nm23基因在肺癌中的表達
作者：汪筱娟 唐衛(wèi)華 張 波 趙春華 劉文君 韓培滋 王元福
單位：汪筱娟 唐衛(wèi)華 趙春華 劉文君 濟南市(250012)山東醫(yī)科大學 附屬醫(yī)院;張 波 濟南市(250031)濟南軍區(qū)總院;韓培滋 鄒平縣(272400)山東省鄒平縣人民醫(yī)院;王元福淄博市(255100)山東省淄博市八三廠醫(yī)院
關鍵詞：nm23/NDPK 肺腫瘤 癌 免疫組織化學
齊魯腫瘤雜志980310
摘 要 目的 研究nm23基因產物與肺癌臨床病理間的關系。方法 應用SABC免疫組化法，檢測69例肺癌中nm23基因產物二磷酸核苷激酶(NDPK)的表達情況。結果 nm23在肺癌中有較高表達，陽性率79.7%(55/69)，其中鱗癌100%(31/31)，腺癌71.4%(20/28)，小細胞癌40%(4/10)，在鱗癌中的表達較腺癌及小細胞癌高(p<0.05)。但nm23的表達與肺鱗癌的分化程度無關(p>0.05)，與肺鱗癌、肺腺癌及其它肺癌有無肺門或縱隔淋巴結轉移無關(p>0.05)。結論 提示肺癌的形成和轉移與多基因、多步驟的遺傳學改變有關，應將nm23基因與其他因素進行同時研究，以準確反映肺癌惡性生物學行為的重要特點。
, 百拇醫(yī)藥
nm23 Expression in Lung Cancer
Wang Xiaojuan,Tang Weihua,Zhang Bo,et al.(Dept.of Pathology,The Affiliated Hospital,Shandong Medical University,Jinan 250012)
Abstract Objective Expression of nucleoside diphosphate kinase(NDPK),a product of metastasis suppresor gene nm23,was detected in 69 cases of lung carcinoma.Methods Immunohistochemical technique was used.Results The total positive rate was 79.7%.But the nm23 protein expression has not retated to the histological grade of the squamous cell tumors of the lung and metastasis of the cancer of the lung(p<0.05).Conclusions Whether nm23 serves as a valuable marker in carcinoma of the lung need to be researched in further.
, 百拇醫(yī)藥
Key words nm23/NDPK Lung cancer Carcinoma Immunohistochemistry
腫瘤的生長轉移過程非常復雜，其發(fā)生是以瘤細胞的生物學特征為基礎，根本原因在于基因表達的改變。1988年Steeg首先從小鼠黑色素瘤中分離鑒定了nm23基因[1]，隨后在動物模型及多種腫瘤中發(fā)現，nm23基因能抑制腫瘤轉移，也能部分抑制腫瘤形成，但亦有不同報道[2,3]。本文采用免疫組化方法，檢測nm23基因產物二磷酸核苷激酶(NDPK)在肺癌中的表達，并分析該表達與肺癌分化程度和轉移的關系。
1 材料與方法
69例肺癌來自我院病理科1995～1996年手術切除標本。其中鱗癌31例、腺癌28例、小細胞癌10例。男性46人，女性23人，年齡35～75歲。鱗癌中發(fā)生轉移者25例，腺癌中發(fā)生轉移者18例，小細胞癌中發(fā)生轉移者6例。全部標本10%福爾馬林液固定，石蠟包埋。常規(guī)切片厚5μm。
, 百拇醫(yī)藥
抗NDPK/nm23多克隆抗體為SIGMA公司產品，工作濃度1：50，免疫組化為SABC法，試劑盒由武漢博士德生物公司提供。方法按說明書進行。陽性對照片亦來自博士德公司，陰性對照以PBS代替一抗。結果判定：以細胞漿、細胞膜顯棕黃色為陽性結果，陰性者胞漿無顯色。應用X2檢驗進行統(tǒng)計學處理。
2 結果
69例肺癌中陽性者多為細胞漿著色，亦有細胞膜著色或兩者均著色。nm23在肺癌中表達較高，總陽性率為79.7%(55/69)，其中鱗癌全部表達(31/31)、腺癌71.4%(20/28)、小細胞癌40%(4/10)，三者間有顯著差異(p<0.05)。nm23陽性表達與肺鱗癌的分化程度無關。肺鱗癌nm23陽性者轉移率為80.65%(25/31)，肺腺癌nm23陽性者轉移率為65%(13/20)，小細胞肺癌中有轉移者為3/4。nm23在以上三者中的表達均與轉移無關(p>0.05)。
, 百拇醫(yī)藥
3 討論
美國國立癌癥研究院以Steeg為首的一個研究小組在小鼠K-1735黑色素瘤細胞系中分離鑒定了nm23基因，并證實其與腫瘤轉移抑制有關。人類的nm23基因定位于17號染色體長臂(17q22)，有兩個亞型即nm23-H1、nm23-H2，兩者均編碼含有152個氨基酸、分子量為17KD的蛋白質，主要位于胞漿和質膜上。該蛋白與NDPK的氨基酸順序具有高度同源性，能把結合于蛋白質上的二磷酸核苷(NDP)磷酸化成三磷酸核苷(NTP)，是細胞內NTP的主要制造者，調節(jié)著細胞NTP池的大小，對細胞分裂、信號傳導及其他生長過程有重要作用。
已有的研究表明，在一些腫瘤如黑色素瘤[4]、肝癌[5]、乳腺癌[6]、膀胱癌等[7，8]，其nm23的mRNA和蛋白表達與腫瘤轉移密切相關，顯示了nm23基因作為腫瘤轉移抑制基因的特性；但在另一些腫瘤如結腸癌[2]、喉癌[9]等中，其nm23的表達水平與腫瘤是否轉移無關。應用免疫組化方法研究nm23在肺癌中的表達，發(fā)現該表達與肺癌的轉移無關，與該腫瘤的分化程度亦無關。相似的結果也見于其他作者對肺癌的研究[3，10]。提示肺癌的形成和轉移與多種因素有關。其結果還顯示nm23在肺癌的不同組織學類型中表達不同，在鱗癌中的表達高于腺癌和小細胞癌，可能說明其表達有一定的組織特異性。Lakso[4]用免疫組化方法系統(tǒng)研究小鼠器官形成早期的nm23蛋白表達，也發(fā)現不同組織中nm23的表達水平不一致[11]。
, http://www.www.srpcoatings.com
本研究支持這一觀點，nm23基因能否作為一個獨立的預后指標還須深入進行研究，必須擴大樣本含量，進行多變量分析，研究方法和試劑必須標準化。由于惡性表型的獲得來自多基因、多步驟的遺傳學改變，所以應將nm23基因與其他基因如P53，C-erbB-2等進行同步分析，以準確反映惡性腫瘤的生物學行為的重要特征。
參考文獻
[1] Steeg PS,Bevilacqua G,Kopper L,eta l.Evidence for a novel gene associated with low metastatic potential.J Natl Cancer Inst,1988,80:200.
[2] Zeng ZS,Hsu S,Zhang ZF,et al.High level of nm23-H1 gene expression is associated with local coloreted cancer progression not with metastasis.Br J Cancer,1994,70:1025.
, 百拇醫(yī)藥
[3] 王志新，高廣正，趙曉晏，等.nm蛋白在非小細胞肺癌和淋巴結的臨床意義.中國癌癥雜志，1997，7(1)：16.
[4] Florenes VA,Aamadal S,Wyklebost et al.Levels of nm23 messenger RNA in metastatic malignant melanomas:Inverse correlation to disease progression.Cancer Res,1992,52:6088.
[5] Yamaguchi A,Urano T,Goi T,et al.Expression of human nm23-H1 and nm23-H2 proteins in hepatocellular carcinoma.Cancer,1994,73(9):2280.
[6] Cropps CS,Liderean R,Leone,et al.NME1 protein expression and loss of heterozygosny mutations in primary human breast tumors.J Natl Cancer Inst,1994,861(5):1167.
, 百拇醫(yī)藥
[7] 侯建國，夏廣斌，李光輝，等.nm23基因表達與膀胱癌生物學行為的關系.中華泌尿外科雜志，1996，17(10)：605.
[8] 姚巖，路喜安，楊龍泉，等.nm23在前列腺癌中的表達與癌轉移的關系.中華泌尿外科雜志，1997，18(1)：27.
[9] Scholnick SB,Sun PC,Shaw ME,et al.Freguent loss of heterozygosity for RB,TP53,and Chromosome arm 3p,but not NME1 in squamous cell carcinomas of the supraglottic larynz.Cancer,1994,73(10):2472.
[10] 雷文東，張汝剛，閆水中，等.nm23基因在人肺中的表達及其與肺癌淋巴結轉移的關系.中華腫瘤雜志，1994，7(16)：277.
[11] Lakso M.Embryonic expression of nm23 during mouse organogenesis.Cell Growth Differ,1992,3:873.
, 百拇醫(yī)藥
單位：汪筱娟 唐衛(wèi)華 趙春華 劉文君 濟南市(250012)山東醫(yī)科大學 附屬醫(yī)院;張 波 濟南市(250031)濟南軍區(qū)總院;韓培滋 鄒平縣(272400)山東省鄒平縣人民醫(yī)院;王元福淄博市(255100)山東省淄博市八三廠醫(yī)院
關鍵詞：nm23/NDPK 肺腫瘤 癌 免疫組織化學
齊魯腫瘤雜志980310
摘 要 目的 研究nm23基因產物與肺癌臨床病理間的關系。方法 應用SABC免疫組化法，檢測69例肺癌中nm23基因產物二磷酸核苷激酶(NDPK)的表達情況。結果 nm23在肺癌中有較高表達，陽性率79.7%(55/69)，其中鱗癌100%(31/31)，腺癌71.4%(20/28)，小細胞癌40%(4/10)，在鱗癌中的表達較腺癌及小細胞癌高(p<0.05)。但nm23的表達與肺鱗癌的分化程度無關(p>0.05)，與肺鱗癌、肺腺癌及其它肺癌有無肺門或縱隔淋巴結轉移無關(p>0.05)。結論 提示肺癌的形成和轉移與多基因、多步驟的遺傳學改變有關，應將nm23基因與其他因素進行同時研究，以準確反映肺癌惡性生物學行為的重要特點。
, 百拇醫(yī)藥
nm23 Expression in Lung Cancer
Wang Xiaojuan,Tang Weihua,Zhang Bo,et al.(Dept.of Pathology,The Affiliated Hospital,Shandong Medical University,Jinan 250012)
Abstract Objective Expression of nucleoside diphosphate kinase(NDPK),a product of metastasis suppresor gene nm23,was detected in 69 cases of lung carcinoma.Methods Immunohistochemical technique was used.Results The total positive rate was 79.7%.But the nm23 protein expression has not retated to the histological grade of the squamous cell tumors of the lung and metastasis of the cancer of the lung(p<0.05).Conclusions Whether nm23 serves as a valuable marker in carcinoma of the lung need to be researched in further.
, 百拇醫(yī)藥
Key words nm23/NDPK Lung cancer Carcinoma Immunohistochemistry
腫瘤的生長轉移過程非常復雜，其發(fā)生是以瘤細胞的生物學特征為基礎，根本原因在于基因表達的改變。1988年Steeg首先從小鼠黑色素瘤中分離鑒定了nm23基因[1]，隨后在動物模型及多種腫瘤中發(fā)現，nm23基因能抑制腫瘤轉移，也能部分抑制腫瘤形成，但亦有不同報道[2,3]。本文采用免疫組化方法，檢測nm23基因產物二磷酸核苷激酶(NDPK)在肺癌中的表達，并分析該表達與肺癌分化程度和轉移的關系。
1 材料與方法
69例肺癌來自我院病理科1995～1996年手術切除標本。其中鱗癌31例、腺癌28例、小細胞癌10例。男性46人，女性23人，年齡35～75歲。鱗癌中發(fā)生轉移者25例，腺癌中發(fā)生轉移者18例，小細胞癌中發(fā)生轉移者6例。全部標本10%福爾馬林液固定，石蠟包埋。常規(guī)切片厚5μm。
, 百拇醫(yī)藥
抗NDPK/nm23多克隆抗體為SIGMA公司產品，工作濃度1：50，免疫組化為SABC法，試劑盒由武漢博士德生物公司提供。方法按說明書進行。陽性對照片亦來自博士德公司，陰性對照以PBS代替一抗。結果判定：以細胞漿、細胞膜顯棕黃色為陽性結果，陰性者胞漿無顯色。應用X2檢驗進行統(tǒng)計學處理。
2 結果
69例肺癌中陽性者多為細胞漿著色，亦有細胞膜著色或兩者均著色。nm23在肺癌中表達較高，總陽性率為79.7%(55/69)，其中鱗癌全部表達(31/31)、腺癌71.4%(20/28)、小細胞癌40%(4/10)，三者間有顯著差異(p<0.05)。nm23陽性表達與肺鱗癌的分化程度無關。肺鱗癌nm23陽性者轉移率為80.65%(25/31)，肺腺癌nm23陽性者轉移率為65%(13/20)，小細胞肺癌中有轉移者為3/4。nm23在以上三者中的表達均與轉移無關(p>0.05)。
, 百拇醫(yī)藥
3 討論
美國國立癌癥研究院以Steeg為首的一個研究小組在小鼠K-1735黑色素瘤細胞系中分離鑒定了nm23基因，并證實其與腫瘤轉移抑制有關。人類的nm23基因定位于17號染色體長臂(17q22)，有兩個亞型即nm23-H1、nm23-H2，兩者均編碼含有152個氨基酸、分子量為17KD的蛋白質，主要位于胞漿和質膜上。該蛋白與NDPK的氨基酸順序具有高度同源性，能把結合于蛋白質上的二磷酸核苷(NDP)磷酸化成三磷酸核苷(NTP)，是細胞內NTP的主要制造者，調節(jié)著細胞NTP池的大小，對細胞分裂、信號傳導及其他生長過程有重要作用。
已有的研究表明，在一些腫瘤如黑色素瘤[4]、肝癌[5]、乳腺癌[6]、膀胱癌等[7，8]，其nm23的mRNA和蛋白表達與腫瘤轉移密切相關，顯示了nm23基因作為腫瘤轉移抑制基因的特性；但在另一些腫瘤如結腸癌[2]、喉癌[9]等中，其nm23的表達水平與腫瘤是否轉移無關。應用免疫組化方法研究nm23在肺癌中的表達，發(fā)現該表達與肺癌的轉移無關，與該腫瘤的分化程度亦無關。相似的結果也見于其他作者對肺癌的研究[3，10]。提示肺癌的形成和轉移與多種因素有關。其結果還顯示nm23在肺癌的不同組織學類型中表達不同，在鱗癌中的表達高于腺癌和小細胞癌，可能說明其表達有一定的組織特異性。Lakso[4]用免疫組化方法系統(tǒng)研究小鼠器官形成早期的nm23蛋白表達，也發(fā)現不同組織中nm23的表達水平不一致[11]。
, http://www.www.srpcoatings.com
本研究支持這一觀點，nm23基因能否作為一個獨立的預后指標還須深入進行研究，必須擴大樣本含量，進行多變量分析，研究方法和試劑必須標準化。由于惡性表型的獲得來自多基因、多步驟的遺傳學改變，所以應將nm23基因與其他基因如P53，C-erbB-2等進行同步分析，以準確反映惡性腫瘤的生物學行為的重要特征。
參考文獻
[1] Steeg PS,Bevilacqua G,Kopper L,eta l.Evidence for a novel gene associated with low metastatic potential.J Natl Cancer Inst,1988,80:200.
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, 百拇醫(yī)藥
[3] 王志新，高廣正，趙曉晏，等.nm蛋白在非小細胞肺癌和淋巴結的臨床意義.中國癌癥雜志，1997，7(1)：16.
[4] Florenes VA,Aamadal S,Wyklebost et al.Levels of nm23 messenger RNA in metastatic malignant melanomas:Inverse correlation to disease progression.Cancer Res,1992,52:6088.
[5] Yamaguchi A,Urano T,Goi T,et al.Expression of human nm23-H1 and nm23-H2 proteins in hepatocellular carcinoma.Cancer,1994,73(9):2280.
[6] Cropps CS,Liderean R,Leone,et al.NME1 protein expression and loss of heterozygosny mutations in primary human breast tumors.J Natl Cancer Inst,1994,861(5):1167.
, 百拇醫(yī)藥
[7] 侯建國，夏廣斌，李光輝，等.nm23基因表達與膀胱癌生物學行為的關系.中華泌尿外科雜志，1996，17(10)：605.
[8] 姚巖，路喜安，楊龍泉，等.nm23在前列腺癌中的表達與癌轉移的關系.中華泌尿外科雜志，1997，18(1)：27.
[9] Scholnick SB,Sun PC,Shaw ME,et al.Freguent loss of heterozygosity for RB,TP53,and Chromosome arm 3p,but not NME1 in squamous cell carcinomas of the supraglottic larynz.Cancer,1994,73(10):2472.
[10] 雷文東，張汝剛，閆水中，等.nm23基因在人肺中的表達及其與肺癌淋巴結轉移的關系.中華腫瘤雜志，1994，7(16)：277.
[11] Lakso M.Embryonic expression of nm23 during mouse organogenesis.Cell Growth Differ,1992,3:873.
, 百拇醫(yī)藥