實驗性腦缺血再灌注大鼠外周血CINC的變化
作者：曹學兵 孫圣剛 童萼塘 黃懷鈞 楊明山
單位：曹學兵(同濟醫(yī)科大學附屬協(xié)和醫(yī)院神經內科 430022)；孫圣剛(同濟醫(yī)科大學附屬協(xié)和醫(yī)院神經內科 430022)；童萼塘(同濟醫(yī)科大學附屬協(xié)和醫(yī)院神經內科 430022)；黃懷鈞(湖北醫(yī)科大學附屬第二醫(yī)院神經內科)；楊明山(同濟醫(yī)科大學附屬同濟醫(yī)院 神經內科)
關鍵詞：細胞因子介導的中性粒細胞化學吸附劑；髓質過氧化物；酶；腦缺血；再灌注
腦與神經疾病雜志000206 摘 要 目的：為了探討腦缺血再 灌注外周血細胞因子介導的粒細胞趨化因子(CINC)水平的變化， 采用動物實驗方法對實驗 性腦缺血再灌注不同時間內外周血CINC和髓質過氧化物酶(MPO)活性的變化進行了觀察。 方法： 選用改良線栓法復制Sprague-Dawley(SD)大鼠腦缺血再灌注實驗 模型。 對不同時間內的血清MPO活性及CINC水平進行測定。 結果： 單純缺血組MPO活性增高始于缺血6h并于缺血72h時達高峰，為0.15±0.01U/ml; CINC水平 增高始于缺血1h， 缺血6h時達高峰， 為0.05±0.05ng/ml， 以后逐漸下降并于缺血48h后 恢復正常。 缺血1小時再灌注組MPO活性增高始于再灌注1h并于再灌注24h時達高峰，為0.42 ±0.12U/ml； CINC水平增高始于再灌注1h， 再灌注3h時達高峰， 為0.65±0.03ng/ml， 以后逐漸下降并于再灌注24h后恢復正常。 結論： 實驗性腦缺血再 灌注外周血CINC有表達增高改變， 其作用過程可能與白細胞激活過程有關， 提示CINC增高 可能在腦缺血再灌注損傷中起一定作用。
, http://www.www.srpcoatings.com
The changes of cytokin-induced neutrophil chemoattractant
(CINC) in blood of experimental cerebral ischemia reperfusion with rats
Cao Xuebing, Sun Shenggang, Tong Etang et al
Department of Neurology, the Union Affilated Hospital of Tongji Medical, Unive rsity, Wuhan 430022
Abstract Objective： The purpose of study was to a ssess the changes rule of cytokin-induced neutrophil chemoattractant (CINC). Methods: In different time, the concentrations of CINC and the activities of myeloperioxidase (MPO) were observed in experimental cerebral isc hemia reperfusion model with Sprague-Dawley(SD) rats made by modified thread em bolism method. Results:In ischemia group, the peaks of MPO activity and CINC conentr ation were 24 hour and 6 hour respectively after ischemia, which initially incre ased at 1 hour, In ischemia reperfusion group, the peaks of MPO activity and CIN C conentration were 72 hour and 6 hour respectively after ischemia reperfusion, which initially increased at 6 hour and 1hour down to normal at 24hour respectiv ely. Conclusion: The rise of CINC was an effect of activiting WBC after the ischemia or ischemia reperfusion and indicated that the change was involving in the damage of ischemia reperfusion.
, 百拇醫(yī)藥
Key words Cytokin-induced neutrophil chemoattractant (CINC ) Myeloperioxidase(MPO) cerebral ischemia/reperfusion
細胞因子介導的粒細胞趨化因子(CINC)為一種有72個氨基酸殘基的堿性蛋白，分子量約15.6KD的二聚體。有學者將CINC稱為IL-8樣中性粒細胞趨化因子，IL-8與CINC的同源性為47.2%，免疫學證實鼠CINC與人IL-8兩者并無交叉反應，它們的趨化作用能力也不同，鼠CINC特異性趨化粒細胞，又稱為中性粒細胞特異性趨化因子[1]。近年來，白細胞在急性腦卒中發(fā)病機制中的作用得到了進一步的闡述。至于CINC與腦血管病的發(fā)病關系尚不十分明確。為了解腦缺血及缺血再灌注后血清CINC的變化規(guī)律，我們利用動物模型對MPO和CINC的變化進行了觀察，現(xiàn)報告如下：
材料與方法
, http://www.www.srpcoatings.com
一、實驗動物：
128只雄性SD大白鼠，由湖北醫(yī)科大學實驗動物飼養(yǎng)中心提供，體重225g～250g，分為單純缺血和缺血1小時再灌注兩部分。單純缺血部分又隨機分為對照組、缺血1、3、6、12、24、48、72小時(h)共8組。缺血1小時再灌注兩部分又隨機分為缺血1h未灌注組、再灌注1、3、6、12、24、48、72h共8組。每組動物均為8只。其中每組6只大鼠用作免疫及生化檢測，其余則用于組織病理學觀察。
二、實驗方法：采用Yuji(1995)[2]報道的大白鼠局灶性腦缺血再灌注線栓模型稍加改進。麻醉前10分鐘大鼠腹腔注射阿托品(5mg/100g)，麻醉用10%水合氯醛腹腔注射(30～40mg/100g)，麻醉后仰臥固定于手術臺上，頸部正中切開，逐層分離組織，暴露左側頸總動脈(CCA)、頸外動脈(ECA)、頸內動脈(ICA)，結扎CCA近端、ECA根部。在CCA結扎處遠端剪一斜口，經此斜口插入尼龍絲，經CCA分叉處通過ICA入顱至大腦前動脈(ACA)以阻斷MCA的血流。尼龍絲平均插入深度為18.5±0.5mm，結扎ICA以固定尼龍絲和防止出血，縫合皮膚，尼龍絲末端暴露在外。腦缺血未灌注組不拔出尼龍絲使腦組織缺血；再灌注組缺血1h后，拔出尼龍絲再灌注不同時程。假手術組除不插入尼龍絲外，其余步驟同腦缺血未灌注組；正常對照組不作任何處理。
, 百拇醫(yī)藥
三、血樣留取
單純缺血部分分別在手術前及缺血后1、3、6、12、24、48、72h采取靜脈血2ml；缺血1h再灌注部分分別在再灌注1、3、6、12、24、48、72h采取靜脈血2ml。低溫(4℃)3000rpm分離血清，置-80℃保存待檢。
四、測試方法：CINC測定試劑由日本國崗山大學免疫系李君武博士贈送，抗體效價為1∶1000，CINC標準品濃度為100ng/ml。按ELISA法測定血清中CINC水平。MPO活性測定用Barone等[3]報道的方法。MPO活性用標準溶液計算。IUMPO定義為：25℃下每分鐘分解1μmol過氧化物。
五、統(tǒng)計方法：分別計算不同時間測定后的結果平均值及標準差，并與對照組比較行t-檢驗。
結 果
, 百拇醫(yī)藥 一、不同缺血時間血清中MPO活性、CINC水平的變化(表1)：
表1 不同缺血時間MPO活性(U/ml)、CINC水平(ng/ml)的變化
缺血前
缺 血 后
1h
3h
6h
12h
24h
48h
72h
MPO
, http://www.www.srpcoatings.com
0.01±0.002
0.01±0.002
0.01±0.002
0.01 ±0.002*
0.05±0.01*
0.08±0.01*
0.10±0.005*
0.15±0.01*
CINC
0
, http://www.www.srpcoatings.com 0.06±0.02
0.15±0.05*
0.55±0.05*
0.25±0.06 *
0.11±0.04*
0.06±0.03
0
本項試驗結果看， MPO活性增高始于缺血6h并于缺血72h時達高峰， 為0.15±0.01U/ ml。 缺血6h以上各組MPO活性與缺血前比較， 差異均有極顯著性意義(P<0.01， 見表1)。 CINC 水平增高始于缺血1h， 缺血6h時達高峰， 為0.55±0.05ng/ml， 以后逐漸下降并于缺血48 h后恢復正常。 缺血3h以上各組血清CINC水平均高于缺血1h組， 差異均有極顯著性意義(P<0.01,見表1)。表2 缺血1小時不同再灌注時間MPO活性(U/ml)、CIN C水平(ng/ml)的變化
, http://www.www.srpcoatings.com
缺血1h
再 灌 注 后
1h
3h
6h
12h
24h
48h
72h
MPO
0.01±0.002
0.04±0.005*
0.08±0.005 *
, 百拇醫(yī)藥
0.10±0.01*
0.20±0.02*
0.42±0.12*
0.35±0.08*
0.12 ±0.01*
CINC
0.06±0.02
0.25±0.05*
0.65±0.03*
0.32±0.04*
, http://www.www.srpcoatings.com
0.16±0.02*
0.11±0.01*
0.06±0.03
0
二、缺血1小時不同再灌注時間MPO活性、CINC水平的變化(表2)：
本項試驗結果看，MPO活性增高始于再灌注1h并于再灌注24h時達高峰，為0.42±0.12U/ml。再灌注1h以上各組MPO活性與缺血1h比較，差異均有極顯著性意義(P<0.01，見表2)。CINC水平增高始于再灌注1h，再灌注3h時達高峰，為0.65±0.03ng/ml，以后逐漸下降并于再灌注24h后恢復正常。再灌注1h至24h各組血清CINC水平均高于缺血1h組，差異均有極顯著性意義(P<0.01，見表2)。討 論
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炎性細胞在缺血組織的聚集是腦缺血后導致功能殘跡的重要因素之一。淋巴細胞活化并通過血腦屏障遷移入中樞神經系統(tǒng)的機制尚未完全清楚。炎性過程被認為由局部產生的前炎性細胞因子如腫瘤壞死因子-α、IL-1β和IL-6所誘導的[4]。這些細胞因子還對培養(yǎng)的腦血管內皮細胞具有誘導作用并能增強幾種粘附分子包括細胞間粘附分子-1，血管性細胞粘附分子-1和E-選擇素表達的能力。而且，體外用前炎性因子刺激膠質細胞和內皮細胞也能誘導細胞因子的表達，而這些因子為低分子量的蛋白質、特異性地趨化特定的淋巴亞群到炎性區(qū)域。本研究發(fā)現(xiàn)血清中CINC水平呈短暫性增高，此結果與Yamasaki[7]的一致，提示這種細胞因子在趨化血液中的多形核白細胞(PMNL)到腦缺血位點中起一定的作用。
CINC同IL-8一樣，為一強烈的對PMNL起化學趨化作用的物質[5]。在人皮下注射IL-8能誘導粒細胞濾出血管外并持續(xù)幾個小時。除了趨化PMNL，IL-8也能刺激粒細胞釋放顆粒和這些細胞的呼吸爆發(fā)。粒細胞釋放顆粒的同時還有補體和整和素含量的上調，從而進一步促進濾過細胞的粘附[6]。在腦缺血再灌注大鼠中，高濃度的IL-8相關粒細胞化學吸附劑出現(xiàn)在腦組織和血清中[7]。在腦內，細胞趨化至炎性位點的機制沒有完全清楚。但是，在缺血腦組織局部IL-8/CINC產生增多可能導致IL-8/CINC呈濃度梯度性滲過血腦屏障，從而引起外周血IL-8濃度的升高，本研究結果也說明了這一點。在化學趨化過程中，細胞的遷移是沿著濃度梯度方向進行的，最終導致粒細胞快速流向腦實質，引起局部炎性反應[8]。因為腦缺血時腦內PMNL的濾過時間延長，高峰在刺激后的24到72小時，這也為開始治療提供了足夠的時間，特別是在溶栓治療時。
, 百拇醫(yī)藥
MPO是中性粒細胞和單核細胞所特有的細胞內酶，而單核細胞內此酶的活性較低，因此以MPO活性反映組織內中性粒細胞積聚并作為炎性細胞浸潤的定量指標是很有價值的[3]。Matsuo等[9]認為缺血1h提供了足夠的刺激誘導腦缺血區(qū)血管內中性粒細胞聚積。在實驗中，單純缺血組各時間點MPO活性、CINC水平都處于較低水平且增高所需時間較長，間接表明腦缺血時中性粒細胞濾出出現(xiàn)得晚且數(shù)量可能也較少。缺血1h再灌注組各時間點MPO活性、CINC水平明顯增高而且所需時間較短。這表明隨著腦血流的再通，血管通透性增加，使得中性粒細胞濾出增多且快速，而中性粒細胞的大量活化又進一步促使了CINC的表達。因此，本研究結果更加證實了再灌注造成的腦損傷作用比單純缺血更嚴重[10]，但是CINC在腦缺血再灌注損傷中的地位仍有待闡明。
參考文獻
1 Watanabe K, Suematsu M, Lida M, et al. Effect of rat CI NC/gro, a member of interleukin-8 family, on leukocytes in microcirculation of the rat mesentery.Exp Mol Pathol, 1992;56∶60-69.
, 百拇醫(yī)藥
2 Yuji K, Kazuo M, Takenori Y, et al. Nylonmonofilament for intraluminal middle cerebral artery occlusion in rats. Stoke, 1995,26∶1655.
3 Barone FC, Hillegass Lm, Price WJ, et al. Polymorphonuclear leukocyte infiltration into cerebral focal ischemic tissue: myeloperoxidase activity assay and histologic verification, J Neurosci Res. 1991;29∶336-348.
4 Kim JS. Cytokines and adhesion molecule in stroke and related diseases . J Neurol Sci. 1996;137∶69-78.
, 百拇醫(yī)藥
5 Huber AR, Kunkel SL, Todd RF, et al. Regulation of transedothelial neu trophil migration by endogenous interleukin-8. Science, 1991;254∶99-102.
6 Detmers P, Lo SK, Olsen-Egbert E, et al. neutrophil-activating prote in-1/interleukin-8 stimulates the binding activity of the leukocyte adhesion r eceptor CD11/CD18 on human neutrophils. J Exp Med. 1990;171∶1155-1162.
7 Yamasaki Y, Matsuo Y, Matsuura N, et al. Transient increase of cytokin e-induced neutrophil chemoattractant, a member of the interleukin-8 family, in ischemic brain areas after focal ischemia in rats. Stroke. 1995;26∶318-322.
, 百拇醫(yī)藥
8 Springer TA. Traffic signals for lymphocyte recirculation and leukocyt e emigration: the multistep paradigm. Cell. 1994;76∶301-314.
9 Matsuo Y, Onodera H, Shiga M, et al. Correlation between myeloperoxida se-quantified neutrophil accumulation and ischemic brain injury in the rat: Eff ects of neutrophil depletion. Stroke, 1994;25∶1469-1475.
10 Nikolaos Kostulas, Pia Kivisakk, Yumin Huang, et al. Ischemic stroke is associated with a systemic increase of blood mononuclear cells expressing int erleukin-8 mRNA. mRNA. Stroke, 1998;29∶462-466.
(1999-09-15 收稿), 百拇醫(yī)藥
單位：曹學兵(同濟醫(yī)科大學附屬協(xié)和醫(yī)院神經內科 430022)；孫圣剛(同濟醫(yī)科大學附屬協(xié)和醫(yī)院神經內科 430022)；童萼塘(同濟醫(yī)科大學附屬協(xié)和醫(yī)院神經內科 430022)；黃懷鈞(湖北醫(yī)科大學附屬第二醫(yī)院神經內科)；楊明山(同濟醫(yī)科大學附屬同濟醫(yī)院 神經內科)
關鍵詞：細胞因子介導的中性粒細胞化學吸附劑；髓質過氧化物；酶；腦缺血；再灌注
腦與神經疾病雜志000206 摘 要 目的：為了探討腦缺血再 灌注外周血細胞因子介導的粒細胞趨化因子(CINC)水平的變化， 采用動物實驗方法對實驗 性腦缺血再灌注不同時間內外周血CINC和髓質過氧化物酶(MPO)活性的變化進行了觀察。 方法： 選用改良線栓法復制Sprague-Dawley(SD)大鼠腦缺血再灌注實驗 模型。 對不同時間內的血清MPO活性及CINC水平進行測定。 結果： 單純缺血組MPO活性增高始于缺血6h并于缺血72h時達高峰，為0.15±0.01U/ml; CINC水平 增高始于缺血1h， 缺血6h時達高峰， 為0.05±0.05ng/ml， 以后逐漸下降并于缺血48h后 恢復正常。 缺血1小時再灌注組MPO活性增高始于再灌注1h并于再灌注24h時達高峰，為0.42 ±0.12U/ml； CINC水平增高始于再灌注1h， 再灌注3h時達高峰， 為0.65±0.03ng/ml， 以后逐漸下降并于再灌注24h后恢復正常。 結論： 實驗性腦缺血再 灌注外周血CINC有表達增高改變， 其作用過程可能與白細胞激活過程有關， 提示CINC增高 可能在腦缺血再灌注損傷中起一定作用。
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The changes of cytokin-induced neutrophil chemoattractant
(CINC) in blood of experimental cerebral ischemia reperfusion with rats
Cao Xuebing, Sun Shenggang, Tong Etang et al
Department of Neurology, the Union Affilated Hospital of Tongji Medical, Unive rsity, Wuhan 430022
Abstract Objective： The purpose of study was to a ssess the changes rule of cytokin-induced neutrophil chemoattractant (CINC). Methods: In different time, the concentrations of CINC and the activities of myeloperioxidase (MPO) were observed in experimental cerebral isc hemia reperfusion model with Sprague-Dawley(SD) rats made by modified thread em bolism method. Results:In ischemia group, the peaks of MPO activity and CINC conentr ation were 24 hour and 6 hour respectively after ischemia, which initially incre ased at 1 hour, In ischemia reperfusion group, the peaks of MPO activity and CIN C conentration were 72 hour and 6 hour respectively after ischemia reperfusion, which initially increased at 6 hour and 1hour down to normal at 24hour respectiv ely. Conclusion: The rise of CINC was an effect of activiting WBC after the ischemia or ischemia reperfusion and indicated that the change was involving in the damage of ischemia reperfusion.
, 百拇醫(yī)藥
Key words Cytokin-induced neutrophil chemoattractant (CINC ) Myeloperioxidase(MPO) cerebral ischemia/reperfusion
細胞因子介導的粒細胞趨化因子(CINC)為一種有72個氨基酸殘基的堿性蛋白，分子量約15.6KD的二聚體。有學者將CINC稱為IL-8樣中性粒細胞趨化因子，IL-8與CINC的同源性為47.2%，免疫學證實鼠CINC與人IL-8兩者并無交叉反應，它們的趨化作用能力也不同，鼠CINC特異性趨化粒細胞，又稱為中性粒細胞特異性趨化因子[1]。近年來，白細胞在急性腦卒中發(fā)病機制中的作用得到了進一步的闡述。至于CINC與腦血管病的發(fā)病關系尚不十分明確。為了解腦缺血及缺血再灌注后血清CINC的變化規(guī)律，我們利用動物模型對MPO和CINC的變化進行了觀察，現(xiàn)報告如下：
材料與方法
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一、實驗動物：
128只雄性SD大白鼠，由湖北醫(yī)科大學實驗動物飼養(yǎng)中心提供，體重225g～250g，分為單純缺血和缺血1小時再灌注兩部分。單純缺血部分又隨機分為對照組、缺血1、3、6、12、24、48、72小時(h)共8組。缺血1小時再灌注兩部分又隨機分為缺血1h未灌注組、再灌注1、3、6、12、24、48、72h共8組。每組動物均為8只。其中每組6只大鼠用作免疫及生化檢測，其余則用于組織病理學觀察。
二、實驗方法：采用Yuji(1995)[2]報道的大白鼠局灶性腦缺血再灌注線栓模型稍加改進。麻醉前10分鐘大鼠腹腔注射阿托品(5mg/100g)，麻醉用10%水合氯醛腹腔注射(30～40mg/100g)，麻醉后仰臥固定于手術臺上，頸部正中切開，逐層分離組織，暴露左側頸總動脈(CCA)、頸外動脈(ECA)、頸內動脈(ICA)，結扎CCA近端、ECA根部。在CCA結扎處遠端剪一斜口，經此斜口插入尼龍絲，經CCA分叉處通過ICA入顱至大腦前動脈(ACA)以阻斷MCA的血流。尼龍絲平均插入深度為18.5±0.5mm，結扎ICA以固定尼龍絲和防止出血，縫合皮膚，尼龍絲末端暴露在外。腦缺血未灌注組不拔出尼龍絲使腦組織缺血；再灌注組缺血1h后，拔出尼龍絲再灌注不同時程。假手術組除不插入尼龍絲外，其余步驟同腦缺血未灌注組；正常對照組不作任何處理。
, 百拇醫(yī)藥
三、血樣留取
單純缺血部分分別在手術前及缺血后1、3、6、12、24、48、72h采取靜脈血2ml；缺血1h再灌注部分分別在再灌注1、3、6、12、24、48、72h采取靜脈血2ml。低溫(4℃)3000rpm分離血清，置-80℃保存待檢。
四、測試方法：CINC測定試劑由日本國崗山大學免疫系李君武博士贈送，抗體效價為1∶1000，CINC標準品濃度為100ng/ml。按ELISA法測定血清中CINC水平。MPO活性測定用Barone等[3]報道的方法。MPO活性用標準溶液計算。IUMPO定義為：25℃下每分鐘分解1μmol過氧化物。
五、統(tǒng)計方法：分別計算不同時間測定后的結果平均值及標準差，并與對照組比較行t-檢驗。
結 果
, 百拇醫(yī)藥 一、不同缺血時間血清中MPO活性、CINC水平的變化(表1)：
表1 不同缺血時間MPO活性(U/ml)、CINC水平(ng/ml)的變化
缺血前
缺 血 后
1h
3h
6h
12h
24h
48h
72h
MPO
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0.01±0.002
0.01±0.002
0.01±0.002
0.01 ±0.002*
0.05±0.01*
0.08±0.01*
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CINC
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0.11±0.04*
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本項試驗結果看， MPO活性增高始于缺血6h并于缺血72h時達高峰， 為0.15±0.01U/ ml。 缺血6h以上各組MPO活性與缺血前比較， 差異均有極顯著性意義(P<0.01， 見表1)。 CINC 水平增高始于缺血1h， 缺血6h時達高峰， 為0.55±0.05ng/ml， 以后逐漸下降并于缺血48 h后恢復正常。 缺血3h以上各組血清CINC水平均高于缺血1h組， 差異均有極顯著性意義(P<0.01,見表1)。表2 缺血1小時不同再灌注時間MPO活性(U/ml)、CIN C水平(ng/ml)的變化
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缺血1h
再 灌 注 后
1h
3h
6h
12h
24h
48h
72h
MPO
0.01±0.002
0.04±0.005*
0.08±0.005 *
, 百拇醫(yī)藥
0.10±0.01*
0.20±0.02*
0.42±0.12*
0.35±0.08*
0.12 ±0.01*
CINC
0.06±0.02
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二、缺血1小時不同再灌注時間MPO活性、CINC水平的變化(表2)：
本項試驗結果看，MPO活性增高始于再灌注1h并于再灌注24h時達高峰，為0.42±0.12U/ml。再灌注1h以上各組MPO活性與缺血1h比較，差異均有極顯著性意義(P<0.01，見表2)。CINC水平增高始于再灌注1h，再灌注3h時達高峰，為0.65±0.03ng/ml，以后逐漸下降并于再灌注24h后恢復正常。再灌注1h至24h各組血清CINC水平均高于缺血1h組，差異均有極顯著性意義(P<0.01，見表2)。討 論
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炎性細胞在缺血組織的聚集是腦缺血后導致功能殘跡的重要因素之一。淋巴細胞活化并通過血腦屏障遷移入中樞神經系統(tǒng)的機制尚未完全清楚。炎性過程被認為由局部產生的前炎性細胞因子如腫瘤壞死因子-α、IL-1β和IL-6所誘導的[4]。這些細胞因子還對培養(yǎng)的腦血管內皮細胞具有誘導作用并能增強幾種粘附分子包括細胞間粘附分子-1，血管性細胞粘附分子-1和E-選擇素表達的能力。而且，體外用前炎性因子刺激膠質細胞和內皮細胞也能誘導細胞因子的表達，而這些因子為低分子量的蛋白質、特異性地趨化特定的淋巴亞群到炎性區(qū)域。本研究發(fā)現(xiàn)血清中CINC水平呈短暫性增高，此結果與Yamasaki[7]的一致，提示這種細胞因子在趨化血液中的多形核白細胞(PMNL)到腦缺血位點中起一定的作用。
CINC同IL-8一樣，為一強烈的對PMNL起化學趨化作用的物質[5]。在人皮下注射IL-8能誘導粒細胞濾出血管外并持續(xù)幾個小時。除了趨化PMNL，IL-8也能刺激粒細胞釋放顆粒和這些細胞的呼吸爆發(fā)。粒細胞釋放顆粒的同時還有補體和整和素含量的上調，從而進一步促進濾過細胞的粘附[6]。在腦缺血再灌注大鼠中，高濃度的IL-8相關粒細胞化學吸附劑出現(xiàn)在腦組織和血清中[7]。在腦內，細胞趨化至炎性位點的機制沒有完全清楚。但是，在缺血腦組織局部IL-8/CINC產生增多可能導致IL-8/CINC呈濃度梯度性滲過血腦屏障，從而引起外周血IL-8濃度的升高，本研究結果也說明了這一點。在化學趨化過程中，細胞的遷移是沿著濃度梯度方向進行的，最終導致粒細胞快速流向腦實質，引起局部炎性反應[8]。因為腦缺血時腦內PMNL的濾過時間延長，高峰在刺激后的24到72小時，這也為開始治療提供了足夠的時間，特別是在溶栓治療時。
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MPO是中性粒細胞和單核細胞所特有的細胞內酶，而單核細胞內此酶的活性較低，因此以MPO活性反映組織內中性粒細胞積聚并作為炎性細胞浸潤的定量指標是很有價值的[3]。Matsuo等[9]認為缺血1h提供了足夠的刺激誘導腦缺血區(qū)血管內中性粒細胞聚積。在實驗中，單純缺血組各時間點MPO活性、CINC水平都處于較低水平且增高所需時間較長，間接表明腦缺血時中性粒細胞濾出出現(xiàn)得晚且數(shù)量可能也較少。缺血1h再灌注組各時間點MPO活性、CINC水平明顯增高而且所需時間較短。這表明隨著腦血流的再通，血管通透性增加，使得中性粒細胞濾出增多且快速，而中性粒細胞的大量活化又進一步促使了CINC的表達。因此，本研究結果更加證實了再灌注造成的腦損傷作用比單純缺血更嚴重[10]，但是CINC在腦缺血再灌注損傷中的地位仍有待闡明。
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(1999-09-15 收稿), 百拇醫(yī)藥