注射用硝普鈉中細菌內(nèi)毒素的檢查
作者:王志斌 邵燕 周建平
單位:王志斌 邵燕 周建平(北京市藥品檢驗所 100035)
關(guān)鍵詞:
藥物分析雜志000124 鱟試劑用于細菌內(nèi)毒素的檢測,具有操作簡單、靈敏度高、重現(xiàn)性好、實用性強等優(yōu)點[1,2]。為了擴大應(yīng)用品種,我們對注射用硝普鈉進行了細菌內(nèi)毒素檢測的研究,以取代中國藥典1995年版[3]規(guī)定的熱原檢查。
1 實驗材料
鱟試劑:靈敏度為0.5 EU.mL-1,批號980416;0.125 EU.mL-1,批號980429(廣東湛江海洋生物制品廠);靈敏度為0.125 EU.mL-1,批號980604(廈門鱟試劑廠)。
, 百拇醫(yī)藥
細菌內(nèi)毒素工作標(biāo)準(zhǔn)品:批號9801,9605,每支60 EU(中國藥品生物制品檢定所)。
注射用硝普鈉:每支50 mg,批號960121,960206,960312(北京制藥工業(yè)研究所試驗藥廠)。
電熱恒溫水浴箱(湖北省黃石市醫(yī)療器械廠),H-1微型混合器(上海滬西儀器廠),實驗用玻璃儀器均250 ℃干烤1 h。
2 方法與結(jié)果
2.1 鱟試劑靈敏度的復(fù)核 參照中國藥典1995年版操作,結(jié)果與標(biāo)示靈敏度(λ)相符,結(jié)見表1。
表1 3種鱟試劑靈敏度復(fù)核結(jié)果 鱟試劑
批號
標(biāo)示λ
, 百拇醫(yī)藥
/EU.mL-1
細菌內(nèi)毒素濃度/EU.mL-1
0.5
0.25
0.125
0.06
0.03
陰性對照
實測值
980429
0.125
, 百拇醫(yī)藥 ++++
++++------------
0.125
980416
0.25
++++
++++------------
0.25
980604
0.125
++++
++++------------
, 百拇醫(yī)藥
0.125
2.2 注射用硝普鈉的內(nèi)毒素限值(L):根據(jù)藥品內(nèi)毒素限值的計算方法:L=K.M-1,K=5.0 EU.kg-1,注射用硝普鈉熱原檢查劑量M為1 mg.kg-1,確定其內(nèi)毒素限值為5 EU.mg-1。
2.3 供試品干擾實驗 分別取注射用硝普鈉(每支50 mg)1支,用注射用水將樣品復(fù)溶后稀釋為0.2,0.1 mg.mL-1,分別取注射用硝普鈉樣品稀釋液(0.1,0.2 mg.mL-1)將細菌內(nèi)毒素工作標(biāo)準(zhǔn)品分別制成濃度為2.0λ,1.0λ,0.5λ,0.25λ 4個濃度,每一濃度平行做4管,依法檢查。結(jié)果:用不同批號的注射用硝普鈉樣品稀釋液和用注射用水稀釋的2.0λ,1.0λ均為陽性,0.5λ,0.25λ均為陰性。表明不同批號的注射用硝普鈉,在0.1,0.2 mg.mL-1濃度下,對不同批號、不同靈敏度鱟試劑實驗無干擾,結(jié)果見表2。表2 注射用硝普鈉對鱟試劑的干擾試驗結(jié)果 樣品
, http://www.www.srpcoatings.com
批號
鱟試劑
批 號
細菌內(nèi)毒素濃度/EU.mL-1
0.5
0.25
0.125
0.06
0.03
陰性對照
實測值
水+內(nèi)毒素
, http://www.www.srpcoatings.com
980416
++++
++++------------
0.25
960121
980416
++++
++++------------
0.25
960206
980416
++++
, 百拇醫(yī)藥
++++------------
0.25
960121*
980416
++++
++++--------
0.25
水+內(nèi)毒素
980429
++++
++++------------
0.125
, http://www.www.srpcoatings.com
960121
980429
++++
++++------------
0.125
960312
980429
++++
++++------------
0.125
水+內(nèi)毒素
980604
, http://www.www.srpcoatings.com
++++
++++------------
0.125
960206
980604
++++
++++------------
0.125
注:* 表示該組樣品濃度為0.2 mg.mL-1,其它組均為0.1 mg.mL-1;水+內(nèi)毒素組以水為陰性對照,其它組均以樣品為陰性對照
3 討論
, 百拇醫(yī)藥
3.1 干擾試驗結(jié)果表明,3個批號的注射用硝普鈉被稀釋成0.1 mg.mL-1時,對2家3批鱟試劑無干擾作用。所以本品可用細菌內(nèi)毒素檢查法檢查熱原。
3.2 根據(jù)本品熱原檢查的家兔劑量(M=1 mg.kg-1)和我國細菌內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)品的致熱閾值(K=5 EU.kg-1),計算出本品細菌內(nèi)毒素的理論限值L<5 EU.mg-1。計算安全系數(shù)為5.6,所以本檢查所得出的結(jié)論,可以保證臨床用藥安全!
參考文獻:
[1]吳招娣,黎易,李愛芬.用鱟試劑法檢測復(fù)方氨基酸注射液熱原的考察.藥物分析雜志,1995,15(4):44
[2]梁希月,李仁秋.注射用頭孢噻肟鈉細菌內(nèi)毒素檢測方法的研究.藥物分析雜志,1997,17(5):325
[3]中國藥典.1995.二部:872
收稿日期:1999-02-23, 百拇醫(yī)藥
單位:王志斌 邵燕 周建平(北京市藥品檢驗所 100035)
關(guān)鍵詞:
藥物分析雜志000124 鱟試劑用于細菌內(nèi)毒素的檢測,具有操作簡單、靈敏度高、重現(xiàn)性好、實用性強等優(yōu)點[1,2]。為了擴大應(yīng)用品種,我們對注射用硝普鈉進行了細菌內(nèi)毒素檢測的研究,以取代中國藥典1995年版[3]規(guī)定的熱原檢查。
1 實驗材料
鱟試劑:靈敏度為0.5 EU.mL-1,批號980416;0.125 EU.mL-1,批號980429(廣東湛江海洋生物制品廠);靈敏度為0.125 EU.mL-1,批號980604(廈門鱟試劑廠)。
, 百拇醫(yī)藥
細菌內(nèi)毒素工作標(biāo)準(zhǔn)品:批號9801,9605,每支60 EU(中國藥品生物制品檢定所)。
注射用硝普鈉:每支50 mg,批號960121,960206,960312(北京制藥工業(yè)研究所試驗藥廠)。
電熱恒溫水浴箱(湖北省黃石市醫(yī)療器械廠),H-1微型混合器(上海滬西儀器廠),實驗用玻璃儀器均250 ℃干烤1 h。
2 方法與結(jié)果
2.1 鱟試劑靈敏度的復(fù)核 參照中國藥典1995年版操作,結(jié)果與標(biāo)示靈敏度(λ)相符,結(jié)見表1。
表1 3種鱟試劑靈敏度復(fù)核結(jié)果 鱟試劑
批號
標(biāo)示λ
, 百拇醫(yī)藥
/EU.mL-1
細菌內(nèi)毒素濃度/EU.mL-1
0.5
0.25
0.125
0.06
0.03
陰性對照
實測值
980429
0.125
, 百拇醫(yī)藥 ++++
++++------------
0.125
980416
0.25
++++
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0.25
980604
0.125
++++
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, 百拇醫(yī)藥
0.125
2.2 注射用硝普鈉的內(nèi)毒素限值(L):根據(jù)藥品內(nèi)毒素限值的計算方法:L=K.M-1,K=5.0 EU.kg-1,注射用硝普鈉熱原檢查劑量M為1 mg.kg-1,確定其內(nèi)毒素限值為5 EU.mg-1。
2.3 供試品干擾實驗 分別取注射用硝普鈉(每支50 mg)1支,用注射用水將樣品復(fù)溶后稀釋為0.2,0.1 mg.mL-1,分別取注射用硝普鈉樣品稀釋液(0.1,0.2 mg.mL-1)將細菌內(nèi)毒素工作標(biāo)準(zhǔn)品分別制成濃度為2.0λ,1.0λ,0.5λ,0.25λ 4個濃度,每一濃度平行做4管,依法檢查。結(jié)果:用不同批號的注射用硝普鈉樣品稀釋液和用注射用水稀釋的2.0λ,1.0λ均為陽性,0.5λ,0.25λ均為陰性。表明不同批號的注射用硝普鈉,在0.1,0.2 mg.mL-1濃度下,對不同批號、不同靈敏度鱟試劑實驗無干擾,結(jié)果見表2。表2 注射用硝普鈉對鱟試劑的干擾試驗結(jié)果 樣品
, http://www.www.srpcoatings.com
批號
鱟試劑
批 號
細菌內(nèi)毒素濃度/EU.mL-1
0.5
0.25
0.125
0.06
0.03
陰性對照
實測值
水+內(nèi)毒素
, http://www.www.srpcoatings.com
980416
++++
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0.25
960121
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960206
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960121*
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水+內(nèi)毒素
980429
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, http://www.www.srpcoatings.com
960121
980429
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水+內(nèi)毒素
980604
, http://www.www.srpcoatings.com
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960206
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注:* 表示該組樣品濃度為0.2 mg.mL-1,其它組均為0.1 mg.mL-1;水+內(nèi)毒素組以水為陰性對照,其它組均以樣品為陰性對照
3 討論
, 百拇醫(yī)藥
3.1 干擾試驗結(jié)果表明,3個批號的注射用硝普鈉被稀釋成0.1 mg.mL-1時,對2家3批鱟試劑無干擾作用。所以本品可用細菌內(nèi)毒素檢查法檢查熱原。
3.2 根據(jù)本品熱原檢查的家兔劑量(M=1 mg.kg-1)和我國細菌內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)品的致熱閾值(K=5 EU.kg-1),計算出本品細菌內(nèi)毒素的理論限值L<5 EU.mg-1。計算安全系數(shù)為5.6,所以本檢查所得出的結(jié)論,可以保證臨床用藥安全!
參考文獻:
[1]吳招娣,黎易,李愛芬.用鱟試劑法檢測復(fù)方氨基酸注射液熱原的考察.藥物分析雜志,1995,15(4):44
[2]梁希月,李仁秋.注射用頭孢噻肟鈉細菌內(nèi)毒素檢測方法的研究.藥物分析雜志,1997,17(5):325
[3]中國藥典.1995.二部:872
收稿日期:1999-02-23, 百拇醫(yī)藥