制作蟯蟲卵玻片標本不同方法的比較
作者：望西玉 王過渡 樊中麗 杜幼芹
單位：望西玉 王過渡 樊中麗 杜幼芹 湖北三峽學(xué)院醫(yī)學(xué)院 基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)系 宜昌 443003
關(guān)鍵詞：
實用寄生蟲病雜志99zk48 蟯蟲成蟲寄生于人體的回盲部，在宿主睡覺后，雌蟲移行至肛門周圍，受溫濕度變化及空氣的刺激產(chǎn)卵〔1〕。因此，該蟲卵的收集較困難。蟯蟲卵 標本的制作，多采用活雌蟲(灌腸驅(qū)蟲)，從雌蟲子宮里取蟲卵〔2〕或在宿主睡覺后 肛周取蟲收集蟲卵〔3〕。本文則是在流行病學(xué)調(diào)查的基礎(chǔ)上，將收集到的蟯蟲卵用 三種方法制成玻片標本，用于教學(xué)實踐10余年。作者對制作蟯蟲卵玻片標本的不同方法，以 及不同方法制作蟯蟲卵的外形、大小和蟲卵完好率進行了觀察報道。
1 材料與方法
, http://www.www.srpcoatings.com
1.1 制作蟯蟲卵玻片標本的方法
①透明膠紙法〔2〕。②單蓋片法 在透明膠紙法的基礎(chǔ)上，取下附著蟯蟲卵的透明膠紙條，用剪刀剪去兩頭，留取 含有蟯蟲卵的中間部分，約1.5-2.0cm長，貼于玻片上，滴中性樹膠2-3滴，覆以蓋玻片一張 (2.4×2.4cm)，平放，溫箱內(nèi)烘干。③雙蓋片法 用棉簽拭子法收集蟲卵 〔4〕。將收集的蟯蟲卵放入5%福爾馬林固定的多種蠕蟲卵中，即為混合蟲卵。用孔 徑0.15mm毛細吸管吸取混合蟲卵一滴，置于載玻片中央，然后，用細玻棒挑取甘油明膠一滴 ，置于載玻片中央，立即覆以蓋玻片一張(1.8×1.8cm)，待凝固后，滴加中性樹膠2-3滴于 蓋玻片上，然后，再將另一蓋玻片(2.4×2.4cm)覆蓋其上，封固后，平放，溫箱內(nèi)烘干。
1.2 觀察蟯蟲卵的方法
將不同方法制作的玻片標本分別在低、高倍鏡下進行觀察。對蟯蟲卵的外形、大小以及蟲卵內(nèi)容物的外滲情況進行觀察 、測量，所獲資料采用均值與標準差(
±s)表示，采用t檢驗作統(tǒng)計學(xué)分析 。
, http://www.www.srpcoatings.com
2 結(jié)果
2.1 三種方法制作的蟯蟲卵的外形、大小及完好率的觀察
蟯蟲卵的外形，一般教科書多描述為橢圓形，兩側(cè)不對稱，一側(cè)較扁平，一側(cè)稍凸出〔4〕。戴 世忠等從不同方向投視同一蟯蟲卵時，外形輪廓不同，側(cè)面視呈不對稱的長橢圓形，兩極不等大，背面或腹面視呈對稱長橢圓形〔5〕。我們在光鏡下觀察了三種制片方法的蟯蟲卵外形。膠紙玻片法：蟲卵呈不對稱的長橢圓形，兩極不等大者96.20%(938枚/975枚)， 呈對稱長橢圓形者3.79%(37枚/975枚)；單蓋片法：蟲卵呈不對稱形者92.15%(963枚/1045枚 )，對稱形者7.84%(82枚/1045枚)；雙蓋片法：觀察180個蟲卵，全部呈對稱形。上述結(jié)果提 示，用不同方法制作的蟯蟲卵鏡下觀察時，其外形變化很大。
將三種方法制作的蟯蟲卵分別在高倍鏡下隨機測量50個，計算蟲卵的平均大小。透明膠紙法：51.94±1.71×25.13±0.30μm。單蓋片法：54.30±0.36×25.64±0.16μm。雙蓋 片法：55.31±0.36×24.69±0.27μm。結(jié)果提示，不同方法制作的蟯蟲卵鏡下觀察時，其大小略有不同，但經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析，無顯著性差異。
, http://www.www.srpcoatings.com
在高倍鏡下觀察蟯蟲卵的完好率。透明膠紙法975枚，單蓋片法1045枚，無一枚外滲、破裂 。雙蓋片法180枚中蟲卵內(nèi)容物外滲者67枚，占觀察總數(shù)的37.22%。但未見蟲卵卵殼破裂， 提示蟯蟲卵卵殼較厚。
2.2 制作方法的比較
制作蟯蟲卵玻片標本的三種方 法中，以透明膠紙法最為簡便，它是直接將含有蟯蟲卵的透明膠紙貼在載玻片上。但取材后 的膠紙貼回原玻片時，易出現(xiàn)空隙，鏡下觀察有空隙處的蟲卵呈現(xiàn)暗色折光，同時，蟯蟲卵的水份也有可能揮發(fā)。單蓋片法是在透明膠紙法的基礎(chǔ)上用中性樹膠封制而成，可以避免透明膠紙法中的不足，操作過程也比較簡便。雙蓋片法則是將蟯蟲卵保存在液體中，制作過程較前兩種復(fù)雜，蟲卵外形均呈對稱長橢圓形，蟲卵內(nèi)容物的外滲現(xiàn)象隨時間延長增多。用上述方法制作的蟯蟲卵玻片標本，用于教學(xué)實踐10余年，效果較好，其中尤以單蓋片法具有制 作簡便，效果理想，可長期保存等優(yōu)點。
3 參考文獻
1 趙慰先主編.人體寄生蟲學(xué).第一版.北京：人民衛(wèi)生出版 社，1983：676.
2 陳佩惠，等主編.人體寄生蟲學(xué)實驗技術(shù).第一版，北京：科學(xué)出版社，19 88：92.
3 郭延飛.蟯蟲卵標本制作的改進.福建醫(yī)學(xué)院學(xué)報 1985；19(2)∶110.
4 陳佩惠主編.人體寄生蟲學(xué).第四版.北京：人民衛(wèi)生出版社 1997：272 .
5 戴世忠.等.人蟯蟲卵卵殼的光鏡及掃描電鏡觀察.寄生蟲學(xué)與寄生蟲病雜志 1986；4(3)∶215., http://www.www.srpcoatings.com
單位：望西玉 王過渡 樊中麗 杜幼芹 湖北三峽學(xué)院醫(yī)學(xué)院 基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)系 宜昌 443003
關(guān)鍵詞：
實用寄生蟲病雜志99zk48 蟯蟲成蟲寄生于人體的回盲部，在宿主睡覺后，雌蟲移行至肛門周圍，受溫濕度變化及空氣的刺激產(chǎn)卵〔1〕。因此，該蟲卵的收集較困難。蟯蟲卵 標本的制作，多采用活雌蟲(灌腸驅(qū)蟲)，從雌蟲子宮里取蟲卵〔2〕或在宿主睡覺后 肛周取蟲收集蟲卵〔3〕。本文則是在流行病學(xué)調(diào)查的基礎(chǔ)上，將收集到的蟯蟲卵用 三種方法制成玻片標本，用于教學(xué)實踐10余年。作者對制作蟯蟲卵玻片標本的不同方法，以 及不同方法制作蟯蟲卵的外形、大小和蟲卵完好率進行了觀察報道。
1 材料與方法
, http://www.www.srpcoatings.com
1.1 制作蟯蟲卵玻片標本的方法
①透明膠紙法〔2〕。②單蓋片法 在透明膠紙法的基礎(chǔ)上，取下附著蟯蟲卵的透明膠紙條，用剪刀剪去兩頭，留取 含有蟯蟲卵的中間部分，約1.5-2.0cm長，貼于玻片上，滴中性樹膠2-3滴，覆以蓋玻片一張 (2.4×2.4cm)，平放，溫箱內(nèi)烘干。③雙蓋片法 用棉簽拭子法收集蟲卵 〔4〕。將收集的蟯蟲卵放入5%福爾馬林固定的多種蠕蟲卵中，即為混合蟲卵。用孔 徑0.15mm毛細吸管吸取混合蟲卵一滴，置于載玻片中央，然后，用細玻棒挑取甘油明膠一滴 ，置于載玻片中央，立即覆以蓋玻片一張(1.8×1.8cm)，待凝固后，滴加中性樹膠2-3滴于 蓋玻片上，然后，再將另一蓋玻片(2.4×2.4cm)覆蓋其上，封固后，平放，溫箱內(nèi)烘干。
1.2 觀察蟯蟲卵的方法
將不同方法制作的玻片標本分別在低、高倍鏡下進行觀察。對蟯蟲卵的外形、大小以及蟲卵內(nèi)容物的外滲情況進行觀察 、測量，所獲資料采用均值與標準差(
±s)表示，采用t檢驗作統(tǒng)計學(xué)分析 。, http://www.www.srpcoatings.com
2 結(jié)果
2.1 三種方法制作的蟯蟲卵的外形、大小及完好率的觀察
蟯蟲卵的外形，一般教科書多描述為橢圓形，兩側(cè)不對稱，一側(cè)較扁平，一側(cè)稍凸出〔4〕。戴 世忠等從不同方向投視同一蟯蟲卵時，外形輪廓不同，側(cè)面視呈不對稱的長橢圓形，兩極不等大，背面或腹面視呈對稱長橢圓形〔5〕。我們在光鏡下觀察了三種制片方法的蟯蟲卵外形。膠紙玻片法：蟲卵呈不對稱的長橢圓形，兩極不等大者96.20%(938枚/975枚)， 呈對稱長橢圓形者3.79%(37枚/975枚)；單蓋片法：蟲卵呈不對稱形者92.15%(963枚/1045枚 )，對稱形者7.84%(82枚/1045枚)；雙蓋片法：觀察180個蟲卵，全部呈對稱形。上述結(jié)果提 示，用不同方法制作的蟯蟲卵鏡下觀察時，其外形變化很大。
將三種方法制作的蟯蟲卵分別在高倍鏡下隨機測量50個，計算蟲卵的平均大小。透明膠紙法：51.94±1.71×25.13±0.30μm。單蓋片法：54.30±0.36×25.64±0.16μm。雙蓋 片法：55.31±0.36×24.69±0.27μm。結(jié)果提示，不同方法制作的蟯蟲卵鏡下觀察時，其大小略有不同，但經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析，無顯著性差異。
, http://www.www.srpcoatings.com
在高倍鏡下觀察蟯蟲卵的完好率。透明膠紙法975枚，單蓋片法1045枚，無一枚外滲、破裂 。雙蓋片法180枚中蟲卵內(nèi)容物外滲者67枚，占觀察總數(shù)的37.22%。但未見蟲卵卵殼破裂， 提示蟯蟲卵卵殼較厚。
2.2 制作方法的比較
制作蟯蟲卵玻片標本的三種方 法中，以透明膠紙法最為簡便，它是直接將含有蟯蟲卵的透明膠紙貼在載玻片上。但取材后 的膠紙貼回原玻片時，易出現(xiàn)空隙，鏡下觀察有空隙處的蟲卵呈現(xiàn)暗色折光，同時，蟯蟲卵的水份也有可能揮發(fā)。單蓋片法是在透明膠紙法的基礎(chǔ)上用中性樹膠封制而成，可以避免透明膠紙法中的不足，操作過程也比較簡便。雙蓋片法則是將蟯蟲卵保存在液體中，制作過程較前兩種復(fù)雜，蟲卵外形均呈對稱長橢圓形，蟲卵內(nèi)容物的外滲現(xiàn)象隨時間延長增多。用上述方法制作的蟯蟲卵玻片標本，用于教學(xué)實踐10余年，效果較好，其中尤以單蓋片法具有制 作簡便，效果理想，可長期保存等優(yōu)點。
3 參考文獻
1 趙慰先主編.人體寄生蟲學(xué).第一版.北京：人民衛(wèi)生出版 社，1983：676.
2 陳佩惠，等主編.人體寄生蟲學(xué)實驗技術(shù).第一版，北京：科學(xué)出版社，19 88：92.
3 郭延飛.蟯蟲卵標本制作的改進.福建醫(yī)學(xué)院學(xué)報 1985；19(2)∶110.
4 陳佩惠主編.人體寄生蟲學(xué).第四版.北京：人民衛(wèi)生出版社 1997：272 .
5 戴世忠.等.人蟯蟲卵卵殼的光鏡及掃描電鏡觀察.寄生蟲學(xué)與寄生蟲病雜志 1986；4(3)∶215., http://www.www.srpcoatings.com