人精子膜甘露糖結(jié)合蛋白的研究
http://www.www.srpcoatings.com
丁之德;S.Hansen;S.Thiel;T.Hjort;JC.Jensenius
參見(jiàn)附件(183kb)。
丁之德;S.Hansen;S.Thiel;T.Hjort;JC.Jensenius
關(guān)鍵詞:精子膜;甘露糖結(jié)合蛋白;親和層析
摘要:我們運(yùn)用Percoll密度梯度離心技術(shù)從正常捐精者的精液中分離出成熟精子并使其獲能,經(jīng)含1%穿通(Triton)X114Tris緩沖液溶解,超聲粉碎及離心分離后獲得人精子可溶性蛋白懸液。隨后運(yùn)用蛋白質(zhì)親和層析及SDSPAGE電泳技術(shù)分離人精子可溶性蛋白質(zhì),經(jīng)銀染后發(fā)現(xiàn):用山羊抗人巨噬細(xì)胞甘露糖受體(antimacrophagemannosereceptor,AMMR)IgG包被的AffiPrepHzsupport珠能結(jié)合人精子中一種分子量為29KD的蛋白質(zhì),而對(duì)照組為正常山羊血清(normalgoat,NG)IgG包被珠,其結(jié)果卻呈陰性。最后運(yùn)用精子膜生物素標(biāo)記及蔗糖密度梯度離心技術(shù)進(jìn)一步標(biāo)記分離人精子膜可溶性蛋白質(zhì),證實(shí)了這種與AMMRIgG結(jié)合的蛋白質(zhì)為甘露糖結(jié)合蛋白,存在于人精子膜上。精子膜甘露糖結(jié)合蛋白可能與精卵識(shí)別的起始過(guò)程有相當(dāng)密切的關(guān)系。
丁之德;S.Hansen;S.Thiel;T.Hjort;JC.Jensenius
關(guān)鍵詞:精子膜;甘露糖結(jié)合蛋白;親和層析
摘要:我們運(yùn)用Percoll密度梯度離心技術(shù)從正常捐精者的精液中分離出成熟精子并使其獲能,經(jīng)含1%穿通(Triton)X114Tris緩沖液溶解,超聲粉碎及離心分離后獲得人精子可溶性蛋白懸液。隨后運(yùn)用蛋白質(zhì)親和層析及SDSPAGE電泳技術(shù)分離人精子可溶性蛋白質(zhì),經(jīng)銀染后發(fā)現(xiàn):用山羊抗人巨噬細(xì)胞甘露糖受體(antimacrophagemannosereceptor,AMMR)IgG包被的AffiPrepHzsupport珠能結(jié)合人精子中一種分子量為29KD的蛋白質(zhì),而對(duì)照組為正常山羊血清(normalgoat,NG)IgG包被珠,其結(jié)果卻呈陰性。最后運(yùn)用精子膜生物素標(biāo)記及蔗糖密度梯度離心技術(shù)進(jìn)一步標(biāo)記分離人精子膜可溶性蛋白質(zhì),證實(shí)了這種與AMMRIgG結(jié)合的蛋白質(zhì)為甘露糖結(jié)合蛋白,存在于人精子膜上。精子膜甘露糖結(jié)合蛋白可能與精卵識(shí)別的起始過(guò)程有相當(dāng)密切的關(guān)系。
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