逐瘀法對(duì)血瘀證血清內(nèi)皮素影響的實(shí)驗(yàn)研究
作者：何海菊 付娟 付津 劉洪濤 許妙如 柴霞 指導(dǎo)：張洪義
單位：天津中醫(yī)學(xué)院 300193
關(guān)鍵詞：血瘀證；逐瘀法；內(nèi)皮素；逐瘀生新方
天津中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)000126 摘 要 目 的 血瘀證涉及臨床各科多種疾病，活血化瘀法、方、藥也為臨床治療多種疾病提供了有效措施。方法通過(guò)血瘀證的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，對(duì)我們使用的經(jīng)驗(yàn)方治療血瘀證進(jìn)行觀察、研究、探討血瘀證及其治療過(guò)程對(duì)內(nèi)皮素變化的影響，從而進(jìn)一步明確血瘀證及活血化瘀法作用的機(jī)理。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明1.典型的血瘀證伴有異常的內(nèi)皮素升高。2.逐瘀生新方能使血瘀證家兔血清內(nèi)皮素含量下降。結(jié)論活血化瘀法能調(diào)整動(dòng)物機(jī)體狀態(tài)，降低血清內(nèi)皮素(ET)含量，以保護(hù)血管內(nèi)皮細(xì)胞及其功能，從而改善血瘀證。
中圖分類(lèi)號(hào)：R255.7 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A
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文章編號(hào)：1005-7145(2000)01-0042-04
血瘀是血液運(yùn)行異常的主要病理改變之一，它與多種疾病的發(fā)生，發(fā)展都有重要關(guān)系。如能對(duì)血瘀證的發(fā)生、發(fā)展機(jī)理有所認(rèn)識(shí)，則將為很多疾病的病理生理學(xué)研究提供線(xiàn)索；通過(guò)活血化瘀法機(jī)理的研究也可為研究中醫(yī)組方原理提供依據(jù)。因此血瘀證和活血化瘀法機(jī)理的進(jìn)一步研究已成為當(dāng)今治療臨床各科疾病的重要課題。
內(nèi)皮細(xì)胞的完整性對(duì)維持循環(huán)系統(tǒng)的正常功能有重要意義，當(dāng)內(nèi)皮細(xì)胞損傷時(shí)，血管壁膠原裸露，可激活凝血系統(tǒng)，誘發(fā)血小板聚集、釋放反應(yīng)。手術(shù)造成的血管損傷，激活血小板和血液凝固系統(tǒng)，形成血栓，并釋放凝血酶等活性物質(zhì)。凝血酶是內(nèi)皮素(ET)基本表達(dá)和釋放的激動(dòng)劑。
本實(shí)驗(yàn)以?xún)?nèi)皮素(ET)(內(nèi)皮素為21氨基酸的生物活性多肽物質(zhì))為血管內(nèi)皮細(xì)胞功能受損指標(biāo)，觀察血清內(nèi)皮素與血瘀證的關(guān)系，同時(shí)觀察以逐瘀生新方為代表的活血化瘀法對(duì)血瘀證的治療作用在內(nèi)皮素方面的影響。
, 百拇醫(yī)藥
1 材料與方法
1.1 材料
動(dòng)物：日本純種大耳白家兔。體重2.0～2.5Kg；雄性。
藥物：
①逐瘀生新方：五靈脂、當(dāng)歸、川芎、桃仁、丹皮、赤芍、延胡索、紅花、川牛膝、莪術(shù)。上10味各等分，加工制成1：1溶液〈每毫升含生藥1克〉，加蓋消毒，冷藏備用。
②3%戊巴比妥鈉
1.2 方法
1) 動(dòng)物分組：將家兔隨機(jī)分成2組，每組11只，分別為血瘀證模型組和逐瘀法中藥治療組。
2) 造模：“腸粘連型血瘀型法”制模[1]
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3) 藥物投給：
逐瘀法中藥治療組：應(yīng)用100%濃度之逐瘀生新方湯劑從造模后第一日起按相應(yīng)時(shí)間給家兔灌喂，10ml/kg體重，每日一次。
血瘀證模型組：從造模后第一日起按相應(yīng)時(shí)間和劑量給予生理鹽水灌喂。全部動(dòng)物共連續(xù)給藥10天。
4) 檢測(cè)方法：
血清內(nèi)皮素(ET-1)采用放射免疫分析法(RIA)[2]測(cè)定。
5) 觀測(cè)指標(biāo)及方法：
①腸粘連面積、粘連發(fā)生率、粘連程度、平均粘連處；
于造模后第十天剖殺家兔，并計(jì)算血瘀證模型組與逐瘀法中藥治療組(以下簡(jiǎn)稱(chēng)中藥治療組)的腸粘連面積，粘連發(fā)生率，粘連程度、平均粘連處[3]。
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②血清內(nèi)皮素
分別于造模前、造模后第一天、第五天、第十天經(jīng)家兔耳緣靜脈取血，分離出血清，測(cè)定ET-1含量。
2 結(jié)果分析
表1 實(shí)驗(yàn)家兔腸粘連發(fā)生率比較 組別
動(dòng)物數(shù)量
粘連發(fā)生數(shù)量
粘連發(fā)生率
血瘀證模型組
9
9
100%
中藥治療組
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11
7
64%*
*P〈0.05
從表1可見(jiàn)，中藥治療組腸粘連發(fā)生率明顯低于血瘀證模型組。
實(shí)驗(yàn)對(duì)腸粘連致密程度的影響：根據(jù)《中藥藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)》記載粘連程度分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)實(shí)驗(yàn)家兔腸粘連程度進(jìn)行分級(jí)評(píng)定：“+”單處粘連，質(zhì)脆，無(wú)法取標(biāo)本：“++”單處粘連，牢固，易取標(biāo)本：“+++”二處粘連，牢固易取標(biāo)本：“++++”三處以上粘連，牢固，易取標(biāo)本。
表2 實(shí)驗(yàn)家兔腸粘連程度分級(jí)評(píng)定 組別
動(dòng)物數(shù)量
粘連程度
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0
+
++
+++
++++
血瘀模型組
9
0
0
1
4
4
中藥治療組
11
, 百拇醫(yī)藥
0
0
5
2
0
實(shí)驗(yàn)結(jié)果：
第一、上述手術(shù)方法所致的腹膜損傷，足以引起實(shí)驗(yàn)動(dòng)物腹腔內(nèi)粘連的發(fā)生。血瘀證模型組動(dòng)物大部分發(fā)生粘連。粘連多發(fā)生于闌尾切口或切口對(duì)側(cè)與臨近小腸之間，有時(shí)上述部位與臨近系膜粘連；個(gè)別發(fā)生闌尾切口與網(wǎng)尾膜切口與網(wǎng)膜之間粘連。無(wú)論血瘀證模型組和中藥治療組，腹部切口均愈合良好。
第二、術(shù)后24小時(shí)開(kāi)始給予100%濃度的逐瘀生新方湯劑，能明顯減低粘連發(fā)生率，粘連程度也明顯降低。表3 實(shí)驗(yàn)家兔平均腸粘連處數(shù)及粘連面積的比較面積的比較(
±S)
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平均粘連面積根據(jù)辛普生計(jì)算公式：
面積=(b-a)/b{f(a)+4f[(a+b)/2]+f(b)} 組 別
動(dòng)物數(shù)量
平均粘連處數(shù)
平均粘連面積(mm2)
血瘀證模型組
9
2.33±0.71
614.31±241.43
中藥治療組
11
, 百拇醫(yī)藥
0.82±0.75*
232.63±133.31*
*(P<0.01)
經(jīng)檢驗(yàn)，中藥治療組的平均粘連處數(shù)及平均粘連面積均明顯低于血瘀證模型組。
表4 造模前血瘀證模型組與中藥治療組血清ET-1指標(biāo)比較
(±S) 血瘀證模型組
中藥治療組
ET-1(pg/ml)
15.19±0.82
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14.9±1.05
經(jīng)檢驗(yàn)，造模前血瘀證模型組與中藥治療組的指標(biāo)總體方差相等。表5 造模前后家兔血清ET-1指標(biāo)變化比較(±S) 造模前
造模后
ET-1(pg/ml)
15.03±0.94
16.55±1.07*
*與造模前比較P〈0.01
造模后血清ET-1明顯升高，且差別顯著。
表6 造模后血瘀證模型組與中藥治療組ET-1的比較(±S)(單位：ET-1pg/ml) 第五天
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第十天
模型組
中藥組
模型組
中藥組
ET-1 15.23±0.78
14.23±0.85*
14.52±0.83
13.51±0.87*
*P<0.05 **P<0.01
表6示造模后第五天，第十天ET-1中藥治療組較血瘀證模型組降低。
, 百拇醫(yī)藥
3 討論
3.1 血瘀證與內(nèi)皮素
近年來(lái)，隨著活血化瘀藥物應(yīng)用研究的不斷深入，已從血液動(dòng)力學(xué)，微循環(huán)，病理生理、生物化學(xué)及細(xì)胞、分子生物學(xué)等方面，對(duì)血瘀證的成因作了多方面的研究。有觀點(diǎn)認(rèn)為血瘀證存在高凝狀態(tài)。高凝狀態(tài)是指疾病在發(fā)展過(guò)程中，影響了機(jī)體的凝血機(jī)制，使凝血因素如血小板激活，各種凝血因子及纖維蛋白元增加，而抗凝因素如抗凝血酶Ⅲ降低，纖溶活力減弱等，造成凝血功能高于抗凝功能，導(dǎo)致血液處于一種高凝狀態(tài)，粘稠度增加， 運(yùn)動(dòng)受阻，繼而形成血栓，可栓塞于組織和臟器，成為致病因素，可繼發(fā)于多種疾病�？梢�(jiàn)高凝狀態(tài)從微觀上更具體的解釋了瘀血的形成機(jī)理，實(shí)際上瘀血就是血液中凝血與抗凝機(jī)制的失衡所致。以上觀點(diǎn)，從血管壁的因素考慮較少。本實(shí)驗(yàn)從血管受損，血管內(nèi)皮細(xì)胞的分泌功能變化等因素，來(lái)考察血瘀證的機(jī)理，通過(guò)內(nèi)皮素的測(cè)定，來(lái)反映血瘀證是否有血管內(nèi)皮細(xì)胞功能的異常。
血管內(nèi)皮細(xì)胞具有多種生理功能，參與機(jī)體的凝血、免疫、物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)和生物活性物質(zhì)釋放等主要的生命活動(dòng)。血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷已成為許多疾病發(fā)生、發(fā)展的基本病理過(guò)程，特別表現(xiàn)在血管性疾病中。內(nèi)皮細(xì)胞的存在為維持正常血液流動(dòng)狀態(tài)所必需，它的損傷是血管病變的始動(dòng)因素，[4]而作為反映血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷特異標(biāo)志之一的ET則是迄今發(fā)現(xiàn)的作用最強(qiáng)、維持最久的縮血管物質(zhì)，其收縮血管作用效應(yīng)至少是血管緊張素I的10倍。
, 百拇醫(yī)藥
內(nèi)皮素分布于全身各臟器中，影響心血管的活動(dòng)和其他臟器的功能，在心、腦、腎、肺等疾病過(guò)程中可能都有重要意義。一般認(rèn)為血漿中的內(nèi)皮素來(lái)自血管內(nèi)皮細(xì)胞。在正常生理狀態(tài)下，血漿內(nèi)皮素濃度極低，但在某些刺激因子作用下，如缺血、缺氧可以刺激前內(nèi)皮素原的轉(zhuǎn)錄，促進(jìn)內(nèi)皮素的釋放。內(nèi)皮素可直接收縮血管，使外周阻力增加及通過(guò)神經(jīng)內(nèi)分泌作用，刺激兒茶酚胺、醛固酮、心鈉素和P物質(zhì)的釋放，使血壓升高；其可使腎小球基底膜，特別是系膜細(xì)胞收縮，使系膜細(xì)胞和血管平滑肌增殖，從而可導(dǎo)致腎小球的慢性損傷。
現(xiàn)代醫(yī)學(xué)已表明，血瘀狀態(tài)常為機(jī)體整體水平上宏觀結(jié)構(gòu)和功能變化的某種局部的、具體的形態(tài)學(xué)改變，認(rèn)為瘀血的形成與血液成份、血流狀態(tài)、血管壁等病理變化密切相關(guān)。
本實(shí)驗(yàn)主要探討血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷與血瘀證的關(guān)系。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，血瘀證模型組血清內(nèi)皮素含量明顯高于非血瘀證模型組，說(shuō)明血瘀證確實(shí)存在血清內(nèi)皮素的升高；內(nèi)皮細(xì)胞功能異常，可能參與了血瘀證的形成，也是血瘀證產(chǎn)生的病理、生理基礎(chǔ)之一。
, 百拇醫(yī)藥
血瘀證對(duì)內(nèi)皮素增加的可能機(jī)制主要有：①血栓的形成：造模后形成的血管損傷，激活血小板和血液凝固系統(tǒng)，形成血栓，并釋放凝血酶等活性物質(zhì)。凝血酶是ET基因表達(dá)和釋放的激動(dòng)劑，可以劑量依賴(lài)和時(shí)間依賴(lài)地刺激ET的合成與分泌。②局部組織缺血、缺氧，氧自由基等大量釋放，可能刺激了ET的基因表達(dá)和ET的釋放，是ET的正相調(diào)節(jié)機(jī)制。
總之，造成中醫(yī)血瘀證的本質(zhì)可能是多方面的，有血流因素、血液成份的改變，但不能忽視血管壁的因素，即血管內(nèi)皮細(xì)胞的損傷。血清內(nèi)皮素的測(cè)定，可作為血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷的指標(biāo)之一。而且血流因素、血液成份改變與血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷在造成血瘀證時(shí)，三者有密切關(guān)系，如血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷引起血小板凝集而釋放的血漿凝血活素使血液凝固成份增加，血栓易形成，而導(dǎo)致血流緩慢，因此，三者皆是致瘀因素[5]。
3.2 逐瘀法的保護(hù)血管內(nèi)皮細(xì)胞的作用
3.2.1 逐瘀生新方為導(dǎo)師多年教學(xué)、科研及臨床實(shí)踐的基礎(chǔ)上依據(jù)清代王清任的“通竅活血湯”、“膈下逐瘀湯”、“血府逐瘀湯”加減綜合化裁而成。方劑中藥物，基本由活血化瘀藥物組成，包括：五靈脂、當(dāng)歸、川芎、桃仁、丹皮、赤芍、延胡索、紅花、川牛膝，莪術(shù)十味有代表性之活血化瘀藥物，故以此方用于逐瘀法的研究。方中①五靈脂“通利血脈”(《開(kāi)寶本草》)“行血止血”(《本草衍義補(bǔ)遺》)②當(dāng)歸“活血運(yùn)行周身”(《藥品化義》)“破惡血，養(yǎng)新血，及主癥癖”(《日華子本草》)③川芎：“行氣開(kāi)郁”“血中氣藥也”(《本草綱目》)④桃仁：“主瘀血，血閉瘕”(《本經(jīng)》)“破癥瘕，通月水”⑤丹皮：“除堅(jiān)、瘀血留舍腸胃”(《本經(jīng)》)“治腸胃積血，衄血、吐血”(《珍珠囊》)⑥赤芍：“行血、破瘀、散血塊、止腹痛”(《滇南本草》)⑦延胡索：“破癥癖撲損瘀血”，(《大明本草》)⑧紅花：“活血，潤(rùn)燥、止痛、散腫、通經(jīng)”⑨川牛膝：“破癥結(jié)，排膿，止痛”(《日華子本草》)
莪術(shù)：破積聚惡血”(《本草通言》)。以上諸藥以五靈脂、桃仁、紅花、破血逐瘀，配合當(dāng)歸，川芎、赤芍活血養(yǎng)血，使瘀血去而不傷血，川牛膝破瘀通經(jīng)，引瘀血下行，丹皮清熱涼血，活血化瘀，莪術(shù)、延胡索行氣止痛，增強(qiáng)行瘀之力，諸藥配合，達(dá)逐瘀活血、生新的目的。
, 百拇醫(yī)藥
3.2.2 逐瘀生新方顯著降低家兔血清ET表明：逐瘀法能有效地保護(hù)血管內(nèi)皮細(xì)胞及其凝血、免疫、物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)和生物活性物質(zhì)釋放等多種生理功能，從而維持、恢復(fù)血管壁的完整以發(fā)揮其正常的生理效應(yīng)。造成血管內(nèi)血流不暢或停滯(瘀血)的主要原因有三：即心臟性，如心臟泵力不足；血管性，如血管硬化，內(nèi)腔狹窄；血液性，如血液流變性改變，血液粘濃聚凝增高。血瘀證時(shí)，這三方面相互作用，互為因果。本實(shí)驗(yàn)僅就其中一個(gè)方面進(jìn)行討論，因此在探討血瘀證的實(shí)質(zhì)方面，還需要作深入的研究工作。
參考文獻(xiàn)：
1，李儀奎.第一版.上�？茖W(xué)技術(shù)出版社.1991：143
2，鐘福蓀等.過(guò)氧化脂質(zhì)的硫代巴比妥酸比色法.臨床檢驗(yàn)雜志1986.4(3)：129-130
3，徐翠薇.計(jì)算方法引論，第一版.北京：北京高等教育出版社985.88
4，吳其夏.體液因素和血液循環(huán)病理生理學(xué)，北京醫(yī)科大學(xué)、中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué)聯(lián)合出版.1991年第一版
5，石志蕓等.血瘀證患者血漿內(nèi)皮素測(cè)定的臨床意義.遼寧中醫(yī)雜志.1996(10)：435-437
收稿日期：1998-10-14, 百拇醫(yī)藥
單位：天津中醫(yī)學(xué)院 300193
關(guān)鍵詞：血瘀證；逐瘀法；內(nèi)皮素；逐瘀生新方
天津中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)000126 摘 要 目 的 血瘀證涉及臨床各科多種疾病，活血化瘀法、方、藥也為臨床治療多種疾病提供了有效措施。方法通過(guò)血瘀證的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，對(duì)我們使用的經(jīng)驗(yàn)方治療血瘀證進(jìn)行觀察、研究、探討血瘀證及其治療過(guò)程對(duì)內(nèi)皮素變化的影響，從而進(jìn)一步明確血瘀證及活血化瘀法作用的機(jī)理。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明1.典型的血瘀證伴有異常的內(nèi)皮素升高。2.逐瘀生新方能使血瘀證家兔血清內(nèi)皮素含量下降。結(jié)論活血化瘀法能調(diào)整動(dòng)物機(jī)體狀態(tài)，降低血清內(nèi)皮素(ET)含量，以保護(hù)血管內(nèi)皮細(xì)胞及其功能，從而改善血瘀證。
中圖分類(lèi)號(hào)：R255.7 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A
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文章編號(hào)：1005-7145(2000)01-0042-04
血瘀是血液運(yùn)行異常的主要病理改變之一，它與多種疾病的發(fā)生，發(fā)展都有重要關(guān)系。如能對(duì)血瘀證的發(fā)生、發(fā)展機(jī)理有所認(rèn)識(shí)，則將為很多疾病的病理生理學(xué)研究提供線(xiàn)索；通過(guò)活血化瘀法機(jī)理的研究也可為研究中醫(yī)組方原理提供依據(jù)。因此血瘀證和活血化瘀法機(jī)理的進(jìn)一步研究已成為當(dāng)今治療臨床各科疾病的重要課題。
內(nèi)皮細(xì)胞的完整性對(duì)維持循環(huán)系統(tǒng)的正常功能有重要意義，當(dāng)內(nèi)皮細(xì)胞損傷時(shí)，血管壁膠原裸露，可激活凝血系統(tǒng)，誘發(fā)血小板聚集、釋放反應(yīng)。手術(shù)造成的血管損傷，激活血小板和血液凝固系統(tǒng)，形成血栓，并釋放凝血酶等活性物質(zhì)。凝血酶是內(nèi)皮素(ET)基本表達(dá)和釋放的激動(dòng)劑。
本實(shí)驗(yàn)以?xún)?nèi)皮素(ET)(內(nèi)皮素為21氨基酸的生物活性多肽物質(zhì))為血管內(nèi)皮細(xì)胞功能受損指標(biāo)，觀察血清內(nèi)皮素與血瘀證的關(guān)系，同時(shí)觀察以逐瘀生新方為代表的活血化瘀法對(duì)血瘀證的治療作用在內(nèi)皮素方面的影響。
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1 材料與方法
1.1 材料
動(dòng)物：日本純種大耳白家兔。體重2.0～2.5Kg；雄性。
藥物：
①逐瘀生新方：五靈脂、當(dāng)歸、川芎、桃仁、丹皮、赤芍、延胡索、紅花、川牛膝、莪術(shù)。上10味各等分，加工制成1：1溶液〈每毫升含生藥1克〉，加蓋消毒，冷藏備用。
②3%戊巴比妥鈉
1.2 方法
1) 動(dòng)物分組：將家兔隨機(jī)分成2組，每組11只，分別為血瘀證模型組和逐瘀法中藥治療組。
2) 造模：“腸粘連型血瘀型法”制模[1]
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3) 藥物投給：
逐瘀法中藥治療組：應(yīng)用100%濃度之逐瘀生新方湯劑從造模后第一日起按相應(yīng)時(shí)間給家兔灌喂，10ml/kg體重，每日一次。
血瘀證模型組：從造模后第一日起按相應(yīng)時(shí)間和劑量給予生理鹽水灌喂。全部動(dòng)物共連續(xù)給藥10天。
4) 檢測(cè)方法：
血清內(nèi)皮素(ET-1)采用放射免疫分析法(RIA)[2]測(cè)定。
5) 觀測(cè)指標(biāo)及方法：
①腸粘連面積、粘連發(fā)生率、粘連程度、平均粘連處；
于造模后第十天剖殺家兔，并計(jì)算血瘀證模型組與逐瘀法中藥治療組(以下簡(jiǎn)稱(chēng)中藥治療組)的腸粘連面積，粘連發(fā)生率，粘連程度、平均粘連處[3]。
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②血清內(nèi)皮素
分別于造模前、造模后第一天、第五天、第十天經(jīng)家兔耳緣靜脈取血，分離出血清，測(cè)定ET-1含量。
2 結(jié)果分析
表1 實(shí)驗(yàn)家兔腸粘連發(fā)生率比較 組別
動(dòng)物數(shù)量
粘連發(fā)生數(shù)量
粘連發(fā)生率
血瘀證模型組
9
9
100%
中藥治療組
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11
7
64%*
*P〈0.05
從表1可見(jiàn)，中藥治療組腸粘連發(fā)生率明顯低于血瘀證模型組。
實(shí)驗(yàn)對(duì)腸粘連致密程度的影響：根據(jù)《中藥藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)》記載粘連程度分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)實(shí)驗(yàn)家兔腸粘連程度進(jìn)行分級(jí)評(píng)定：“+”單處粘連，質(zhì)脆，無(wú)法取標(biāo)本：“++”單處粘連，牢固，易取標(biāo)本：“+++”二處粘連，牢固易取標(biāo)本：“++++”三處以上粘連，牢固，易取標(biāo)本。
表2 實(shí)驗(yàn)家兔腸粘連程度分級(jí)評(píng)定 組別
動(dòng)物數(shù)量
粘連程度
, http://www.www.srpcoatings.com
0
+
++
+++
++++
血瘀模型組
9
0
0
1
4
4
中藥治療組
11
, 百拇醫(yī)藥
0
0
5
2
0
實(shí)驗(yàn)結(jié)果：
第一、上述手術(shù)方法所致的腹膜損傷，足以引起實(shí)驗(yàn)動(dòng)物腹腔內(nèi)粘連的發(fā)生。血瘀證模型組動(dòng)物大部分發(fā)生粘連。粘連多發(fā)生于闌尾切口或切口對(duì)側(cè)與臨近小腸之間，有時(shí)上述部位與臨近系膜粘連；個(gè)別發(fā)生闌尾切口與網(wǎng)尾膜切口與網(wǎng)膜之間粘連。無(wú)論血瘀證模型組和中藥治療組，腹部切口均愈合良好。
第二、術(shù)后24小時(shí)開(kāi)始給予100%濃度的逐瘀生新方湯劑，能明顯減低粘連發(fā)生率，粘連程度也明顯降低。表3 實(shí)驗(yàn)家兔平均腸粘連處數(shù)及粘連面積的比較面積的比較(
±S), 百拇醫(yī)藥
平均粘連面積根據(jù)辛普生計(jì)算公式：
面積=(b-a)/b{f(a)+4f[(a+b)/2]+f(b)} 組 別
動(dòng)物數(shù)量
平均粘連處數(shù)
平均粘連面積(mm2)
血瘀證模型組
9
2.33±0.71
614.31±241.43
中藥治療組
11
, 百拇醫(yī)藥
0.82±0.75*
232.63±133.31*
*(P<0.01)
經(jīng)檢驗(yàn)，中藥治療組的平均粘連處數(shù)及平均粘連面積均明顯低于血瘀證模型組。
表4 造模前血瘀證模型組與中藥治療組血清ET-1指標(biāo)比較
(
±S) 血瘀證模型組中藥治療組
ET-1(pg/ml)
15.19±0.82
, 百拇醫(yī)藥
14.9±1.05
經(jīng)檢驗(yàn)，造模前血瘀證模型組與中藥治療組的指標(biāo)總體方差相等。表5 造模前后家兔血清ET-1指標(biāo)變化比較(
±S) 造模前造模后
ET-1(pg/ml)
15.03±0.94
16.55±1.07*
*與造模前比較P〈0.01
造模后血清ET-1明顯升高，且差別顯著。
表6 造模后血瘀證模型組與中藥治療組ET-1的比較(
±S)(單位：ET-1pg/ml) 第五天, http://www.www.srpcoatings.com
第十天
模型組
中藥組
模型組
中藥組
ET-1 15.23±0.78
14.23±0.85*
14.52±0.83
13.51±0.87*
*P<0.05 **P<0.01
表6示造模后第五天，第十天ET-1中藥治療組較血瘀證模型組降低。
, 百拇醫(yī)藥
3 討論
3.1 血瘀證與內(nèi)皮素
近年來(lái)，隨著活血化瘀藥物應(yīng)用研究的不斷深入，已從血液動(dòng)力學(xué)，微循環(huán)，病理生理、生物化學(xué)及細(xì)胞、分子生物學(xué)等方面，對(duì)血瘀證的成因作了多方面的研究。有觀點(diǎn)認(rèn)為血瘀證存在高凝狀態(tài)。高凝狀態(tài)是指疾病在發(fā)展過(guò)程中，影響了機(jī)體的凝血機(jī)制，使凝血因素如血小板激活，各種凝血因子及纖維蛋白元增加，而抗凝因素如抗凝血酶Ⅲ降低，纖溶活力減弱等，造成凝血功能高于抗凝功能，導(dǎo)致血液處于一種高凝狀態(tài)，粘稠度增加， 運(yùn)動(dòng)受阻，繼而形成血栓，可栓塞于組織和臟器，成為致病因素，可繼發(fā)于多種疾病�？梢�(jiàn)高凝狀態(tài)從微觀上更具體的解釋了瘀血的形成機(jī)理，實(shí)際上瘀血就是血液中凝血與抗凝機(jī)制的失衡所致。以上觀點(diǎn)，從血管壁的因素考慮較少。本實(shí)驗(yàn)從血管受損，血管內(nèi)皮細(xì)胞的分泌功能變化等因素，來(lái)考察血瘀證的機(jī)理，通過(guò)內(nèi)皮素的測(cè)定，來(lái)反映血瘀證是否有血管內(nèi)皮細(xì)胞功能的異常。
血管內(nèi)皮細(xì)胞具有多種生理功能，參與機(jī)體的凝血、免疫、物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)和生物活性物質(zhì)釋放等主要的生命活動(dòng)。血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷已成為許多疾病發(fā)生、發(fā)展的基本病理過(guò)程，特別表現(xiàn)在血管性疾病中。內(nèi)皮細(xì)胞的存在為維持正常血液流動(dòng)狀態(tài)所必需，它的損傷是血管病變的始動(dòng)因素，[4]而作為反映血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷特異標(biāo)志之一的ET則是迄今發(fā)現(xiàn)的作用最強(qiáng)、維持最久的縮血管物質(zhì)，其收縮血管作用效應(yīng)至少是血管緊張素I的10倍。
, 百拇醫(yī)藥
內(nèi)皮素分布于全身各臟器中，影響心血管的活動(dòng)和其他臟器的功能，在心、腦、腎、肺等疾病過(guò)程中可能都有重要意義。一般認(rèn)為血漿中的內(nèi)皮素來(lái)自血管內(nèi)皮細(xì)胞。在正常生理狀態(tài)下，血漿內(nèi)皮素濃度極低，但在某些刺激因子作用下，如缺血、缺氧可以刺激前內(nèi)皮素原的轉(zhuǎn)錄，促進(jìn)內(nèi)皮素的釋放。內(nèi)皮素可直接收縮血管，使外周阻力增加及通過(guò)神經(jīng)內(nèi)分泌作用，刺激兒茶酚胺、醛固酮、心鈉素和P物質(zhì)的釋放，使血壓升高；其可使腎小球基底膜，特別是系膜細(xì)胞收縮，使系膜細(xì)胞和血管平滑肌增殖，從而可導(dǎo)致腎小球的慢性損傷。
現(xiàn)代醫(yī)學(xué)已表明，血瘀狀態(tài)常為機(jī)體整體水平上宏觀結(jié)構(gòu)和功能變化的某種局部的、具體的形態(tài)學(xué)改變，認(rèn)為瘀血的形成與血液成份、血流狀態(tài)、血管壁等病理變化密切相關(guān)。
本實(shí)驗(yàn)主要探討血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷與血瘀證的關(guān)系。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，血瘀證模型組血清內(nèi)皮素含量明顯高于非血瘀證模型組，說(shuō)明血瘀證確實(shí)存在血清內(nèi)皮素的升高；內(nèi)皮細(xì)胞功能異常，可能參與了血瘀證的形成，也是血瘀證產(chǎn)生的病理、生理基礎(chǔ)之一。
, 百拇醫(yī)藥
血瘀證對(duì)內(nèi)皮素增加的可能機(jī)制主要有：①血栓的形成：造模后形成的血管損傷，激活血小板和血液凝固系統(tǒng)，形成血栓，并釋放凝血酶等活性物質(zhì)。凝血酶是ET基因表達(dá)和釋放的激動(dòng)劑，可以劑量依賴(lài)和時(shí)間依賴(lài)地刺激ET的合成與分泌。②局部組織缺血、缺氧，氧自由基等大量釋放，可能刺激了ET的基因表達(dá)和ET的釋放，是ET的正相調(diào)節(jié)機(jī)制。
總之，造成中醫(yī)血瘀證的本質(zhì)可能是多方面的，有血流因素、血液成份的改變，但不能忽視血管壁的因素，即血管內(nèi)皮細(xì)胞的損傷。血清內(nèi)皮素的測(cè)定，可作為血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷的指標(biāo)之一。而且血流因素、血液成份改變與血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷在造成血瘀證時(shí)，三者有密切關(guān)系，如血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷引起血小板凝集而釋放的血漿凝血活素使血液凝固成份增加，血栓易形成，而導(dǎo)致血流緩慢，因此，三者皆是致瘀因素[5]。
3.2 逐瘀法的保護(hù)血管內(nèi)皮細(xì)胞的作用
3.2.1 逐瘀生新方為導(dǎo)師多年教學(xué)、科研及臨床實(shí)踐的基礎(chǔ)上依據(jù)清代王清任的“通竅活血湯”、“膈下逐瘀湯”、“血府逐瘀湯”加減綜合化裁而成。方劑中藥物，基本由活血化瘀藥物組成，包括：五靈脂、當(dāng)歸、川芎、桃仁、丹皮、赤芍、延胡索、紅花、川牛膝，莪術(shù)十味有代表性之活血化瘀藥物，故以此方用于逐瘀法的研究。方中①五靈脂“通利血脈”(《開(kāi)寶本草》)“行血止血”(《本草衍義補(bǔ)遺》)②當(dāng)歸“活血運(yùn)行周身”(《藥品化義》)“破惡血，養(yǎng)新血，及主癥癖”(《日華子本草》)③川芎：“行氣開(kāi)郁”“血中氣藥也”(《本草綱目》)④桃仁：“主瘀血，血閉瘕”(《本經(jīng)》)“破癥瘕，通月水”⑤丹皮：“除堅(jiān)、瘀血留舍腸胃”(《本經(jīng)》)“治腸胃積血，衄血、吐血”(《珍珠囊》)⑥赤芍：“行血、破瘀、散血塊、止腹痛”(《滇南本草》)⑦延胡索：“破癥癖撲損瘀血”，(《大明本草》)⑧紅花：“活血，潤(rùn)燥、止痛、散腫、通經(jīng)”⑨川牛膝：“破癥結(jié)，排膿，止痛”(《日華子本草》)
莪術(shù)：破積聚惡血”(《本草通言》)。以上諸藥以五靈脂、桃仁、紅花、破血逐瘀，配合當(dāng)歸，川芎、赤芍活血養(yǎng)血，使瘀血去而不傷血，川牛膝破瘀通經(jīng)，引瘀血下行，丹皮清熱涼血，活血化瘀，莪術(shù)、延胡索行氣止痛，增強(qiáng)行瘀之力，諸藥配合，達(dá)逐瘀活血、生新的目的。, 百拇醫(yī)藥
3.2.2 逐瘀生新方顯著降低家兔血清ET表明：逐瘀法能有效地保護(hù)血管內(nèi)皮細(xì)胞及其凝血、免疫、物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)和生物活性物質(zhì)釋放等多種生理功能，從而維持、恢復(fù)血管壁的完整以發(fā)揮其正常的生理效應(yīng)。造成血管內(nèi)血流不暢或停滯(瘀血)的主要原因有三：即心臟性，如心臟泵力不足；血管性，如血管硬化，內(nèi)腔狹窄；血液性，如血液流變性改變，血液粘濃聚凝增高。血瘀證時(shí)，這三方面相互作用，互為因果。本實(shí)驗(yàn)僅就其中一個(gè)方面進(jìn)行討論，因此在探討血瘀證的實(shí)質(zhì)方面，還需要作深入的研究工作。
參考文獻(xiàn)：
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5，石志蕓等.血瘀證患者血漿內(nèi)皮素測(cè)定的臨床意義.遼寧中醫(yī)雜志.1996(10)：435-437
收稿日期：1998-10-14, 百拇醫(yī)藥