葡甲胺對(duì)順鉑所致腎損害的預(yù)防作用
作者：陳新志 盧永科 洪新 葉建新 關(guān)英杰 仲來(lái)福
單位：大連醫(yī)科大學(xué)毒理研究室，大連 116027
關(guān)鍵詞：
衛(wèi)生毒理學(xué)雜志000432 葡甲胺(NMG)是醫(yī)藥工業(yè)中常見(jiàn)的助溶劑。國(guó)內(nèi)外尚無(wú)NMG作為解毒劑的文獻(xiàn)報(bào)道。順式二氯二氨鉑(順鉑，CP)，是臨床應(yīng)用最廣泛的一種化療藥物，其療效顯著。但CP的毒副作用較多。其中腎損害是限制其使用劑量從而影響療效的主要毒副作用。在預(yù)試驗(yàn)中偶然發(fā)現(xiàn)，NMG明顯抑制CP染毒大鼠血尿素氮(BUN)升高。我們通過(guò)大鼠在體試驗(yàn)觀察NMG對(duì)CP所致腎損害的影響，初步探討其可能預(yù)防機(jī)制。
1 材料與方法
1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 雌性Wistar大鼠30只，體重180～220g，由本校實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。
, 百拇醫(yī)藥
1.2 實(shí)驗(yàn)試劑 NMG為美國(guó)Sigma公司產(chǎn)品。CP純度>96%，為云南貴重金屬研究所提供。
1.3 實(shí)驗(yàn)方法 將30只大鼠隨機(jī)分為3組，每組10只。設(shè)生理鹽水(NS)組、CP組、NMG組。試驗(yàn)前NMG用蒸餾水溶解并用1 mol/L鹽酸調(diào)至中性，以2.5g/kg體重灌胃(ig)。1h后CP組與NMG組腹腔注射(ip)CP，劑量為5mg/kg體重，NS組ip等量NS。收集染毒后60～72、108～120h尿液。染毒后第3、5天稱重，每組分別處死5只，留取血液及腎臟。稱腎重取腎皮質(zhì)，一部分以0.15mol/L氯化鉀溶液制備成質(zhì)量濃度為10%的勻漿，一部分置70 ℃恒溫烤箱中干燥12h測(cè)皮質(zhì)鉑。
1.4 觀察指標(biāo)及測(cè)定方法 (1)腎臟系數(shù)：以腎重/100g體重表示；(2) BUN含量：二乙酰一肟法；(3) 尿蛋白含量：lowry's法測(cè)定，同時(shí)用苦味酸法測(cè)尿肌酐(Cr)，用mg/mgCr表示；(4)丙二醛(MDA)含量：硫代巴比妥酸法。(5) 腎皮質(zhì)鉑含量、尿鉑排出量：熱解涂層石墨管原子吸收分光光度法，腎皮質(zhì)鉑用μg/g干重腎皮質(zhì)表示，尿鉑排出量用mg/g Cr表示。
, 百拇醫(yī)藥
1.5 統(tǒng)計(jì)處理 用SPSS軟件進(jìn)行t檢驗(yàn)。
2 結(jié)果與討論
2.1 單獨(dú)CP染毒對(duì)大鼠的影響 一次ip 5mg/kg體重CP可引起大鼠嚴(yán)重腎損害，表現(xiàn)為染毒后3、5d腎臟系數(shù)升高，與對(duì)照組比較，差異非常顯著(P<0.01)；染毒后3.5d BUN含量、尿蛋白含量、腎皮質(zhì)勻漿MDA水平均升高，與對(duì)照組之間差異有顯著性或非常顯著性(P<0.05或0.01)；染毒后3、5d腎皮質(zhì)有鉑含量，有一定尿鉑排出量，且第5天尿鉑排出量高于第3天。結(jié)果見(jiàn)表1。
2.2 NMG預(yù)處理后對(duì)CP染毒大鼠的影響 染毒后3、5d腎臟臟器系數(shù)下降，顯著或非常顯著地低于CP組(P<0.05或0.01)；BUN含量均非常顯著地低于CP組(P<0.01)；尿蛋白含量均低于CP組(P<0.05)；染毒后3dMDA水平非常顯著地低于CP組(P<0.01)，染毒后5d MDA水平顯著低于CP組(P<0.05)；腎皮質(zhì)鉑含量于染毒后3、5d均非常顯著地低于CP組(P<0.01)；染毒后3d尿鉑排出量高于CP組，5d則低于CP組，差異均有顯著性(P<0.05)。結(jié)果見(jiàn)表1。
, 百拇醫(yī)藥
表1 NMG對(duì)CP所致大鼠BUN、尿蛋白、MDA、腎皮質(zhì)鉑、尿鉑排出量的影響(
+s) 組 別
BUN(mg/100ml)
尿蛋白(mg/mgCr)
MDA(nmol/g濕重)
腎皮質(zhì)鉑(μg/g干重)
尿鉑排出量(mg/gCr)
3d
5d
3d
5d
, 百拇醫(yī)藥
3d
5d
3d
5d
60～72h
108～120h
NS組
19.9±3.4
22.1±2.9
0.53±0.02
0.55±0.01
62.6±2.7
54.6±4.3
, 百拇醫(yī)藥
——
——
——
——
CP組
53.2±22.3＃＃
90.9±61.6＃＃
0.79±0.02＃
0.82±0.02＃
96.3±7.8＃＃
76.1±8.9＃＃
, 百拇醫(yī)藥
33.9±4.7
48.1±7.5
0.19±0.08
0.31±0.09
NMG組
26.2±7.6
20.8±4.0
0.54±0.02
0.60±0.02
68.5±5.4
, http://www.www.srpcoatings.com 64.3±5.2
24.8±3.6
28.1±8.0
0.39±0.17
0.21±0.06
與NS組比較，＃＃P<0.01；與CP組比較，*P<0.05，**P<0.01；腎臟系數(shù)未列出；n=5；劑量：CP組為5 mg/kg CP,NMG組為2.5 g/kg NMG+5 mg/kg CP NMG預(yù)處理可明顯抑制CP所致大鼠腎臟臟器系數(shù)升高，降低BUN、尿蛋白、MDA含量的升高，提示NMG預(yù)處理能明顯預(yù)防CP所致腎損傷。同時(shí)因顯著增加染毒大鼠尿鉑排出量，降低腎皮質(zhì)鉑蓄積，推測(cè)其可能機(jī)制是NMG預(yù)處理促進(jìn)染毒大鼠尿鉑排出，降低腎皮質(zhì)鉑含量。NMG對(duì)脂質(zhì)過(guò)氧化產(chǎn)物MDA含量的降低是抑制脂質(zhì)過(guò)氧化形成抑或降低腎皮質(zhì)鉑蓄積而減輕脂質(zhì)過(guò)氧化形成，尚有待進(jìn)一步研究。
綜上，NMG能明顯預(yù)防CP所致腎損傷，且作為藥用輔料，安全無(wú)毒，可望應(yīng)用于臨床。
(收稿日期：2000-01-28), 百拇醫(yī)藥
單位：大連醫(yī)科大學(xué)毒理研究室，大連 116027
關(guān)鍵詞：
衛(wèi)生毒理學(xué)雜志000432 葡甲胺(NMG)是醫(yī)藥工業(yè)中常見(jiàn)的助溶劑。國(guó)內(nèi)外尚無(wú)NMG作為解毒劑的文獻(xiàn)報(bào)道。順式二氯二氨鉑(順鉑，CP)，是臨床應(yīng)用最廣泛的一種化療藥物，其療效顯著。但CP的毒副作用較多。其中腎損害是限制其使用劑量從而影響療效的主要毒副作用。在預(yù)試驗(yàn)中偶然發(fā)現(xiàn)，NMG明顯抑制CP染毒大鼠血尿素氮(BUN)升高。我們通過(guò)大鼠在體試驗(yàn)觀察NMG對(duì)CP所致腎損害的影響，初步探討其可能預(yù)防機(jī)制。
1 材料與方法
1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 雌性Wistar大鼠30只，體重180～220g，由本校實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。
, 百拇醫(yī)藥
1.2 實(shí)驗(yàn)試劑 NMG為美國(guó)Sigma公司產(chǎn)品。CP純度>96%，為云南貴重金屬研究所提供。
1.3 實(shí)驗(yàn)方法 將30只大鼠隨機(jī)分為3組，每組10只。設(shè)生理鹽水(NS)組、CP組、NMG組。試驗(yàn)前NMG用蒸餾水溶解并用1 mol/L鹽酸調(diào)至中性，以2.5g/kg體重灌胃(ig)。1h后CP組與NMG組腹腔注射(ip)CP，劑量為5mg/kg體重，NS組ip等量NS。收集染毒后60～72、108～120h尿液。染毒后第3、5天稱重，每組分別處死5只，留取血液及腎臟。稱腎重取腎皮質(zhì)，一部分以0.15mol/L氯化鉀溶液制備成質(zhì)量濃度為10%的勻漿，一部分置70 ℃恒溫烤箱中干燥12h測(cè)皮質(zhì)鉑。
1.4 觀察指標(biāo)及測(cè)定方法 (1)腎臟系數(shù)：以腎重/100g體重表示；(2) BUN含量：二乙酰一肟法；(3) 尿蛋白含量：lowry's法測(cè)定，同時(shí)用苦味酸法測(cè)尿肌酐(Cr)，用mg/mgCr表示；(4)丙二醛(MDA)含量：硫代巴比妥酸法。(5) 腎皮質(zhì)鉑含量、尿鉑排出量：熱解涂層石墨管原子吸收分光光度法，腎皮質(zhì)鉑用μg/g干重腎皮質(zhì)表示，尿鉑排出量用mg/g Cr表示。
, 百拇醫(yī)藥
1.5 統(tǒng)計(jì)處理 用SPSS軟件進(jìn)行t檢驗(yàn)。
2 結(jié)果與討論
2.1 單獨(dú)CP染毒對(duì)大鼠的影響 一次ip 5mg/kg體重CP可引起大鼠嚴(yán)重腎損害，表現(xiàn)為染毒后3、5d腎臟系數(shù)升高，與對(duì)照組比較，差異非常顯著(P<0.01)；染毒后3.5d BUN含量、尿蛋白含量、腎皮質(zhì)勻漿MDA水平均升高，與對(duì)照組之間差異有顯著性或非常顯著性(P<0.05或0.01)；染毒后3、5d腎皮質(zhì)有鉑含量，有一定尿鉑排出量，且第5天尿鉑排出量高于第3天。結(jié)果見(jiàn)表1。
2.2 NMG預(yù)處理后對(duì)CP染毒大鼠的影響 染毒后3、5d腎臟臟器系數(shù)下降，顯著或非常顯著地低于CP組(P<0.05或0.01)；BUN含量均非常顯著地低于CP組(P<0.01)；尿蛋白含量均低于CP組(P<0.05)；染毒后3dMDA水平非常顯著地低于CP組(P<0.01)，染毒后5d MDA水平顯著低于CP組(P<0.05)；腎皮質(zhì)鉑含量于染毒后3、5d均非常顯著地低于CP組(P<0.01)；染毒后3d尿鉑排出量高于CP組，5d則低于CP組，差異均有顯著性(P<0.05)。結(jié)果見(jiàn)表1。
, 百拇醫(yī)藥
表1 NMG對(duì)CP所致大鼠BUN、尿蛋白、MDA、腎皮質(zhì)鉑、尿鉑排出量的影響(
+s) 組 別BUN(mg/100ml)
尿蛋白(mg/mgCr)
MDA(nmol/g濕重)
腎皮質(zhì)鉑(μg/g干重)
尿鉑排出量(mg/gCr)
3d
5d
3d
5d
, 百拇醫(yī)藥
3d
5d
3d
5d
60～72h
108～120h
NS組
19.9±3.4
22.1±2.9
0.53±0.02
0.55±0.01
62.6±2.7
54.6±4.3
, 百拇醫(yī)藥
——
——
——
——
CP組
53.2±22.3＃＃
90.9±61.6＃＃
0.79±0.02＃
0.82±0.02＃
96.3±7.8＃＃
76.1±8.9＃＃
, 百拇醫(yī)藥
33.9±4.7
48.1±7.5
0.19±0.08
0.31±0.09
NMG組
26.2±7.6
20.8±4.0
0.54±0.02
0.60±0.02
68.5±5.4
, http://www.www.srpcoatings.com 64.3±5.2
24.8±3.6
28.1±8.0
0.39±0.17
0.21±0.06
與NS組比較，＃＃P<0.01；與CP組比較，*P<0.05，**P<0.01；腎臟系數(shù)未列出；n=5；劑量：CP組為5 mg/kg CP,NMG組為2.5 g/kg NMG+5 mg/kg CP NMG預(yù)處理可明顯抑制CP所致大鼠腎臟臟器系數(shù)升高，降低BUN、尿蛋白、MDA含量的升高，提示NMG預(yù)處理能明顯預(yù)防CP所致腎損傷。同時(shí)因顯著增加染毒大鼠尿鉑排出量，降低腎皮質(zhì)鉑蓄積，推測(cè)其可能機(jī)制是NMG預(yù)處理促進(jìn)染毒大鼠尿鉑排出，降低腎皮質(zhì)鉑含量。NMG對(duì)脂質(zhì)過(guò)氧化產(chǎn)物MDA含量的降低是抑制脂質(zhì)過(guò)氧化形成抑或降低腎皮質(zhì)鉑蓄積而減輕脂質(zhì)過(guò)氧化形成，尚有待進(jìn)一步研究。
綜上，NMG能明顯預(yù)防CP所致腎損傷，且作為藥用輔料，安全無(wú)毒，可望應(yīng)用于臨床。
(收稿日期：2000-01-28), 百拇醫(yī)藥