小杯法測(cè)定艾司唑侖片溶出度的實(shí)驗(yàn)研究
作者:吳延暉 邵廣洲 馮涌
單位:吳延暉 邵廣洲 馮涌(中國(guó)人民解放軍第464醫(yī)院 天津 300381)
關(guān)鍵詞:
藥物分析雜志000322 艾司唑侖(Estazolam)又名三唑氯安定,是苯二氮
類衍生物[1],70年代由日本武田藥廠創(chuàng)制,臨床作為鎮(zhèn)靜催眠藥廣泛應(yīng)用,但在臨床應(yīng)用中療效不一,有關(guān)其質(zhì)控指標(biāo)之一的溶出度測(cè)定在英國(guó)藥典1993年版、美國(guó)藥典Ⅹ 版及中國(guó)藥典1995年版均未收載。由于艾司唑侖在水中幾乎不溶,且每片劑量很小,每片標(biāo)示量為1 mg,為了進(jìn)一步控制其質(zhì)量,按照中國(guó)藥典小杯法進(jìn)行了艾司唑侖片的溶出度實(shí)驗(yàn),并且對(duì)3個(gè)廠家9個(gè)批號(hào)的產(chǎn)品進(jìn)行了體外溶出度檢查,實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,該法簡(jiǎn)便快速,結(jié)果準(zhǔn)確。
, 百拇醫(yī)藥
1 儀器與試藥
ZRS-4智能溶出儀,小杯法裝置(天津大學(xué)無(wú)線電廠);島津UV-2201紫外分光光度計(jì)。
艾司唑侖片每片1 mg;天津A藥廠,批號(hào):981001(A1);981101(A2);981203(A3);湖北B藥廠,批號(hào):980407(B1);980701(B2);980804(B3);981001(B4);北京C藥廠,批號(hào):980701(C1);980702(C2)。
37%鹽酸(天津市化學(xué)試劑三廠)。
2 含量測(cè)定[2]
取本品30片,精密稱定,研細(xì),精密稱取適量(約相當(dāng)于艾司唑侖10 mg),置100 mL量瓶中,加鹽酸溶液(9→1 000)(以下簡(jiǎn)稱鹽酸溶液)60 mL,充分振搖,使艾司唑侖溶解,用鹽酸溶液稀釋至刻度,搖勻,濾過(guò);棄去初濾液,精密量取續(xù)濾液5 mL,置50 mL量瓶中,用鹽酸溶液稀釋至刻度,搖勻,照分光光度法(附錄ⅥA),在(271±2) nm的波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度,按C16H11ClN4的吸收系數(shù)E1%1cm為358計(jì)算即得。計(jì)算結(jié)果見(jiàn)表1。
, 百拇醫(yī)藥
表1 艾司唑侖片含量測(cè)定結(jié)果 樣品
平均片重/g
標(biāo)示量 %
A1
0.05740
92.13
A2
0.06105
98.89
A3
0.06141
102.3
, 百拇醫(yī)藥 B1
0.08124
90.66
B2
0.08418
92.64
B3
0.08273
99.06
B4
0.07898
92.19
C1
, 百拇醫(yī)藥
0.06819
94.88
C2
0.06654
92.40
3 溶出度測(cè)定
3.1 溶劑的選擇 根據(jù)艾司唑侖溶解特性,進(jìn)行了5種不同的pH緩沖液的篩選[3],并考慮到中國(guó)藥典95版含量均勻度、含量測(cè)定均以鹽酸溶液為溶劑,按C16H11ClN4的吸收系數(shù)(E1%1cm)為358計(jì)算,故認(rèn)為本品溶出度的測(cè)定以鹽酸溶液為溶出溶劑[4]。
3.2 溶出轉(zhuǎn)速的選擇 以脫氣后的鹽酸溶液250 mL為溶出溶劑,轉(zhuǎn)速分別選擇50,60,75 r.min-1進(jìn)行實(shí)驗(yàn),每一操作容器內(nèi)投1片,經(jīng)30 min取樣,在271 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度,并同時(shí)以鹽酸溶液為空白,計(jì)算出溶出量,結(jié)果表明:50 r.min-1溶出速率較慢、溶出量偏低;而75 r.min-1溶出速率較快、溶出量偏高,故轉(zhuǎn)速選擇為60 r.min-1。
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4 方法的確定
4.1 溶出曲線 用選定的溶出溶劑分別對(duì)B4批號(hào)的艾司唑侖片進(jìn)行5次30個(gè)數(shù)據(jù)的實(shí)驗(yàn),考核該產(chǎn)品溶出均一性,繪制溶出曲線(見(jiàn)圖1)。取艾司唑侖片按照溶出度測(cè)定法(中國(guó)藥典95版附錄66頁(yè)第三法)以脫氣后的鹽酸溶液250 mL為溶劑,每一操作容器內(nèi)投入1片,60 r.min-1,分別在15,30,45,60 min時(shí)取樣3 mL,以濾紙過(guò)濾,取續(xù)濾液照分光光度法(中國(guó)藥典95版附錄18頁(yè)Ⅳ法)271 nm處測(cè)吸收度計(jì)算出溶出量,結(jié)果見(jiàn)表2。
4.2 樣品測(cè)定 根據(jù)以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果,取本品1片,照溶出度測(cè)定法(中國(guó)藥典95版二部附錄66頁(yè)第三法)以脫氣后的鹽酸溶液250 mL為溶劑,轉(zhuǎn)速為60 r.min-1,經(jīng)20 min時(shí)取樣,其他操作同前測(cè)定方法,對(duì)3個(gè)廠家的9個(gè)批號(hào)的樣品進(jìn)行檢驗(yàn),按C16H11ClN4的吸收系數(shù)(E1%1cm)為358計(jì)算出每片的溶出量,限度為標(biāo)示量的75%。結(jié)果見(jiàn)表3。
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圖1 B4艾司唑侖片溶出度曲線
表2 艾司唑侖片溶出曲線結(jié)果(%)
溶出時(shí)間/min
15
30
45
60
1
85.78
94.91
95.90
92.88
, 百拇醫(yī)藥 2
82.81
94.04
97.30
93.58
3
87.93
96.26
99.05
99.39
4
86.30
95.09
, http://www.www.srpcoatings.com
96.72
96.95
5
88.11
97.54
100.7
103.1
X/%
86.19
95.57
97.93
97.18
RSD/%
, 百拇醫(yī)藥
2.48
1.42
1.97
4.35
表3 9批樣品30 min溶出結(jié)果(%) 批號(hào)
溶出量
RSD
最大值
最小值
平均值
/%
A1
94.79
, http://www.www.srpcoatings.com
88.32
91.10
2.62
A2
98.46
88.28
93.46
3.92
A3
97.37
91.80
93.98
2.37
, 百拇醫(yī)藥
B1
99.86
84.13
92.00
6.28
B2
98.53
84.72
89.89
5.60
B3
91.48
78.55
, http://www.www.srpcoatings.com
87.18
5.37
B4
98.78
88.69
93.84
4.86
C1
68.44
57.18
64.95
4.86
C2
, 百拇醫(yī)藥
61.45
51.16
55.24
6.51
5 數(shù)據(jù)處理
提取參數(shù):根據(jù)威布爾分布建立了溶出百分率與時(shí)間的函數(shù)關(guān)系,從中提取T50(釋放50%所需時(shí)間),Td(釋放63.2%所需時(shí)間),m(釋放曲線形狀參數(shù),即曲線斜率)3個(gè)參數(shù),結(jié)果見(jiàn)表4。
表4 9個(gè)不同批號(hào)樣品溶出參數(shù)(n=6) 批號(hào)
T50/min
Td/min
, 百拇醫(yī)藥
m
A1
15.63
20.88
1.264
A2
9.43
13.51
1.017
A3
5.80
9.60
0.726
, http://www.www.srpcoatings.com
B1
8.88
11.30
1.514
B2
4.50
8.08
0.625
B3
9.97
14.76
0.934
B4
, 百拇醫(yī)藥
2.80
5.72
0.512
C1
33.17
44.03
1.293
C2
36.01
49.38
1.159
6 討論
6.1 本實(shí)驗(yàn)9批樣品其含量均在標(biāo)示量90%~110%范圍之內(nèi),崩解時(shí)限均未超過(guò)15 min,均勻度檢查均符合中國(guó)藥典95版規(guī)定。
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6.2 對(duì)溶出參數(shù)Td、T50和m的方差分析結(jié)果表明,不同廠家及同一廠家不同批號(hào)之間的艾司唑侖片的溶出度及Td、T50和m均有顯著差異,這可能是造成臨床療效不一的原因之一,艾司唑侖片有必要作溶出度檢查,以控制其質(zhì)量。
6.3 實(shí)驗(yàn)中所用濾紙對(duì)本品有一定的吸附作用,所以取樣前應(yīng)至少用10 mL樣品溶出液充分飽和,此時(shí)的吸收值保持恒定。
6.4 艾司唑侖為幾乎不溶于水的藥物,通過(guò)試驗(yàn)表明,擬定的溶出度測(cè)定法能有效地控制產(chǎn)品質(zhì)量,建議今后藥典中在制定艾司唑侖及其同類精神藥的溶出度限度以20 min時(shí)溶出的百分率不低于標(biāo)示量的75%,以此來(lái)控制產(chǎn)品質(zhì)量,保證臨床療效。
6.5 從北京C藥廠復(fù)核數(shù)據(jù)分析,該廠產(chǎn)品由于壓片工藝等原因,溶出度明顯低于A、B藥廠,說(shuō)明該方法是可以反映和控制質(zhì)量情況的。
, 百拇醫(yī)藥
馮涌:天津醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院畢業(yè)實(shí)習(xí)生
參考文獻(xiàn)
1,竺心影.藥理學(xué).第三版,北京:人民衛(wèi)生出版社,1995.138
2,中國(guó)藥典.1995.二部:88
3,袁和亮.楊鵬暉,李光平等.米非司酮片溶出速率的研究.中國(guó)藥科大學(xué)學(xué)報(bào),1993,24(3):212
4,左志輝.卡比馬唑片溶出度方法的選擇.天津藥學(xué),1994,6(4):52
(本文于1999年7月12日收到), 百拇醫(yī)藥
單位:吳延暉 邵廣洲 馮涌(中國(guó)人民解放軍第464醫(yī)院 天津 300381)
關(guān)鍵詞:
藥物分析雜志000322 艾司唑侖(Estazolam)又名三唑氯安定,是苯二氮
, 百拇醫(yī)藥
1 儀器與試藥
ZRS-4智能溶出儀,小杯法裝置(天津大學(xué)無(wú)線電廠);島津UV-2201紫外分光光度計(jì)。
艾司唑侖片每片1 mg;天津A藥廠,批號(hào):981001(A1);981101(A2);981203(A3);湖北B藥廠,批號(hào):980407(B1);980701(B2);980804(B3);981001(B4);北京C藥廠,批號(hào):980701(C1);980702(C2)。
37%鹽酸(天津市化學(xué)試劑三廠)。
2 含量測(cè)定[2]
取本品30片,精密稱定,研細(xì),精密稱取適量(約相當(dāng)于艾司唑侖10 mg),置100 mL量瓶中,加鹽酸溶液(9→1 000)(以下簡(jiǎn)稱鹽酸溶液)60 mL,充分振搖,使艾司唑侖溶解,用鹽酸溶液稀釋至刻度,搖勻,濾過(guò);棄去初濾液,精密量取續(xù)濾液5 mL,置50 mL量瓶中,用鹽酸溶液稀釋至刻度,搖勻,照分光光度法(附錄ⅥA),在(271±2) nm的波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度,按C16H11ClN4的吸收系數(shù)E1%1cm為358計(jì)算即得。計(jì)算結(jié)果見(jiàn)表1。
, 百拇醫(yī)藥
表1 艾司唑侖片含量測(cè)定結(jié)果 樣品
平均片重/g
標(biāo)示量 %
A1
0.05740
92.13
A2
0.06105
98.89
A3
0.06141
102.3
, 百拇醫(yī)藥 B1
0.08124
90.66
B2
0.08418
92.64
B3
0.08273
99.06
B4
0.07898
92.19
C1
, 百拇醫(yī)藥
0.06819
94.88
C2
0.06654
92.40
3 溶出度測(cè)定
3.1 溶劑的選擇 根據(jù)艾司唑侖溶解特性,進(jìn)行了5種不同的pH緩沖液的篩選[3],并考慮到中國(guó)藥典95版含量均勻度、含量測(cè)定均以鹽酸溶液為溶劑,按C16H11ClN4的吸收系數(shù)(E1%1cm)為358計(jì)算,故認(rèn)為本品溶出度的測(cè)定以鹽酸溶液為溶出溶劑[4]。
3.2 溶出轉(zhuǎn)速的選擇 以脫氣后的鹽酸溶液250 mL為溶出溶劑,轉(zhuǎn)速分別選擇50,60,75 r.min-1進(jìn)行實(shí)驗(yàn),每一操作容器內(nèi)投1片,經(jīng)30 min取樣,在271 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度,并同時(shí)以鹽酸溶液為空白,計(jì)算出溶出量,結(jié)果表明:50 r.min-1溶出速率較慢、溶出量偏低;而75 r.min-1溶出速率較快、溶出量偏高,故轉(zhuǎn)速選擇為60 r.min-1。
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4 方法的確定
4.1 溶出曲線 用選定的溶出溶劑分別對(duì)B4批號(hào)的艾司唑侖片進(jìn)行5次30個(gè)數(shù)據(jù)的實(shí)驗(yàn),考核該產(chǎn)品溶出均一性,繪制溶出曲線(見(jiàn)圖1)。取艾司唑侖片按照溶出度測(cè)定法(中國(guó)藥典95版附錄66頁(yè)第三法)以脫氣后的鹽酸溶液250 mL為溶劑,每一操作容器內(nèi)投入1片,60 r.min-1,分別在15,30,45,60 min時(shí)取樣3 mL,以濾紙過(guò)濾,取續(xù)濾液照分光光度法(中國(guó)藥典95版附錄18頁(yè)Ⅳ法)271 nm處測(cè)吸收度計(jì)算出溶出量,結(jié)果見(jiàn)表2。
4.2 樣品測(cè)定 根據(jù)以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果,取本品1片,照溶出度測(cè)定法(中國(guó)藥典95版二部附錄66頁(yè)第三法)以脫氣后的鹽酸溶液250 mL為溶劑,轉(zhuǎn)速為60 r.min-1,經(jīng)20 min時(shí)取樣,其他操作同前測(cè)定方法,對(duì)3個(gè)廠家的9個(gè)批號(hào)的樣品進(jìn)行檢驗(yàn),按C16H11ClN4的吸收系數(shù)(E1%1cm)為358計(jì)算出每片的溶出量,限度為標(biāo)示量的75%。結(jié)果見(jiàn)表3。
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圖1 B4艾司唑侖片溶出度曲線
表2 艾司唑侖片溶出曲線結(jié)果(%)
溶出時(shí)間/min
15
30
45
60
1
85.78
94.91
95.90
92.88
, 百拇醫(yī)藥 2
82.81
94.04
97.30
93.58
3
87.93
96.26
99.05
99.39
4
86.30
95.09
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96.72
96.95
5
88.11
97.54
100.7
103.1
X/%
86.19
95.57
97.93
97.18
RSD/%
, 百拇醫(yī)藥
2.48
1.42
1.97
4.35
表3 9批樣品30 min溶出結(jié)果(%) 批號(hào)
溶出量
RSD
最大值
最小值
平均值
/%
A1
94.79
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88.32
91.10
2.62
A2
98.46
88.28
93.46
3.92
A3
97.37
91.80
93.98
2.37
, 百拇醫(yī)藥
B1
99.86
84.13
92.00
6.28
B2
98.53
84.72
89.89
5.60
B3
91.48
78.55
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87.18
5.37
B4
98.78
88.69
93.84
4.86
C1
68.44
57.18
64.95
4.86
C2
, 百拇醫(yī)藥
61.45
51.16
55.24
6.51
5 數(shù)據(jù)處理
提取參數(shù):根據(jù)威布爾分布建立了溶出百分率與時(shí)間的函數(shù)關(guān)系,從中提取T50(釋放50%所需時(shí)間),Td(釋放63.2%所需時(shí)間),m(釋放曲線形狀參數(shù),即曲線斜率)3個(gè)參數(shù),結(jié)果見(jiàn)表4。
表4 9個(gè)不同批號(hào)樣品溶出參數(shù)(n=6) 批號(hào)
T50/min
Td/min
, 百拇醫(yī)藥
m
A1
15.63
20.88
1.264
A2
9.43
13.51
1.017
A3
5.80
9.60
0.726
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B1
8.88
11.30
1.514
B2
4.50
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0.625
B3
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14.76
0.934
B4
, 百拇醫(yī)藥
2.80
5.72
0.512
C1
33.17
44.03
1.293
C2
36.01
49.38
1.159
6 討論
6.1 本實(shí)驗(yàn)9批樣品其含量均在標(biāo)示量90%~110%范圍之內(nèi),崩解時(shí)限均未超過(guò)15 min,均勻度檢查均符合中國(guó)藥典95版規(guī)定。
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6.2 對(duì)溶出參數(shù)Td、T50和m的方差分析結(jié)果表明,不同廠家及同一廠家不同批號(hào)之間的艾司唑侖片的溶出度及Td、T50和m均有顯著差異,這可能是造成臨床療效不一的原因之一,艾司唑侖片有必要作溶出度檢查,以控制其質(zhì)量。
6.3 實(shí)驗(yàn)中所用濾紙對(duì)本品有一定的吸附作用,所以取樣前應(yīng)至少用10 mL樣品溶出液充分飽和,此時(shí)的吸收值保持恒定。
6.4 艾司唑侖為幾乎不溶于水的藥物,通過(guò)試驗(yàn)表明,擬定的溶出度測(cè)定法能有效地控制產(chǎn)品質(zhì)量,建議今后藥典中在制定艾司唑侖及其同類精神藥的溶出度限度以20 min時(shí)溶出的百分率不低于標(biāo)示量的75%,以此來(lái)控制產(chǎn)品質(zhì)量,保證臨床療效。
6.5 從北京C藥廠復(fù)核數(shù)據(jù)分析,該廠產(chǎn)品由于壓片工藝等原因,溶出度明顯低于A、B藥廠,說(shuō)明該方法是可以反映和控制質(zhì)量情況的。
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馮涌:天津醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院畢業(yè)實(shí)習(xí)生
參考文獻(xiàn)
1,竺心影.藥理學(xué).第三版,北京:人民衛(wèi)生出版社,1995.138
2,中國(guó)藥典.1995.二部:88
3,袁和亮.楊鵬暉,李光平等.米非司酮片溶出速率的研究.中國(guó)藥科大學(xué)學(xué)報(bào),1993,24(3):212
4,左志輝.卡比馬唑片溶出度方法的選擇.天津藥學(xué),1994,6(4):52
(本文于1999年7月12日收到), 百拇醫(yī)藥