乙肝病毒核心抗原人源單鏈可變區(qū)抗體的篩選
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中國(guó)人民解放軍第三○二醫(yī)院 北京100039 鐘彥偉;成軍;王剛;田小軍;陳新華;李莉;陳菊梅;張玲霞
噬菌體展示技術(shù)|乙型肝炎病毒|核心抗原|親和篩選|噬菌體抗體
參見附件(25kb)。
中國(guó)人民解放軍第三○二醫(yī)院 北京100039 鐘彥偉;成軍;王剛;田小軍;陳新華;李莉;陳菊梅;張玲霞
關(guān)鍵詞:噬菌體展示技術(shù);乙型肝炎病毒;核心抗原;親和篩選;噬菌體抗體
摘要:目的 篩選、鑒定乙型肝炎病毒 (HBV)核心抗原 (HBcAg)蛋白的人源單鏈可變區(qū)抗體 (ScFv)的編碼基因 ,為細(xì)胞內(nèi)表達(dá)小分子單鏈抗體的研究及抗HBV的基因治療研究奠定基礎(chǔ)。方法 采用噬菌體表面展示技術(shù) ,以HBcAg蛋白為固相抗原 ,從噬菌體單鏈可變區(qū)抗體半合成庫(kù)中經(jīng)過 5輪“吸附 -洗脫 -擴(kuò)增”篩選過程 ,獲得抗原結(jié)合活性較強(qiáng)的HBcAg人源單鏈可變區(qū)抗體陽(yáng)性克隆 ,并對(duì)其進(jìn)行免疫檢測(cè)及序列測(cè)定。結(jié)果 篩選得到的ScFv片段編碼基因?yàn)?771nt,編碼的產(chǎn)物由 2 5 7個(gè)氨基酸殘基組成 ,具有典型的輕鏈和重鏈可變區(qū)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)以及與HBcAg結(jié)合的特異性。結(jié)論 利用...
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關(guān)鍵詞:噬菌體展示技術(shù);乙型肝炎病毒;核心抗原;親和篩選;噬菌體抗體
摘要:目的 篩選、鑒定乙型肝炎病毒 (HBV)核心抗原 (HBcAg)蛋白的人源單鏈可變區(qū)抗體 (ScFv)的編碼基因 ,為細(xì)胞內(nèi)表達(dá)小分子單鏈抗體的研究及抗HBV的基因治療研究奠定基礎(chǔ)。方法 采用噬菌體表面展示技術(shù) ,以HBcAg蛋白為固相抗原 ,從噬菌體單鏈可變區(qū)抗體半合成庫(kù)中經(jīng)過 5輪“吸附 -洗脫 -擴(kuò)增”篩選過程 ,獲得抗原結(jié)合活性較強(qiáng)的HBcAg人源單鏈可變區(qū)抗體陽(yáng)性克隆 ,并對(duì)其進(jìn)行免疫檢測(cè)及序列測(cè)定。結(jié)果 篩選得到的ScFv片段編碼基因?yàn)?771nt,編碼的產(chǎn)物由 2 5 7個(gè)氨基酸殘基組成 ,具有典型的輕鏈和重鏈可變區(qū)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)以及與HBcAg結(jié)合的特異性。結(jié)論 利用...
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