高效液相色譜法測定桂龍咳喘寧膠囊中肉桂酸的含量
作者：羅晉萍 張中蘇 田晨
單位：羅晉萍 張中蘇(山西省藥品檢驗所 太原 030001)；田晨(山西省人民醫(yī)院藥劑科 030012)
關鍵詞：
藥物分析雜志000325 桂龍咳喘寧膠囊系《衛(wèi)生部藥品標準》(新藥轉正)第五冊收載的品種，具有止咳化痰、降氣平喘功能。方中桂枝為君藥，其主要成分之一肉桂酸具有抗菌、升白細胞、利膽等藥理作用[1]。該品種現行標準僅有定性、揮發(fā)性、醚浸出物等檢測指標。為了保證本品安全有效，必須提高其質量標準。我們采用高效液相色譜法測定肉桂酸含量。通過對10批樣品的測定，表明該法準確、靈敏、穩(wěn)定性好，可有效地用于本品的質量控制。
1 儀器與藥品
SP8800高效液相色譜儀；Spectra 200型UV-Vis檢測器；SP440型積分儀。
, http://www.www.srpcoatings.com
肉桂酸對照品購自中國藥品生物制品檢定所(經標化，符合含量測定要求)。
桂龍咳喘寧膠囊(0.3 g每粒)由山西桂龍醫(yī)藥有限公司提供。
乙腈、甲醇為色譜純；其它試劑均為分析純。
2 色譜條件
色譜柱：C18柱(4.6 mm×250 mm,5 μm)，天津奧特公司產；流動相：乙腈-0.1%磷酸溶液(30∶70)；流速1.0 mL.min-1；柱溫：室溫；檢測波長：285 nm[2]。
3 線性關系考察
精密稱取經五氧化二磷減壓干燥至恒重的肉桂酸對照品，以50%甲醇制成0.1 mg.mL-1的對照品溶液，精密吸取0.1，0.3，0.5，0.7，0.9 mL分別置10 mL量瓶中，加50%甲醇稀釋至刻度，搖勻。分別精密進樣10 μL，依法測定。以色譜峰面積值為縱坐標，對照品濃度(μg.mL-1)為橫坐標，繪制標準曲線，得一回歸方程為：
, 百拇醫(yī)藥
Y=110 981 450X-8 215.75 r=0.999 8
肉桂酸濃度在1～9 μg.mL-1之間與峰面積值呈良好的線性關系。
4 精密度試驗
精密吸取同一對照品溶液(7μg.mL-1)10 μL重復進樣測定峰面積值，RSD=1.1%(n=6)。
5 穩(wěn)定性試驗
按照樣品測定項下方法，對同一樣品在7 h內每隔1 h進樣(10 μL)1次，測定肉桂酸峰面積，RSD=1.1%(n=7)。
6 重復性試驗
取同一批樣品按“樣品測定”項下進行5次測定，結果含量的RSD=1.6%(n=5)。
, http://www.www.srpcoatings.com
7 加樣回收率試驗
取已測知含量的樣品約0.5 g，精密稱定，分別添加一定量的肉桂酸對照品，按供試品溶液制備項下的方法制備，依法測定。結果平均回收率為99.3%(n=5)，RSD=2.2%。
8 空白試驗
取陰性對照，依法測定，結果無干擾。見圖1。
圖1 色譜圖
A.溶劑 B.對照品 C.陰性對照 D.樣品
1.溶劑 2.桂皮醛(18.28 min)
9 樣品測定
, 百拇醫(yī)藥
取本品10粒，傾出內容物，混勻，取約1.0 g，精密稱定，置50 mL量瓶中，加50%甲醇40 mL，超聲提取30 min，放冷，加50%甲醇稀釋至刻度，搖勻，棄去初濾液，收集續(xù)濾液，用0.45 μm的濾膜濾過，濾液作為樣品溶液。
分別精密吸取對照品溶液與樣品溶液各10 μL，注入液相色譜儀，測定，外標法計算含量，即得。色譜圖見圖1，結果見表1。
10 討論
比較了乙腈-0.1%磷酸溶液的4種比例：(29∶71)，(30∶70)，(32∶68)，(35∶65)，最后確定流動相比例為30∶70，分離效果好，且保留時間短。
實驗表明，本法測定桂龍咳喘寧膠囊含量，樣品穩(wěn)定，重復性好，陰性無干擾，結果準確可靠。
表1 10批樣品含量測定結果(n=2) 批 號
, 百拇醫(yī)藥
每粒含量/mg
相對平均偏差/%
970309-1
0.110
0.4
970309-2
0.097
1.0
970914-3
0.129
0
970308-1
, http://www.www.srpcoatings.com 0.117
0
970306-3
0.101
1.0
970304-1
0.100
2.5
970904
0.088
0.6
970804
0.106
, http://www.www.srpcoatings.com
0.5
970912
0.078
2.6
970605-3
0.086
0.6
參考文獻
1，柯銘清.中草藥有效成分理化與藥理特性.長沙：湖南科學技術出版社，1982.226
2，王寶琴.中成藥質量標準與標準物質研究.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，1994.403
(本文于1999年4月1日收到), http://www.www.srpcoatings.com
單位：羅晉萍 張中蘇(山西省藥品檢驗所 太原 030001)；田晨(山西省人民醫(yī)院藥劑科 030012)
關鍵詞：
藥物分析雜志000325 桂龍咳喘寧膠囊系《衛(wèi)生部藥品標準》(新藥轉正)第五冊收載的品種，具有止咳化痰、降氣平喘功能。方中桂枝為君藥，其主要成分之一肉桂酸具有抗菌、升白細胞、利膽等藥理作用[1]。該品種現行標準僅有定性、揮發(fā)性、醚浸出物等檢測指標。為了保證本品安全有效，必須提高其質量標準。我們采用高效液相色譜法測定肉桂酸含量。通過對10批樣品的測定，表明該法準確、靈敏、穩(wěn)定性好，可有效地用于本品的質量控制。
1 儀器與藥品
SP8800高效液相色譜儀；Spectra 200型UV-Vis檢測器；SP440型積分儀。
, http://www.www.srpcoatings.com
肉桂酸對照品購自中國藥品生物制品檢定所(經標化，符合含量測定要求)。
桂龍咳喘寧膠囊(0.3 g每粒)由山西桂龍醫(yī)藥有限公司提供。
乙腈、甲醇為色譜純；其它試劑均為分析純。
2 色譜條件
色譜柱：C18柱(4.6 mm×250 mm,5 μm)，天津奧特公司產；流動相：乙腈-0.1%磷酸溶液(30∶70)；流速1.0 mL.min-1；柱溫：室溫；檢測波長：285 nm[2]。
3 線性關系考察
精密稱取經五氧化二磷減壓干燥至恒重的肉桂酸對照品，以50%甲醇制成0.1 mg.mL-1的對照品溶液，精密吸取0.1，0.3，0.5，0.7，0.9 mL分別置10 mL量瓶中，加50%甲醇稀釋至刻度，搖勻。分別精密進樣10 μL，依法測定。以色譜峰面積值為縱坐標，對照品濃度(μg.mL-1)為橫坐標，繪制標準曲線，得一回歸方程為：
, 百拇醫(yī)藥
Y=110 981 450X-8 215.75 r=0.999 8
肉桂酸濃度在1～9 μg.mL-1之間與峰面積值呈良好的線性關系。
4 精密度試驗
精密吸取同一對照品溶液(7μg.mL-1)10 μL重復進樣測定峰面積值，RSD=1.1%(n=6)。
5 穩(wěn)定性試驗
按照樣品測定項下方法，對同一樣品在7 h內每隔1 h進樣(10 μL)1次，測定肉桂酸峰面積，RSD=1.1%(n=7)。
6 重復性試驗
取同一批樣品按“樣品測定”項下進行5次測定，結果含量的RSD=1.6%(n=5)。
, http://www.www.srpcoatings.com
7 加樣回收率試驗
取已測知含量的樣品約0.5 g，精密稱定，分別添加一定量的肉桂酸對照品，按供試品溶液制備項下的方法制備，依法測定。結果平均回收率為99.3%(n=5)，RSD=2.2%。
8 空白試驗
取陰性對照，依法測定，結果無干擾。見圖1。
圖1 色譜圖
A.溶劑 B.對照品 C.陰性對照 D.樣品
1.溶劑 2.桂皮醛(18.28 min)
9 樣品測定
, 百拇醫(yī)藥
取本品10粒，傾出內容物，混勻，取約1.0 g，精密稱定，置50 mL量瓶中，加50%甲醇40 mL，超聲提取30 min，放冷，加50%甲醇稀釋至刻度，搖勻，棄去初濾液，收集續(xù)濾液，用0.45 μm的濾膜濾過，濾液作為樣品溶液。
分別精密吸取對照品溶液與樣品溶液各10 μL，注入液相色譜儀，測定，外標法計算含量，即得。色譜圖見圖1，結果見表1。
10 討論
比較了乙腈-0.1%磷酸溶液的4種比例：(29∶71)，(30∶70)，(32∶68)，(35∶65)，最后確定流動相比例為30∶70，分離效果好，且保留時間短。
實驗表明，本法測定桂龍咳喘寧膠囊含量，樣品穩(wěn)定，重復性好，陰性無干擾，結果準確可靠。
表1 10批樣品含量測定結果(n=2) 批 號
, 百拇醫(yī)藥
每粒含量/mg
相對平均偏差/%
970309-1
0.110
0.4
970309-2
0.097
1.0
970914-3
0.129
0
970308-1
, http://www.www.srpcoatings.com 0.117
0
970306-3
0.101
1.0
970304-1
0.100
2.5
970904
0.088
0.6
970804
0.106
, http://www.www.srpcoatings.com
0.5
970912
0.078
2.6
970605-3
0.086
0.6
參考文獻
1，柯銘清.中草藥有效成分理化與藥理特性.長沙：湖南科學技術出版社，1982.226
2，王寶琴.中成藥質量標準與標準物質研究.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，1994.403
(本文于1999年4月1日收到), http://www.www.srpcoatings.com