血清脯肽酶與肝纖維化
作者:胡大榮 楊偉
單位:胡大榮 (中國(guó)人民解放軍北京軍區(qū)總醫(yī)院肝病研究所 北京市 100700); 楊 偉 (中國(guó)人民解放軍89醫(yī)院 山東省濰坊市 261000)
關(guān)鍵詞:肝硬化/診斷;肝炎/診斷;脯肽酶
世界華人消化雜志991239 中國(guó)圖書館分類號(hào) R575.2
Subject headings liver cirrhosis/diagnosis; hepatitis/diagnosis
脯肽酶(PLD)參與膠原蛋白降解,是反映肝纖維化進(jìn)展的良好指標(biāo)[1].血清PLD測(cè)定已被《病毒性肝炎防治方案》推薦為慢性肝病常規(guī)檢測(cè)項(xiàng)目[2].本文在已報(bào)道的基礎(chǔ)上[3],進(jìn)一步評(píng)價(jià)PLD在慢性肝病診斷中的意義.
, http://www.www.srpcoatings.com
1 材料和方法
1.1 材料 昆明小鼠130只,鼠齡8wk~10wk,體質(zhì)量25g~40g.肝纖維化模型采用間斷腹腔注射CCl4建立.采集血液和肝組織標(biāo)本在末次注射CCl4后96h進(jìn)行.根據(jù)注射CCl4周數(shù)(1,3,6,9,12wk)分5組,每組20只.另30只以生理鹽水替代CCl4作正常對(duì)照(對(duì)照組).測(cè)定血清PLD及ALT水平.參照Schvacz標(biāo)準(zhǔn)對(duì)肝纖維化分級(jí)[4].Ⅰ級(jí):無(wú)明顯膠原纖維和成纖維細(xì)胞增生;Ⅱ級(jí):膠原纖維由匯管區(qū)或中央靜脈向外輕度延伸,成纖維細(xì)胞輕度增生;Ⅲ級(jí):為假小葉雛型形成,成纖維細(xì)胞活躍增生;Ⅳ級(jí):典型假小葉形成.Ⅰ~Ⅳ級(jí)分別計(jì)1~4分.根據(jù)分級(jí)計(jì)算各組肝纖維化總積分(Tf)和平均積分(Mf).Mf=Tf/n(n為每組動(dòng)物數(shù)).
1.2 臨床應(yīng)用 輕度慢性肝炎127例,中度慢性肝炎456例,肝硬變241例,分別提供184例、796和639份共1619份血標(biāo)本.164例診斷經(jīng)組織學(xué)證實(shí),其中132例進(jìn)行了纖維染色,評(píng)定其纖維化程度.測(cè)定患者PLD,ALT和部分患者的HA和PCⅢ水平.
, 百拇醫(yī)藥
統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 均數(shù)比較t檢驗(yàn),百分率比較χ2檢驗(yàn),相關(guān)性分析相關(guān)檢驗(yàn).
2 結(jié)果
2.1 動(dòng)物模型 肝硬變的形成分3個(gè)階段,1wk~6wk為膠原纖維增生階段,6wk~9wk為肝硬變雛型形成階段,9wk~12wk為典型肝硬變階段.各時(shí)相點(diǎn)的PLD和ALT及肝纖維化分級(jí)評(píng)定結(jié)果見表1.
表1 血清PLD,ALT水平及肝纖維化分級(jí) (
±s,U/L) 組別
n
PLD(
±s)
, 百拇醫(yī)藥 ALT(
±s)
肝纖維化(級(jí))
Ⅰ
Ⅱ
Ⅲ
Ⅳ
Tf
Mf
對(duì)照組
30
1042.4±287.2
14.2±8.6
, 百拇醫(yī)藥
30
—
—
—
30
1.00
wk1
18
1663.3±296.0a
110.6±59.4b
4
14
—
, 百拇醫(yī)藥
—
32
1.78
wk3
17
2409.9±249.1b
22.9±43.5b
—
2
15
—
49
2.88
, 百拇醫(yī)藥
wk6
17
2305.6±393.5b
132.1±24.0b
—
1
15
1
50
2.94
wk9
17
1452.2±187.4
, 百拇醫(yī)藥
99.4±3.5b
—
—
2
15
66
3.88
wk12
19
1427.1±244.8
115.9±20.1b
—
, http://www.www.srpcoatings.com —
—
19
76
4.00
n為動(dòng)物數(shù),12只中途死亡未列入統(tǒng)計(jì). aP<0.05,bP<0.01,vs對(duì)照組.
PLD變化與Mf呈“剪刀差”改變,6wk前PLD隨Mf增加而升高;6wk后Mf繼續(xù)增加,而PLD逐漸降至正常.ALT在各階段均明顯升高.
2.2 臨床應(yīng)用 患者PLD及ALT測(cè)定結(jié)果見表2.
表2 患者PLD及ALT的同步檢測(cè)結(jié)果 (
±s,%) 組別
, 百拇醫(yī)藥
n
PLD (U/L)
ALT (U/L)
健康人
168
986.9±213.3
1.2
25.4±5.7
0
輕度慢性肝炎
184
1572.5±256.7b
, http://www.www.srpcoatings.com
77.3
112.5±23.7b
85.2
中度慢性肝炎
769
2476.5±310.4b
93.3
150.6±45.3b
96.4
肝炎肝硬變
639
2238.3±413.4b
, 百拇醫(yī)藥
63.4a
30.4±15.8
26.4
aP<0.05,vs ALT異常率;bP<0.01,vs健康人.%為異常率.
各組PLD均顯著升高,中度慢性肝炎和肝硬變組PLD顯著高于輕度慢性肝炎組.肝硬變組PLD異常率明顯高于ALT.
2.3 PLD水平與肝纖維化程度 結(jié)果見表3.
表3 患者PLD水平與肝纖維化程度 (
±s,%) 纖維化(期)
n
, 百拇醫(yī)藥
PLD(U/L)
1
17
1787.9±210.4b
47.5
2
34
2079.5±215.3b
57.8
3
40
2453.4±203.7b
, 百拇醫(yī)藥
92.3
4
41
1024.3±235.8
8.7
bP<0.01,vs 健康人(986.9±213.3). %為異常率.
PLD隨纖維化進(jìn)展而升高,但當(dāng)肝硬變形成時(shí)(4期),PLD降至正常.
2.4 PLD變化與HA和PCⅢ的相關(guān)性分析 結(jié)果見表4.
表4 PLD變化與HA及PCⅢ水平的相關(guān)性分析 組別
n
, 百拇醫(yī)藥
HA(μg/L)
PCⅢ(μg/L)
PLD(U/L)
±s
±s
r1
P
±s
r2
P
健康人
30
, 百拇醫(yī)藥
52.4±20.5
—
—
89.7±23.4
—
—
1917.6±250.3
輕度慢性肝炎
24
210.5±147.6
0.384
>0.05
197.8±87.6
, 百拇醫(yī)藥
0.363
>0.05
1687.3±231.2
中度慢性肝炎
61
287.4±119.6
0.359
<0.01
242.3±101.2
0.432
<0.01
2276.6±340.7
, 百拇醫(yī)藥
肝炎肝硬變
45
547.3±125.8
0.412
<0.01
314.7±88.5
0.441
<0.01
2554.9±403.3
其中32例肝纖維化分級(jí)為3期;r1,r2分別代表HA和PCⅢ與PLD的相關(guān)系數(shù).
患者HA,PCⅢ及PLD均高于健康人(P<0.01),升高幅度均以肝硬變組最高.除輕度慢性肝炎組外,中度慢性肝炎及肝硬變組HA和PCⅢ的變化與PLD的變化均呈顯著正相關(guān).
, 百拇醫(yī)藥
3 討論
開展特異性好、易推廣的肝纖維化生化指標(biāo)一直為臨床所關(guān)注.在與之相關(guān)的報(bào)道中,多集中在反映膠原蛋白合成指標(biāo)的研究,而研究反映降解的生化指標(biāo)甚少.動(dòng)物采血時(shí)間是在末次注射CCl4后96h,約2倍于PLD的血漿T1/2,因此PLD升高并非CCl4肝毒性所致,而與膠原蛋白的合成和降解增加有關(guān).wk1末PLD開始升高,肝內(nèi)出現(xiàn)膠原纖維和成纖維細(xì)胞增生,隨著注射CCl4時(shí)間的延長(zhǎng),膠原纖維和成纖維細(xì)胞增生更趨活躍,PLD升至峰值;9wk后典型肝硬變形成,雖Mf繼續(xù)增加,但PLD卻逐漸降至正常.慢性肝病患者PLD與同期肝纖維化程度比較也獲得了與動(dòng)物實(shí)驗(yàn)類似的結(jié)果,呈4級(jí)改變時(shí),PLD無(wú)明顯變化,表明PLD主要反映肝纖維化的進(jìn)展,并不反映肝纖維化量的多少.血清HA和PCⅢ測(cè)定是目前認(rèn)為反映肝纖維化進(jìn)展的較好指標(biāo)[5].本研究的同步檢測(cè)結(jié)果發(fā)現(xiàn),中度慢性肝炎及肝硬變患者,PLD變化與HA和PCⅢ呈顯著正相關(guān),提示PLD與HA,PCⅢ共同組成肝纖維化譜能更準(zhǔn)確反映肝纖維化的進(jìn)展.
, 百拇醫(yī)藥
通訊作者 胡大榮
參考文獻(xiàn)
1 Brosset B,Myara I,F(xiàn)abre M.Plasma prolidase and prolinase activity in alcoholic liver disease.Clin Chim Acta,1988;175:291-296
2 中華醫(yī)學(xué)會(huì).病毒性肝炎防治方案.中華內(nèi)科雜志,1995;34:788-791
3 胡大榮,李夢(mèng)東,陳國(guó)致.血漿脯肽酶活性測(cè)定及其初步應(yīng)用.中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志,1992;15:270-273
4 Schvacz R,Glaumann H,Weiland O.Survival and histological resolution of fibrosis in patients with autoimmune chronic active hepatitis.J Hepatol,1993;18:15-23
5 王寶恩.肝纖維化的診斷與嚴(yán)重度評(píng)估.中華肝臟病雜志,1998;6:193-194
收稿日期 1999-07-11 修回日期 1999-11-08, http://www.www.srpcoatings.com
單位:胡大榮 (中國(guó)人民解放軍北京軍區(qū)總醫(yī)院肝病研究所 北京市 100700); 楊 偉 (中國(guó)人民解放軍89醫(yī)院 山東省濰坊市 261000)
關(guān)鍵詞:肝硬化/診斷;肝炎/診斷;脯肽酶
世界華人消化雜志991239 中國(guó)圖書館分類號(hào) R575.2
Subject headings liver cirrhosis/diagnosis; hepatitis/diagnosis
脯肽酶(PLD)參與膠原蛋白降解,是反映肝纖維化進(jìn)展的良好指標(biāo)[1].血清PLD測(cè)定已被《病毒性肝炎防治方案》推薦為慢性肝病常規(guī)檢測(cè)項(xiàng)目[2].本文在已報(bào)道的基礎(chǔ)上[3],進(jìn)一步評(píng)價(jià)PLD在慢性肝病診斷中的意義.
, http://www.www.srpcoatings.com
1 材料和方法
1.1 材料 昆明小鼠130只,鼠齡8wk~10wk,體質(zhì)量25g~40g.肝纖維化模型采用間斷腹腔注射CCl4建立.采集血液和肝組織標(biāo)本在末次注射CCl4后96h進(jìn)行.根據(jù)注射CCl4周數(shù)(1,3,6,9,12wk)分5組,每組20只.另30只以生理鹽水替代CCl4作正常對(duì)照(對(duì)照組).測(cè)定血清PLD及ALT水平.參照Schvacz標(biāo)準(zhǔn)對(duì)肝纖維化分級(jí)[4].Ⅰ級(jí):無(wú)明顯膠原纖維和成纖維細(xì)胞增生;Ⅱ級(jí):膠原纖維由匯管區(qū)或中央靜脈向外輕度延伸,成纖維細(xì)胞輕度增生;Ⅲ級(jí):為假小葉雛型形成,成纖維細(xì)胞活躍增生;Ⅳ級(jí):典型假小葉形成.Ⅰ~Ⅳ級(jí)分別計(jì)1~4分.根據(jù)分級(jí)計(jì)算各組肝纖維化總積分(Tf)和平均積分(Mf).Mf=Tf/n(n為每組動(dòng)物數(shù)).
1.2 臨床應(yīng)用 輕度慢性肝炎127例,中度慢性肝炎456例,肝硬變241例,分別提供184例、796和639份共1619份血標(biāo)本.164例診斷經(jīng)組織學(xué)證實(shí),其中132例進(jìn)行了纖維染色,評(píng)定其纖維化程度.測(cè)定患者PLD,ALT和部分患者的HA和PCⅢ水平.
, 百拇醫(yī)藥
統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 均數(shù)比較t檢驗(yàn),百分率比較χ2檢驗(yàn),相關(guān)性分析相關(guān)檢驗(yàn).
2 結(jié)果
2.1 動(dòng)物模型 肝硬變的形成分3個(gè)階段,1wk~6wk為膠原纖維增生階段,6wk~9wk為肝硬變雛型形成階段,9wk~12wk為典型肝硬變階段.各時(shí)相點(diǎn)的PLD和ALT及肝纖維化分級(jí)評(píng)定結(jié)果見表1.
表1 血清PLD,ALT水平及肝纖維化分級(jí) (
n
PLD(
, 百拇醫(yī)藥 ALT(
肝纖維化(級(jí))
Ⅰ
Ⅱ
Ⅲ
Ⅳ
Tf
Mf
對(duì)照組
30
1042.4±287.2
14.2±8.6
, 百拇醫(yī)藥
30
—
—
—
30
1.00
wk1
18
1663.3±296.0a
110.6±59.4b
4
14
—
, 百拇醫(yī)藥
—
32
1.78
wk3
17
2409.9±249.1b
22.9±43.5b
—
2
15
—
49
2.88
, 百拇醫(yī)藥
wk6
17
2305.6±393.5b
132.1±24.0b
—
1
15
1
50
2.94
wk9
17
1452.2±187.4
, 百拇醫(yī)藥
99.4±3.5b
—
—
2
15
66
3.88
wk12
19
1427.1±244.8
115.9±20.1b
—
, http://www.www.srpcoatings.com —
—
19
76
4.00
n為動(dòng)物數(shù),12只中途死亡未列入統(tǒng)計(jì). aP<0.05,bP<0.01,vs對(duì)照組.
PLD變化與Mf呈“剪刀差”改變,6wk前PLD隨Mf增加而升高;6wk后Mf繼續(xù)增加,而PLD逐漸降至正常.ALT在各階段均明顯升高.
2.2 臨床應(yīng)用 患者PLD及ALT測(cè)定結(jié)果見表2.
表2 患者PLD及ALT的同步檢測(cè)結(jié)果 (
, 百拇醫(yī)藥
n
PLD (U/L)
ALT (U/L)
健康人
168
986.9±213.3
1.2
25.4±5.7
0
輕度慢性肝炎
184
1572.5±256.7b
, http://www.www.srpcoatings.com
77.3
112.5±23.7b
85.2
中度慢性肝炎
769
2476.5±310.4b
93.3
150.6±45.3b
96.4
肝炎肝硬變
639
2238.3±413.4b
, 百拇醫(yī)藥
63.4a
30.4±15.8
26.4
aP<0.05,vs ALT異常率;bP<0.01,vs健康人.%為異常率.
各組PLD均顯著升高,中度慢性肝炎和肝硬變組PLD顯著高于輕度慢性肝炎組.肝硬變組PLD異常率明顯高于ALT.
2.3 PLD水平與肝纖維化程度 結(jié)果見表3.
表3 患者PLD水平與肝纖維化程度 (
n
, 百拇醫(yī)藥
PLD(U/L)
1
17
1787.9±210.4b
47.5
2
34
2079.5±215.3b
57.8
3
40
2453.4±203.7b
, 百拇醫(yī)藥
92.3
4
41
1024.3±235.8
8.7
bP<0.01,vs 健康人(986.9±213.3). %為異常率.
PLD隨纖維化進(jìn)展而升高,但當(dāng)肝硬變形成時(shí)(4期),PLD降至正常.
2.4 PLD變化與HA和PCⅢ的相關(guān)性分析 結(jié)果見表4.
表4 PLD變化與HA及PCⅢ水平的相關(guān)性分析 組別
n
, 百拇醫(yī)藥
HA(μg/L)
PCⅢ(μg/L)
PLD(U/L)
r1
P
r2
P
健康人
30
, 百拇醫(yī)藥
52.4±20.5
—
—
89.7±23.4
—
—
1917.6±250.3
輕度慢性肝炎
24
210.5±147.6
0.384
>0.05
197.8±87.6
, 百拇醫(yī)藥
0.363
>0.05
1687.3±231.2
中度慢性肝炎
61
287.4±119.6
0.359
<0.01
242.3±101.2
0.432
<0.01
2276.6±340.7
, 百拇醫(yī)藥
肝炎肝硬變
45
547.3±125.8
0.412
<0.01
314.7±88.5
0.441
<0.01
2554.9±403.3
其中32例肝纖維化分級(jí)為3期;r1,r2分別代表HA和PCⅢ與PLD的相關(guān)系數(shù).
患者HA,PCⅢ及PLD均高于健康人(P<0.01),升高幅度均以肝硬變組最高.除輕度慢性肝炎組外,中度慢性肝炎及肝硬變組HA和PCⅢ的變化與PLD的變化均呈顯著正相關(guān).
, 百拇醫(yī)藥
3 討論
開展特異性好、易推廣的肝纖維化生化指標(biāo)一直為臨床所關(guān)注.在與之相關(guān)的報(bào)道中,多集中在反映膠原蛋白合成指標(biāo)的研究,而研究反映降解的生化指標(biāo)甚少.動(dòng)物采血時(shí)間是在末次注射CCl4后96h,約2倍于PLD的血漿T1/2,因此PLD升高并非CCl4肝毒性所致,而與膠原蛋白的合成和降解增加有關(guān).wk1末PLD開始升高,肝內(nèi)出現(xiàn)膠原纖維和成纖維細(xì)胞增生,隨著注射CCl4時(shí)間的延長(zhǎng),膠原纖維和成纖維細(xì)胞增生更趨活躍,PLD升至峰值;9wk后典型肝硬變形成,雖Mf繼續(xù)增加,但PLD卻逐漸降至正常.慢性肝病患者PLD與同期肝纖維化程度比較也獲得了與動(dòng)物實(shí)驗(yàn)類似的結(jié)果,呈4級(jí)改變時(shí),PLD無(wú)明顯變化,表明PLD主要反映肝纖維化的進(jìn)展,并不反映肝纖維化量的多少.血清HA和PCⅢ測(cè)定是目前認(rèn)為反映肝纖維化進(jìn)展的較好指標(biāo)[5].本研究的同步檢測(cè)結(jié)果發(fā)現(xiàn),中度慢性肝炎及肝硬變患者,PLD變化與HA和PCⅢ呈顯著正相關(guān),提示PLD與HA,PCⅢ共同組成肝纖維化譜能更準(zhǔn)確反映肝纖維化的進(jìn)展.
, 百拇醫(yī)藥
通訊作者 胡大榮
參考文獻(xiàn)
1 Brosset B,Myara I,F(xiàn)abre M.Plasma prolidase and prolinase activity in alcoholic liver disease.Clin Chim Acta,1988;175:291-296
2 中華醫(yī)學(xué)會(huì).病毒性肝炎防治方案.中華內(nèi)科雜志,1995;34:788-791
3 胡大榮,李夢(mèng)東,陳國(guó)致.血漿脯肽酶活性測(cè)定及其初步應(yīng)用.中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志,1992;15:270-273
4 Schvacz R,Glaumann H,Weiland O.Survival and histological resolution of fibrosis in patients with autoimmune chronic active hepatitis.J Hepatol,1993;18:15-23
5 王寶恩.肝纖維化的診斷與嚴(yán)重度評(píng)估.中華肝臟病雜志,1998;6:193-194
收稿日期 1999-07-11 修回日期 1999-11-08, http://www.www.srpcoatings.com