HPLC法檢查甲硝唑葡萄糖注射液中5-HMF
作者：戴其昌 范曉萍
單位：戴其昌(浙江省湖州市藥品檢驗所 湖州 313000)；范曉萍(浙江省湖州市第一醫(yī)院)
關(guān)鍵詞：5-羥甲基糠醛；甲硝唑葡萄糖注射液；高效液相色譜法
摘要 采用高效液相色譜法測定甲硝唑葡萄糖注射液中5 摘要 采用高效液相色譜法測定甲硝唑葡萄糖注射液中5-羥甲基糠醛，以C18為固定相，以甲醇-0.2%磷酸溶液(25∶75)為流動相，檢測波長為284 nm，平均回收率為99.2%(RSD＝0.61%)。
Detection of 5-HMF in metronidazole-glucose injection by HPLC
Dai Qichang and Fan Xiaoping
, 百拇醫(yī)藥
(Huzhou Institute for Drug control in Zhejiang, Huzhou, 313000)
ABSTRACT A high performance liquid chromatographic method was developed for the determination of 5-HMT in metronidazole-glucose injection. The detection was carried out with a Nova-pack C18 column, using methanol-0.2% phosphoric acid (25∶75) as mobile phase. The UV detector set at 284nm. The average recovery was 99.2% (RSD＝0.61%).
KEY WORDS 5-HMF；metronidazole-glucose injection; HPLC
, 百拇醫(yī)藥
《中國醫(yī)院制劑規(guī)范》〔1〕收載的甲硝唑葡萄糖注射液項下5-羥甲基糠醛(5-HMF)檢查要求該品1∶25稀釋后在284 nm波長處吸收度不得大于0.25。但實驗證明，按上法進(jìn)行甲硝唑葡萄糖注射液中5-HMF檢查，其吸收度遠(yuǎn)大于0.25(1.50以上)。因為甲硝唑在284 nm處有吸收。中國藥典1995年版〔2〕對甲硝唑葡萄糖注射液尚未規(guī)定5-HMP的限量檢查〔2〕。為保證用藥安全，本文建立了高效液相色譜法測定甲硝唑葡萄糖注射液中5-HMF的含量，可消除甲硝唑的干擾�，F(xiàn)報道如下。
1 儀器與試藥
1.1 儀器 Waters 501泵，484檢測器，7725進(jìn)樣器(美國)。
1.2 試藥 甲硝唑(浙江可立思安制藥公司)；5-羥甲基糠醛(美國Sigma公司，H9877)；甲硝唑葡萄糖注射液(浙江省新昌制藥廠，971105，971213，980124，980213，980321)；甲醇(色譜純)。
, http://www.www.srpcoatings.com
2 方法與結(jié)果
2.1 色譜條件 色譜柱：Nova-pack C18(200 mm×4.6 mm, 4 μm)；流動相：甲醇-0.2%磷酸溶液(25∶75)；檢測波長：284 nm；流速：1.0 ml/min。
2.2 試液的配制 精密稱取5-HMF適量，加水溶解成0.5 mg/ml的溶液為5-HMF標(biāo)準(zhǔn)儲備液。
2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線制備 精密量取5-HMF標(biāo)準(zhǔn)儲備液適量，用水分別稀釋成5，10，15，20，25 μg/ml的溶液；取10 μl注入色譜儀中，在上述色譜條件下測得峰面積(見圖1)；以峰面積Y對濃度X繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程y＝1254x+47，r＝0.9986，表明在濃度5～25 μg/ml范圍內(nèi)線性良好。另取10 μl試樣重復(fù)進(jìn)行，峰面積RSD＝0.48%(n＝6)。
, 百拇醫(yī)藥
圖1 甲硝唑葡萄糖注射液HPLC色譜圖
1-5-HMF 2-甲硝唑
2.4 回收率測定 精密量取已測得5-HMF含量的甲硝唑葡萄糖注射液50 ml，置100 ml量瓶中，精密加入5-HMF標(biāo)準(zhǔn)儲備液1 ml，加水至刻度；按樣品測定項下方法，計算平均回收率為99.2%，RSD＝0.61%(n＝5)。
2.5 樣品5-HMF含量檢測 精密量取甲硝唑葡萄糖注射液10 μl注入色譜儀，按上述色譜條件，測得5-HMF的色譜峰面積；另精密量取5-HMF標(biāo)準(zhǔn)溶液10 μl注入色譜儀中，同法測得峰面積，按峰面積外標(biāo)法計算，結(jié)果5批樣品中5-HMF含量分別為6.1，8.3，8.6，10.9，14.7 μg/ml。
3 討論
實踐證明，若生產(chǎn)過程不規(guī)范(如滅菌溫度過高，時間過長)很容易導(dǎo)致5-HMF含量偏高。因此，控制甲硝唑葡萄糖注射液中5-HMF的限量對確保用藥安全具有重要意義。
參考文獻(xiàn)
1 衛(wèi)生部藥政局.中國醫(yī)院制劑規(guī)范(第2版).北京：中國醫(yī)藥科技出版社，1995：206
2 中國藥典1995年版.二部.1995：846
(收稿：1998-09-08), 百拇醫(yī)藥
單位：戴其昌(浙江省湖州市藥品檢驗所 湖州 313000)；范曉萍(浙江省湖州市第一醫(yī)院)
關(guān)鍵詞：5-羥甲基糠醛；甲硝唑葡萄糖注射液；高效液相色譜法
摘要 采用高效液相色譜法測定甲硝唑葡萄糖注射液中5 摘要 采用高效液相色譜法測定甲硝唑葡萄糖注射液中5-羥甲基糠醛，以C18為固定相，以甲醇-0.2%磷酸溶液(25∶75)為流動相，檢測波長為284 nm，平均回收率為99.2%(RSD＝0.61%)。
Detection of 5-HMF in metronidazole-glucose injection by HPLC
Dai Qichang and Fan Xiaoping
, 百拇醫(yī)藥
(Huzhou Institute for Drug control in Zhejiang, Huzhou, 313000)
ABSTRACT A high performance liquid chromatographic method was developed for the determination of 5-HMT in metronidazole-glucose injection. The detection was carried out with a Nova-pack C18 column, using methanol-0.2% phosphoric acid (25∶75) as mobile phase. The UV detector set at 284nm. The average recovery was 99.2% (RSD＝0.61%).
KEY WORDS 5-HMF；metronidazole-glucose injection; HPLC
, 百拇醫(yī)藥
《中國醫(yī)院制劑規(guī)范》〔1〕收載的甲硝唑葡萄糖注射液項下5-羥甲基糠醛(5-HMF)檢查要求該品1∶25稀釋后在284 nm波長處吸收度不得大于0.25。但實驗證明，按上法進(jìn)行甲硝唑葡萄糖注射液中5-HMF檢查，其吸收度遠(yuǎn)大于0.25(1.50以上)。因為甲硝唑在284 nm處有吸收。中國藥典1995年版〔2〕對甲硝唑葡萄糖注射液尚未規(guī)定5-HMP的限量檢查〔2〕。為保證用藥安全，本文建立了高效液相色譜法測定甲硝唑葡萄糖注射液中5-HMF的含量，可消除甲硝唑的干擾�，F(xiàn)報道如下。
1 儀器與試藥
1.1 儀器 Waters 501泵，484檢測器，7725進(jìn)樣器(美國)。
1.2 試藥 甲硝唑(浙江可立思安制藥公司)；5-羥甲基糠醛(美國Sigma公司，H9877)；甲硝唑葡萄糖注射液(浙江省新昌制藥廠，971105，971213，980124，980213，980321)；甲醇(色譜純)。
, http://www.www.srpcoatings.com
2 方法與結(jié)果
2.1 色譜條件 色譜柱：Nova-pack C18(200 mm×4.6 mm, 4 μm)；流動相：甲醇-0.2%磷酸溶液(25∶75)；檢測波長：284 nm；流速：1.0 ml/min。
2.2 試液的配制 精密稱取5-HMF適量，加水溶解成0.5 mg/ml的溶液為5-HMF標(biāo)準(zhǔn)儲備液。
2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線制備 精密量取5-HMF標(biāo)準(zhǔn)儲備液適量，用水分別稀釋成5，10，15，20，25 μg/ml的溶液；取10 μl注入色譜儀中，在上述色譜條件下測得峰面積(見圖1)；以峰面積Y對濃度X繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程y＝1254x+47，r＝0.9986，表明在濃度5～25 μg/ml范圍內(nèi)線性良好。另取10 μl試樣重復(fù)進(jìn)行，峰面積RSD＝0.48%(n＝6)。
, 百拇醫(yī)藥
圖1 甲硝唑葡萄糖注射液HPLC色譜圖
1-5-HMF 2-甲硝唑
2.4 回收率測定 精密量取已測得5-HMF含量的甲硝唑葡萄糖注射液50 ml，置100 ml量瓶中，精密加入5-HMF標(biāo)準(zhǔn)儲備液1 ml，加水至刻度；按樣品測定項下方法，計算平均回收率為99.2%，RSD＝0.61%(n＝5)。
2.5 樣品5-HMF含量檢測 精密量取甲硝唑葡萄糖注射液10 μl注入色譜儀，按上述色譜條件，測得5-HMF的色譜峰面積；另精密量取5-HMF標(biāo)準(zhǔn)溶液10 μl注入色譜儀中，同法測得峰面積，按峰面積外標(biāo)法計算，結(jié)果5批樣品中5-HMF含量分別為6.1，8.3，8.6，10.9，14.7 μg/ml。
3 討論
實踐證明，若生產(chǎn)過程不規(guī)范(如滅菌溫度過高，時間過長)很容易導(dǎo)致5-HMF含量偏高。因此，控制甲硝唑葡萄糖注射液中5-HMF的限量對確保用藥安全具有重要意義。
參考文獻(xiàn)
1 衛(wèi)生部藥政局.中國醫(yī)院制劑規(guī)范(第2版).北京：中國醫(yī)藥科技出版社，1995：206
2 中國藥典1995年版.二部.1995：846
(收稿：1998-09-08), 百拇醫(yī)藥