOWA YAKUHIN KAKO CO.，LTD)檢測，折線處折起，置于下瞼中外1/3結(jié)膜囊內(nèi)，5分鐘取下從折起處記濕長。
1.2.2 淚膜破裂時間(BUT)：1%熒光素鈉10μl滴入結(jié)膜囊，眨眼數(shù)次后用裂隙燈觀察淚膜，測BUT，連測三次取其平均值。
1.2.3 熒光素染色(FLS)：1%熒光素鈉10μl滴入結(jié)膜囊內(nèi)，眨眼數(shù)次，裂隙燈鈷藍光下觀察角膜上、中、下三部分熒光素著染情況，每部分按0～3計分[3]。0示無著染；1示散在點染；2示中等量斑點染色；3示密集斑點狀染色。
1.2.4 虎紅染色(RBS)：1%虎紅10μl滴入結(jié)膜囊內(nèi)，眨眼數(shù)次，裂隙燈綠光觀察鼻側(cè)球結(jié)膜、角膜、顳側(cè)球結(jié)膜三部分，每部分按0～3計分[3]。0示無著染；1示散在點染；2示中等量斑點染色；3示密集斑點狀染色。
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1.3 CIC檢查
1.3.1 材料
0.2μm孔徑醋酸纖維素濾紙，切剪成6mm直徑大小，浸蒸餾水中3～4小時，以消除濾紙表面活性，取出、晾干、高壓消毒、備用。
1.3.2 方法
①患者平臥于檢查床上，0.5%的卡因點眼2次，開瞼器開瞼。
②濾紙吸去下穹隆部淚液。
③小顳子夾取醋酸纖維濾紙，粗糙面向下置于角膜顳側(cè)水平2mm外的球結(jié)膜上，60g壓力(眼動脈壓力計)，持續(xù)6秒印取表層上皮細胞，將濾紙片置于10%福爾馬林中固定。
④標本PAS染色：略。
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⑤標本脫水后置于載玻片上，自然干燥，采用二甲苯使其透明，置于普通光學顯微鏡下觀察上皮細胞的連接，胞核、胞漿的顏色，核、漿比(N/C)，上皮細胞角化，杯狀細胞數(shù)及炎性細胞的有無，然后進行分級。
1.3.3 分級：據(jù)NELSON’s分級標準進行分級[4]。
0級：結(jié)膜上皮細胞形態(tài)正常，層狀、大小一致，胞漿藍綠色，N/C為1∶2，杯狀細胞密集分布。目鏡10倍、物鏡10倍條件下觀察5個視野分別計杯狀細胞數(shù)，取其均值，則平均1個低倍視野下見12.1個杯狀細胞。見圖1、2所示。
圖1 CIC分級0級(×100)
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圖2 CIC分級0級(×400)
1級：結(jié)膜上皮細胞輕擴大，胞漿藍綠色，N/C為1∶3，無角化，杯狀細胞開始減少，密度下降，平均1個低倍視野下見7.4個杯狀細胞。見圖3、4所示。
圖3 CIC分級1級(×100)
圖4 CIC分級1級(×400)
2級：所有結(jié)膜上皮細胞均擴大，變扁平，胞漿蘭綠或粉紅色，N/C為1∶4～1∶5，輕度角化，杯狀細胞明顯減少，平均1個低倍視野下見2.7個杯狀細胞。見圖5所示。
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圖5 CIC分級2級(×100)
3級：結(jié)膜上皮細胞胞漿內(nèi)出現(xiàn)顆粒狀物，核固縮崩解，上皮細胞胞漿成粉紅色，N/C為1∶6～1∶8，出現(xiàn)不同程度的角化，杯狀細胞完全喪失，視野下不見杯狀細胞。見圖6～8所示。
圖6 CIC分級3級(×400)
圖7 CIC分級3級(×400)
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圖8 CIC分級3級(×100)2 結(jié)果
三組間各項檢查均值經(jīng)SPSS統(tǒng)計軟件包處理，單因素方差分析，除S-I-T在非SS干眼組與SS干眼組差異無顯著性外，其它檢查在任何兩組間差異均具顯著性意義。結(jié)果見表1所示。
表1 三組各項檢查結(jié)果 (
±s)
例數(shù)(眼)
S-I-T(mm)
BUT(s)
FLS(分)
RBS(分)
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GN(個/mm2)
正常對照組
45(90)
11.7±4.5
8.8±3.7
0.5±0.8
0.5±0.7
63.0±22.8
非SS干眼組
50(100)
4.3±3.0
4.8±2.8
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2.0±2.4
2.7±1.8
28.2±23.6
SS干眼組
30(60)
2.6±2.0
3.4±2.1
3.6±2.5
4.0±2.4
14.9±14.1
正常對照組CIC分級主要集中于0級和1級，N/C主要為1∶2，少數(shù)為1∶3，上皮細胞大小均勻一致，上皮細胞間散在較多的杯狀細胞；非SS干眼患者CIC分級多集中于1級和2級，N/C主要為1∶3、1∶4、偶見1∶5，杯狀細胞明顯減少，上皮細胞核變長、梭形，蛇樣變偶見，杯狀細胞明顯減少；SS干眼患者CIC分級主要為3級，N/C主要為1∶6或1∶7，明顯角化，核固縮、崩解，幾無杯狀細胞。三組人群CIC分級情況及統(tǒng)計結(jié)果見表2所示。表2 三組CIC分級情況比較 單位：%(眼)
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0級
1級
2級
3級
正常對照
80(72)
20(18)
0
0
非SS干眼
18(18)
38(38)
42(42)
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2(2)
SS干眼
3(2)
27(16)
35(21)
35(21)
注：三組CIC分級經(jīng)χ2檢驗，P<0.01，差異具顯著性。
各項檢查的相關(guān)分析研究發(fā)現(xiàn)：杯狀細胞數(shù)與RBS計分呈負相關(guān)，相關(guān)系數(shù)r=-0.3342,P<0.01，見圖9所示。
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圖9 杯狀細胞數(shù)(GN)與RBS計分的相關(guān)分析
3 討論
文獻報道示杯狀細胞數(shù)隨取材部位的不同而不同，瞼結(jié)膜杯狀細胞數(shù)高于球結(jié)膜的，球結(jié)膜不同部位取材所檢測的杯狀細胞數(shù)亦不同，通過觀察杯狀細胞數(shù)變化可了解眼表粘液層的情況[5]。多位學者研究表明：正常人杯狀細胞數(shù)不隨年齡而改變，35歲后杯狀細胞數(shù)仍較穩(wěn)定，杯狀細胞數(shù)與BUT、S-I-T的值不相關(guān)[5，6]。有學者研究認為N/C與年齡呈負相關(guān)，杯狀細胞數(shù)隨RBS染色計分的增加而減少，杯狀細胞數(shù)降低可引起眼表保護水平的降低[7]。Rives L等[8]研究認為CIC與RBS是診斷SS特異敏感的指標，可以把它們作為SS早期診斷的指標。Alberto等[9]將CIC標準化，認為0.22μm濾紙孔徑，60g壓力印取的細胞數(shù)最多，且能最好保持細胞的形態(tài)。
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我們曾對45例正常人按不同年齡段分組進行CIC的研究顯示：杯狀細胞數(shù)不隨年齡的增加而減少。本研究三組間CIC分級情況觀察可見，正常對照組CIC分級多集中于0級(共占80%)，非SS干眼組CIC分組多集中于1級、2級(共占80%)。SS干眼組CIC分組多集中于2級、3級(共占70%)。三組間CIC分級χ2檢驗，P<0.01，差異具有顯著性。說明可通過CIC分級來區(qū)分正常人群與干眼癥患者，并可了解干眼的程度。三組間杯狀細胞數(shù)均值有顯著性差異，任何兩組之間杯狀細胞數(shù)均值亦有顯著性差異，KCS患者杯狀細胞數(shù)低于正常組，且SS干眼患者杯狀細胞較非SS干眼患者杯狀細胞數(shù)更低，說明SS干眼患者不僅水層減少，粘液層的異常亦明顯，這與臨床患者的癥狀、體征相符。
虎紅著染變性上皮細胞及缺乏粘液層覆蓋的眼表上皮細胞，對探查眼表粘液層完整性有其優(yōu)越性，是檢測眼表保護水平的敏感指標，是早期診斷KCS的敏感方法[10，11]。但最近多位學者相繼報道虎紅對角膜上皮細胞毒性大，可造成眼表面的損害，可加重原有眼表的不適，使其應(yīng)用受到了一定限制[12]。本研究相關(guān)分析顯示：杯狀細胞數(shù)與RBS計分成負相關(guān)，杯狀細胞數(shù)能很好反映粘液層的情況，它可取代虎紅作為檢測眼表保護水平的敏感指標，用于干眼的早期診斷。
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另外，本研究通過CIC觀察N/C情況表明：N/C與年齡呈負相關(guān)，N/C比值隨著年齡的增加而降低，并隨淚功能的降低而降低，與Paschides CA等[7]的研究結(jié)果相符，能在一定程度上幫助干眼的診斷，通過CIC還可觀察炎細胞的情況：正常眼CIC中很少見炎細胞，而在KCS患者CIC中炎細胞常出現(xiàn)，說明干眼的發(fā)病中伴有炎癥，推測可能是干眼患者淚液減少，各種免疫成分減少，防御力降低所致。胡燕華等[13]的研究也表明：干眼癥患者結(jié)膜囊細菌培養(yǎng)陽性率明顯高于正常對照組。這與本研究的推論相符。據(jù)此提示治療干眼癥應(yīng)同時配合適當抗菌眼藥。
總之，CIC這種安全、實用、可重復的檢查，可對KCS的早期診斷及療效評估提供幫助。
4 參考文獻
[1] Xu KP,Yaji Y,Tsubota Y.Decrease in corneal sensitivity and change in tear function in dry eye.Cornea,1996，15(3)∶235～239
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[7] Paschides CA,Petroutsos G,Psila K.Correlation of conjunctival impression cytology results with lacrimal function and age.Acta Ophthalmologica,1991,69∶422～425
[8] Rives L,Rodriguez JJ,Alvarez ML,et al.Correlation between impression cytology and tear function parameters in Sjogen syndrome.Acta Ophthalmologica,1993,71∶353～359
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[9] Martinez AJ,Mills MB,Jaceldo KB,et al.Standardization of conjunctival impression cytology.Cornea,1995,14(5)∶512～522
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[13] 胡燕華，賀樂荷，何玉蘭等.108例干眼癥之結(jié)膜囊細菌菌落.眼科研究，1995,13(3)∶204～206
(收稿：1999-06-24), 百拇醫(yī)藥
單位：北京市眼科研究所(100005)
關(guān)鍵詞：結(jié)膜印跡細胞學(CIC)；杯狀細胞；SS干眼；非SS干眼
眼視光學雜志/990309摘 要 目的：探討結(jié)膜印跡細胞學檢查(CIC)在干眼診斷中的作用。方法：對45人90眼正常組和80人160眼實驗組除采用淚液分泌實驗I(S-I-T)、淚膜破裂時間(BUT)、虎紅染色(RBS)及熒光素染色(FLS)計分等常用眼表淚功能檢查外，重點采用CIC，通過觀察結(jié)膜上皮細胞情況及杯狀細胞數(shù)來了解正常眼、干眼的淚膜粘液層的情況。結(jié)果：印跡細胞學分級及杯狀細胞數(shù)組間均有顯著的差異，正常組分級主要集中于0級；非SS干眼組的分級主要集中于1級和2級；SS干眼組的分級主要集中于2級及3級。杯狀細胞與虎紅色計分呈負相關(guān)。結(jié)論：結(jié)膜印跡細胞學檢查通過分級、觀察杯狀細胞數(shù)變化，了解淚膜粘液層的情況可用于區(qū)分正常人與干眼癥患者并可了解干眼的病程變化。
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A study of conjunctival impression cytology for dry eye
Song Lihong,Jin Xiuying，Sun Xuguang，et al.
Beijing Institute of Ophthalmology,Beijing 100005
Abstract Objective:To evaluate the applicability of Conjunctival Impression Cytology(CIC) to the diagnosis of dry eye.Methods:In addition to the Schirmer Test for Tear Break-Up Time，Rose Bengal Staining and Fluorescein Staining were used.We tested the tear film mucous layer by CIC for a control group and for dry eye patients.Results:CIC grading of the controls revealed 80% of the eyes to be grade 0 and 20% to be grade 1;for the dry eyes,70% were grade 2 and grade 3.This demonstrates a significant differences between the two groups.There is a negative correlation between goblet cell density and RBS results.Conclusion:CIC grading and goblet cell density can be used to assess the mucous layer to distinguish between normal and dry eye patients as well as to track the progression of dry eye.
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Key words Conjunctival Impression Cytology(CIC) Goblet cell Sjogren Syndrome(SS) dry eye Non-SS dry eye
淚膜最內(nèi)層為粘液層，粘液層粘附于角膜微絨毛、微皺壁上，使淚膜能均勻地覆蓋于眼表，并可降低眼表面張力。粘液主要由結(jié)膜杯狀細胞產(chǎn)生，而結(jié)膜杯狀細胞數(shù)目及結(jié)膜表層細胞形態(tài)學改變可通過結(jié)膜印跡細胞學(CIC)來觀察。
1 材料和方法
1.1 研究對象
正常對照組：1997年11月至1998年10月間同仁醫(yī)院驗光中心診斷無眼病的人群共45人(90眼)。年齡36歲至68歲(平均51.6±9.7歲)，男8人、女37人。經(jīng)裂隙燈仔細檢查，排除干眼、瞼緣炎及眼過敏癥，無眼瞼及眼表異常，無角膜接觸鏡配戴史，無影響淚液分泌的全身與局部用藥史，無眼部手術(shù)史，無膠原血管病或其它全身疾病史。
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實驗組：經(jīng)檢查符合角結(jié)膜干燥癥(KCS)診斷標準[1]即納入實驗組，共80人。實驗組又分為非Sjogren綜合征(SS)干眼組與SS干眼組。
SS干眼組：經(jīng)內(nèi)科、口腔科會診，符合Tsubota K等[2]診斷標準納入此組。具體標準如下：a.KCS；b.口腔干燥；c.唇腺活檢廣泛淋巴細胞侵潤；d.實驗室檢查：RF(+)，ANA(+)或抗SS—A抗體(+)/抗SS—B抗體(+)。凡具以上至少3個條件，則診斷為SS。本組患者30人。年齡35歲至73歲(平均50.2±11.6歲)，男3人，女27人。
非SS干眼組：另外無SS診斷指征的50人既被納入非SS干眼組。年齡35歲至70歲(48.6±10.6歲)，男10人、女40人，其中很大一部分患者抗核抗體或和自身抗體陽性。
1.2 常用淚液檢查方法
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1.2.1 淚液分泌試驗I(S-I-T)：室內(nèi)普通光線下，采用標準淚液分泌量測試條(SHOWA YAKUHIN KAKO CO.，LTD)檢測，折線處折起，置于下瞼中外1/3結(jié)膜囊內(nèi)，5分鐘取下從折起處記濕長。
1.2.2 淚膜破裂時間(BUT)：1%熒光素鈉10μl滴入結(jié)膜囊，眨眼數(shù)次后用裂隙燈觀察淚膜，測BUT，連測三次取其平均值。
1.2.3 熒光素染色(FLS)：1%熒光素鈉10μl滴入結(jié)膜囊內(nèi)，眨眼數(shù)次，裂隙燈鈷藍光下觀察角膜上、中、下三部分熒光素著染情況，每部分按0～3計分[3]。0示無著染；1示散在點染；2示中等量斑點染色；3示密集斑點狀染色。
1.2.4 虎紅染色(RBS)：1%虎紅10μl滴入結(jié)膜囊內(nèi)，眨眼數(shù)次，裂隙燈綠光觀察鼻側(cè)球結(jié)膜、角膜、顳側(cè)球結(jié)膜三部分，每部分按0～3計分[3]。0示無著染；1示散在點染；2示中等量斑點染色；3示密集斑點狀染色。
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1.3 CIC檢查
1.3.1 材料
0.2μm孔徑醋酸纖維素濾紙，切剪成6mm直徑大小，浸蒸餾水中3～4小時，以消除濾紙表面活性，取出、晾干、高壓消毒、備用。
1.3.2 方法
①患者平臥于檢查床上，0.5%的卡因點眼2次，開瞼器開瞼。
②濾紙吸去下穹隆部淚液。
③小顳子夾取醋酸纖維濾紙，粗糙面向下置于角膜顳側(cè)水平2mm外的球結(jié)膜上，60g壓力(眼動脈壓力計)，持續(xù)6秒印取表層上皮細胞，將濾紙片置于10%福爾馬林中固定。
④標本PAS染色：略。
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⑤標本脫水后置于載玻片上，自然干燥，采用二甲苯使其透明，置于普通光學顯微鏡下觀察上皮細胞的連接，胞核、胞漿的顏色，核、漿比(N/C)，上皮細胞角化，杯狀細胞數(shù)及炎性細胞的有無，然后進行分級。
1.3.3 分級：據(jù)NELSON’s分級標準進行分級[4]。
0級：結(jié)膜上皮細胞形態(tài)正常，層狀、大小一致，胞漿藍綠色，N/C為1∶2，杯狀細胞密集分布。目鏡10倍、物鏡10倍條件下觀察5個視野分別計杯狀細胞數(shù)，取其均值，則平均1個低倍視野下見12.1個杯狀細胞。見圖1、2所示。
圖1 CIC分級0級(×100)
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圖2 CIC分級0級(×400)
1級：結(jié)膜上皮細胞輕擴大，胞漿藍綠色，N/C為1∶3，無角化，杯狀細胞開始減少，密度下降，平均1個低倍視野下見7.4個杯狀細胞。見圖3、4所示。
圖3 CIC分級1級(×100)
圖4 CIC分級1級(×400)
2級：所有結(jié)膜上皮細胞均擴大，變扁平，胞漿蘭綠或粉紅色，N/C為1∶4～1∶5，輕度角化，杯狀細胞明顯減少，平均1個低倍視野下見2.7個杯狀細胞。見圖5所示。
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圖5 CIC分級2級(×100)
3級：結(jié)膜上皮細胞胞漿內(nèi)出現(xiàn)顆粒狀物，核固縮崩解，上皮細胞胞漿成粉紅色，N/C為1∶6～1∶8，出現(xiàn)不同程度的角化，杯狀細胞完全喪失，視野下不見杯狀細胞。見圖6～8所示。
圖6 CIC分級3級(×400)
圖7 CIC分級3級(×400)
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圖8 CIC分級3級(×100)2 結(jié)果
三組間各項檢查均值經(jīng)SPSS統(tǒng)計軟件包處理，單因素方差分析，除S-I-T在非SS干眼組與SS干眼組差異無顯著性外，其它檢查在任何兩組間差異均具顯著性意義。結(jié)果見表1所示。
表1 三組各項檢查結(jié)果 (
±s)例數(shù)(眼)
S-I-T(mm)
BUT(s)
FLS(分)
RBS(分)
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GN(個/mm2)
正常對照組
45(90)
11.7±4.5
8.8±3.7
0.5±0.8
0.5±0.7
63.0±22.8
非SS干眼組
50(100)
4.3±3.0
4.8±2.8
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2.0±2.4
2.7±1.8
28.2±23.6
SS干眼組
30(60)
2.6±2.0
3.4±2.1
3.6±2.5
4.0±2.4
14.9±14.1
正常對照組CIC分級主要集中于0級和1級，N/C主要為1∶2，少數(shù)為1∶3，上皮細胞大小均勻一致，上皮細胞間散在較多的杯狀細胞；非SS干眼患者CIC分級多集中于1級和2級，N/C主要為1∶3、1∶4、偶見1∶5，杯狀細胞明顯減少，上皮細胞核變長、梭形，蛇樣變偶見，杯狀細胞明顯減少；SS干眼患者CIC分級主要為3級，N/C主要為1∶6或1∶7，明顯角化，核固縮、崩解，幾無杯狀細胞。三組人群CIC分級情況及統(tǒng)計結(jié)果見表2所示。表2 三組CIC分級情況比較 單位：%(眼)
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0級
1級
2級
3級
正常對照
80(72)
20(18)
0
0
非SS干眼
18(18)
38(38)
42(42)
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2(2)
SS干眼
3(2)
27(16)
35(21)
35(21)
注：三組CIC分級經(jīng)χ2檢驗，P<0.01，差異具顯著性。
各項檢查的相關(guān)分析研究發(fā)現(xiàn)：杯狀細胞數(shù)與RBS計分呈負相關(guān)，相關(guān)系數(shù)r=-0.3342,P<0.01，見圖9所示。
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圖9 杯狀細胞數(shù)(GN)與RBS計分的相關(guān)分析
3 討論
文獻報道示杯狀細胞數(shù)隨取材部位的不同而不同，瞼結(jié)膜杯狀細胞數(shù)高于球結(jié)膜的，球結(jié)膜不同部位取材所檢測的杯狀細胞數(shù)亦不同，通過觀察杯狀細胞數(shù)變化可了解眼表粘液層的情況[5]。多位學者研究表明：正常人杯狀細胞數(shù)不隨年齡而改變，35歲后杯狀細胞數(shù)仍較穩(wěn)定，杯狀細胞數(shù)與BUT、S-I-T的值不相關(guān)[5，6]。有學者研究認為N/C與年齡呈負相關(guān)，杯狀細胞數(shù)隨RBS染色計分的增加而減少，杯狀細胞數(shù)降低可引起眼表保護水平的降低[7]。Rives L等[8]研究認為CIC與RBS是診斷SS特異敏感的指標，可以把它們作為SS早期診斷的指標。Alberto等[9]將CIC標準化，認為0.22μm濾紙孔徑，60g壓力印取的細胞數(shù)最多，且能最好保持細胞的形態(tài)。
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我們曾對45例正常人按不同年齡段分組進行CIC的研究顯示：杯狀細胞數(shù)不隨年齡的增加而減少。本研究三組間CIC分級情況觀察可見，正常對照組CIC分級多集中于0級(共占80%)，非SS干眼組CIC分組多集中于1級、2級(共占80%)。SS干眼組CIC分組多集中于2級、3級(共占70%)。三組間CIC分級χ2檢驗，P<0.01，差異具有顯著性。說明可通過CIC分級來區(qū)分正常人群與干眼癥患者，并可了解干眼的程度。三組間杯狀細胞數(shù)均值有顯著性差異，任何兩組之間杯狀細胞數(shù)均值亦有顯著性差異，KCS患者杯狀細胞數(shù)低于正常組，且SS干眼患者杯狀細胞較非SS干眼患者杯狀細胞數(shù)更低，說明SS干眼患者不僅水層減少，粘液層的異常亦明顯，這與臨床患者的癥狀、體征相符。
虎紅著染變性上皮細胞及缺乏粘液層覆蓋的眼表上皮細胞，對探查眼表粘液層完整性有其優(yōu)越性，是檢測眼表保護水平的敏感指標，是早期診斷KCS的敏感方法[10，11]。但最近多位學者相繼報道虎紅對角膜上皮細胞毒性大，可造成眼表面的損害，可加重原有眼表的不適，使其應(yīng)用受到了一定限制[12]。本研究相關(guān)分析顯示：杯狀細胞數(shù)與RBS計分成負相關(guān)，杯狀細胞數(shù)能很好反映粘液層的情況，它可取代虎紅作為檢測眼表保護水平的敏感指標，用于干眼的早期診斷。
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另外，本研究通過CIC觀察N/C情況表明：N/C與年齡呈負相關(guān)，N/C比值隨著年齡的增加而降低，并隨淚功能的降低而降低，與Paschides CA等[7]的研究結(jié)果相符，能在一定程度上幫助干眼的診斷，通過CIC還可觀察炎細胞的情況：正常眼CIC中很少見炎細胞，而在KCS患者CIC中炎細胞常出現(xiàn)，說明干眼的發(fā)病中伴有炎癥，推測可能是干眼患者淚液減少，各種免疫成分減少，防御力降低所致。胡燕華等[13]的研究也表明：干眼癥患者結(jié)膜囊細菌培養(yǎng)陽性率明顯高于正常對照組。這與本研究的推論相符。據(jù)此提示治療干眼癥應(yīng)同時配合適當抗菌眼藥。
總之，CIC這種安全、實用、可重復的檢查，可對KCS的早期診斷及療效評估提供幫助。
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(收稿：1999-06-24), 百拇醫(yī)藥