高效液相色譜法測定雷登泰口服液中愈創(chuàng)木酚甘油醚、鹽酸偽麻黃堿、氫溴酸右美沙芬的含量
作者：李永慶 田子新 趙文 朱霽虹
單位：李永慶 田子新 趙文 朱霽虹(中國藥品生物制品檢定所 北京 100050)
關(guān)鍵詞：高效液相色譜法；愈創(chuàng)木酚甘油醚；鹽酸偽麻黃堿；氫溴酸右美沙芬
藥物分析雜志000208 摘要 目的：采用高效液相色譜外標(biāo)法測定雷登泰口服液中愈創(chuàng)木酚甘油醚、鹽酸偽麻黃堿、氫溴酸右美沙芬的含量。方法：色譜柱為Spherisorb C8 5 μm 4.6 mm×250 mm，流動相為0.002 5 mol.L-1己烷磺酸甲醇溶液-水(含2%三乙胺)-3 mol.L-1磷酸(1.4∶1∶0.063)，紫外檢測器，檢測波長257 nm。結(jié)果：愈創(chuàng)木酚甘油醚進(jìn)樣量在2.0～10.0 μg，鹽酸偽麻黃堿在0.3～1.5 μg，氫溴酸右美沙芬在0.15～0.65 μg范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)依次為0.998 6，0.999 9，0.999 9，回收率依次為100.8%，100.5%，99.69%。結(jié)論：本法精密度好，結(jié)果準(zhǔn)確可靠。
, 百拇醫(yī)藥
HPLC Determination of Guaifenesin,Pseudoephedrine
Hydrochloride and Dextromethorphan Hydrobromide
in Redentai Oral Solution
Li Yongqing,Tian Zixin,Zhao Wen and Zhu Jihong
(National Institute for the Control of Pharmaceutical and Biological Products,Beijing 100050)
Abstract Objective：To establish an external standard HPLC method for the determination of guaifenesin,pseudoephedrine hydrochloride and dextromethorphan hydrochloride in Redentai oral solution.Method: The chromatographic conditions were as follows: Spherisorb C8 column(5 μm, 4.6 mm×250 mm),0.002 5 mol.L-1 1-hexane sulfonic acid methanolic solution-water (0.2% triethylamine)-0.3 mol.L-1 phosphoric acid(1.4∶1∶0.063)as the mobile phase and UV detector at 257 nm. Results: The calibration curves were linear in the range of 2.0～10.0 μg for guaifenesin(r=0.998 6)，0.3～1.5 μg for pseudoephedrine hydrochloride(r=0.999 9) and 0.15～0.65 μg for dextromethorphan hydrochloride(r=0.999 9)respectively. The average recoveries(n=5)were 100.8% for guaifenesin(RSD=0.9%)，100.5% for pseudoephedrine hydrochloride(RSD=1.0%) and 99.7% for dextromethorphan hydrobromide (RSD=1.2%). Conclusion:The method is rapid, accurate and reliable for the quality control of redentai oral solution.
, 百拇醫(yī)藥
Key words HPLC, guaifenesin, pseudoephedrine hydrochloride, dextromethorphan hydrobromide
雷登泰口服液為治療感冒、咽炎等上呼吸道疾病的新藥，是由愈創(chuàng)木酚甘油醚、鹽酸偽麻黃堿、氫溴酸右美沙芬組成的復(fù)方制劑。文獻(xiàn)報道，3種藥物單一成分的檢測采用高效液相色譜法[1，2]、薄層掃描法[3]、電極法[4]等，但此3種藥物組成復(fù)方制劑的檢測方法尚未見報道。本文采用了HPLC法對制劑中3種成分同時進(jìn)行測定，分離完全，測定結(jié)果準(zhǔn)確可靠。
1 儀器與試藥
Waters 510泵，486檢測器。
愈創(chuàng)木酚甘油醚、鹽酸偽麻黃堿、氫溴酸右美沙芬化學(xué)對照品(中國藥品生物制品檢定所提供)；雷登泰口服液(西南藥業(yè)有限公司提供)；其它均為分析純。
, 百拇醫(yī)藥
2 色譜條件
色譜柱：Spherisorb C8 5 μm 4.6 mm×250 mm；流動相：0.002 5 mol。L-1己烷磺酸甲醇溶液-水(含2%三乙胺)-3 mol。L-1磷酸(1.4∶1∶0.068)；流速：1 mL。min-1；進(jìn)樣量：10 μL；理論塔板數(shù)：以偽麻黃堿峰計應(yīng)大于2 000，各峰分離度應(yīng)大于2。
3 樣品分析
3.1 線性范圍測定 分別精密稱取經(jīng)干燥至恒重的鹽酸偽麻黃堿、愈創(chuàng)木酚甘油醚、氫溴酸右美沙芬3種化學(xué)對照品，用50%甲醇溶液配制成濃度順次為：0.6，4.0，2.6 mg。mL-1的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，精密量取此標(biāo)準(zhǔn)液1，2，3，4，5 mL于10 mL量瓶中，加50%甲醇溶液定容到刻度，搖勻，照樣品測定法測定，結(jié)果見表1。
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表1 口服液中各成分線性范圍測定結(jié)果 組分
回歸方程
r
濃度范圍/
mg。mL-1
鹽酸偽麻黃堿
C=5.96×10-6A-0.0570
0.9999
0.06～0.30
愈創(chuàng)木酚甘油醚
C=1.77×10-8A-4.24
, 百拇醫(yī)藥
0.9986
0.40～2.00
氫溴酸右美沙芬
C=4.81×10-8A-0.0578
0.9999
0.026～0.15
注：C為濃度 A為面積
3.2 回收率測定 按雷登泰口服液處方稱取各成分及各種輔料，配制成供試液，照樣品測定法測定，測得結(jié)果：鹽酸偽麻黃堿回收率平均值為100.5%(n=5)，RSD為1.0%；愈創(chuàng)木酚甘油醚回收率平均值為100.8%(n=5)，RSD為0.9%；氫溴酸右美沙芬回收率平均值為99.69%(n=5),RSD為1.2%。
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3.3 重現(xiàn)性測定 取本品1批，照樣品測定法測定5份，測定各成分含量，測得結(jié)果：含鹽酸偽麻黃堿為標(biāo)示量的99.57%(n=5)，RSD為1.0%；含愈創(chuàng)木酚甘油醚為標(biāo)示量的100.9%(n=5)，RSD為0.9%；含氫溴酸右美沙芬為標(biāo)示量的100.0%(n=5)，RSD為1.2%。
3.4 樣品測定 準(zhǔn)確量取雷登泰口服液2.0 mL置于100 mL分液漏斗中，加氯化鈉0.9 g，振搖，使充分溶解，加氨試液4滴，搖勻，用氯仿(經(jīng)氫氧化鈉試液洗滌并重蒸)-甲醇混合溶劑(12∶1)提取3次，用量依次為15，15，10 mL，合并有機(jī)層，用飽和氯化鈉溶液5 mL洗1次，水層用混合溶劑10 mL回提1次，合并有機(jī)層，通過無水硫酸鈉濾過，濾液在50 ℃減壓蒸干，精密加50%甲醇液5 mL，溶解，搖勻即得樣品溶液。另精密稱取經(jīng)105 ℃干燥至恒重的鹽酸偽麻黃堿；60 ℃減壓干燥至恒重的氫溴酸右美沙芬及真空干燥至恒重的愈創(chuàng)木酚甘油醚化學(xué)對照品適量，用50%甲醇溶液配制成濃度順次為1.50，0.75，5.00 mg。mL-1的混合對照品溶液。分別精密吸取上述2種溶液各5 μL，注入液相色譜儀，記錄峰面積，計算，即得。3批樣品測定結(jié)果見表2(色譜圖見圖1)。
, 百拇醫(yī)藥
表2 口服液樣品測定結(jié)果(%) 批號
鹽酸偽麻黃堿
愈創(chuàng)木酚甘油醚
氫溴酸右美沙芬
941101
99.0
97.6
98.4
941002
98.6
98.4
99.0
, 百拇醫(yī)藥
941003
100.4
101.3
101.9
圖1 混合對照品溶液(A)與樣品溶液(B)色譜圖
1.鹽酸偽麻黃堿(3.52 min)2.愈創(chuàng)木酚甘油醚(4.90 min)
3.氫溴酸右美沙芬(7.48 min)
4 討論
由于愈創(chuàng)木酚甘油醚在水中有一定的溶解度，因此在提取過程中本文采取鹽析的方法，避免愈創(chuàng)木酚甘油醚的損失。在方法研制中我們發(fā)現(xiàn)，用未經(jīng)處理的氯仿提取鹽酸偽麻黃堿有分解現(xiàn)象，可能是氯仿中含有微量光氣的結(jié)果，改用經(jīng)氫氧化鈉試液洗滌并重蒸的氯仿提取，避免了鹽酸偽麻黃堿在提取過程中分解。采用氯仿-甲醇混合溶劑提取，一方面可以緩解乳化，另一方面可增加右美沙芬的提取率。
, 百拇醫(yī)藥
經(jīng)陰性實驗，結(jié)果證明本品輔料對3種成分含量測定結(jié)果無干擾。
參考文獻(xiàn)
1，安國升，李玉珍.HPLC法測定愈創(chuàng)木酚甘油醚的血藥濃度.中國藥學(xué)雜志，1995，30(6)：317
2，高素英，陳鎮(zhèn)生，鄭國源.HPLC法測定鹽酸偽麻黃堿撲爾敏膠囊含量.現(xiàn)代醫(yī)用藥學(xué)，1995，12(3)：37
3，文潔，彭維，陸學(xué)筠等.薄層掃描法測定國產(chǎn)麻黃中麻黃堿的含量.中藥材，1995，13(5)：248
4，屈愛桃，孫利明，屈志軍.麻黃堿電極法測定止咳糖漿中的鹽酸麻黃堿含量.藥物分析雜志，1993，13(4)：248
(本文于1998年12月29日收到), http://www.www.srpcoatings.com
單位：李永慶 田子新 趙文 朱霽虹(中國藥品生物制品檢定所 北京 100050)
關(guān)鍵詞：高效液相色譜法；愈創(chuàng)木酚甘油醚；鹽酸偽麻黃堿；氫溴酸右美沙芬
藥物分析雜志000208 摘要 目的：采用高效液相色譜外標(biāo)法測定雷登泰口服液中愈創(chuàng)木酚甘油醚、鹽酸偽麻黃堿、氫溴酸右美沙芬的含量。方法：色譜柱為Spherisorb C8 5 μm 4.6 mm×250 mm，流動相為0.002 5 mol.L-1己烷磺酸甲醇溶液-水(含2%三乙胺)-3 mol.L-1磷酸(1.4∶1∶0.063)，紫外檢測器，檢測波長257 nm。結(jié)果：愈創(chuàng)木酚甘油醚進(jìn)樣量在2.0～10.0 μg，鹽酸偽麻黃堿在0.3～1.5 μg，氫溴酸右美沙芬在0.15～0.65 μg范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)依次為0.998 6，0.999 9，0.999 9，回收率依次為100.8%，100.5%，99.69%。結(jié)論：本法精密度好，結(jié)果準(zhǔn)確可靠。
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HPLC Determination of Guaifenesin,Pseudoephedrine
Hydrochloride and Dextromethorphan Hydrobromide
in Redentai Oral Solution
Li Yongqing,Tian Zixin,Zhao Wen and Zhu Jihong
(National Institute for the Control of Pharmaceutical and Biological Products,Beijing 100050)
Abstract Objective：To establish an external standard HPLC method for the determination of guaifenesin,pseudoephedrine hydrochloride and dextromethorphan hydrochloride in Redentai oral solution.Method: The chromatographic conditions were as follows: Spherisorb C8 column(5 μm, 4.6 mm×250 mm),0.002 5 mol.L-1 1-hexane sulfonic acid methanolic solution-water (0.2% triethylamine)-0.3 mol.L-1 phosphoric acid(1.4∶1∶0.063)as the mobile phase and UV detector at 257 nm. Results: The calibration curves were linear in the range of 2.0～10.0 μg for guaifenesin(r=0.998 6)，0.3～1.5 μg for pseudoephedrine hydrochloride(r=0.999 9) and 0.15～0.65 μg for dextromethorphan hydrochloride(r=0.999 9)respectively. The average recoveries(n=5)were 100.8% for guaifenesin(RSD=0.9%)，100.5% for pseudoephedrine hydrochloride(RSD=1.0%) and 99.7% for dextromethorphan hydrobromide (RSD=1.2%). Conclusion:The method is rapid, accurate and reliable for the quality control of redentai oral solution.
, 百拇醫(yī)藥
Key words HPLC, guaifenesin, pseudoephedrine hydrochloride, dextromethorphan hydrobromide
雷登泰口服液為治療感冒、咽炎等上呼吸道疾病的新藥，是由愈創(chuàng)木酚甘油醚、鹽酸偽麻黃堿、氫溴酸右美沙芬組成的復(fù)方制劑。文獻(xiàn)報道，3種藥物單一成分的檢測采用高效液相色譜法[1，2]、薄層掃描法[3]、電極法[4]等，但此3種藥物組成復(fù)方制劑的檢測方法尚未見報道。本文采用了HPLC法對制劑中3種成分同時進(jìn)行測定，分離完全，測定結(jié)果準(zhǔn)確可靠。
1 儀器與試藥
Waters 510泵，486檢測器。
愈創(chuàng)木酚甘油醚、鹽酸偽麻黃堿、氫溴酸右美沙芬化學(xué)對照品(中國藥品生物制品檢定所提供)；雷登泰口服液(西南藥業(yè)有限公司提供)；其它均為分析純。
, 百拇醫(yī)藥
2 色譜條件
色譜柱：Spherisorb C8 5 μm 4.6 mm×250 mm；流動相：0.002 5 mol。L-1己烷磺酸甲醇溶液-水(含2%三乙胺)-3 mol。L-1磷酸(1.4∶1∶0.068)；流速：1 mL。min-1；進(jìn)樣量：10 μL；理論塔板數(shù)：以偽麻黃堿峰計應(yīng)大于2 000，各峰分離度應(yīng)大于2。
3 樣品分析
3.1 線性范圍測定 分別精密稱取經(jīng)干燥至恒重的鹽酸偽麻黃堿、愈創(chuàng)木酚甘油醚、氫溴酸右美沙芬3種化學(xué)對照品，用50%甲醇溶液配制成濃度順次為：0.6，4.0，2.6 mg。mL-1的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，精密量取此標(biāo)準(zhǔn)液1，2，3，4，5 mL于10 mL量瓶中，加50%甲醇溶液定容到刻度，搖勻，照樣品測定法測定，結(jié)果見表1。
, http://www.www.srpcoatings.com
表1 口服液中各成分線性范圍測定結(jié)果 組分
回歸方程
r
濃度范圍/
mg。mL-1
鹽酸偽麻黃堿
C=5.96×10-6A-0.0570
0.9999
0.06～0.30
愈創(chuàng)木酚甘油醚
C=1.77×10-8A-4.24
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0.9986
0.40～2.00
氫溴酸右美沙芬
C=4.81×10-8A-0.0578
0.9999
0.026～0.15
注：C為濃度 A為面積
3.2 回收率測定 按雷登泰口服液處方稱取各成分及各種輔料，配制成供試液，照樣品測定法測定，測得結(jié)果：鹽酸偽麻黃堿回收率平均值為100.5%(n=5)，RSD為1.0%；愈創(chuàng)木酚甘油醚回收率平均值為100.8%(n=5)，RSD為0.9%；氫溴酸右美沙芬回收率平均值為99.69%(n=5),RSD為1.2%。
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3.3 重現(xiàn)性測定 取本品1批，照樣品測定法測定5份，測定各成分含量，測得結(jié)果：含鹽酸偽麻黃堿為標(biāo)示量的99.57%(n=5)，RSD為1.0%；含愈創(chuàng)木酚甘油醚為標(biāo)示量的100.9%(n=5)，RSD為0.9%；含氫溴酸右美沙芬為標(biāo)示量的100.0%(n=5)，RSD為1.2%。
3.4 樣品測定 準(zhǔn)確量取雷登泰口服液2.0 mL置于100 mL分液漏斗中，加氯化鈉0.9 g，振搖，使充分溶解，加氨試液4滴，搖勻，用氯仿(經(jīng)氫氧化鈉試液洗滌并重蒸)-甲醇混合溶劑(12∶1)提取3次，用量依次為15，15，10 mL，合并有機(jī)層，用飽和氯化鈉溶液5 mL洗1次，水層用混合溶劑10 mL回提1次，合并有機(jī)層，通過無水硫酸鈉濾過，濾液在50 ℃減壓蒸干，精密加50%甲醇液5 mL，溶解，搖勻即得樣品溶液。另精密稱取經(jīng)105 ℃干燥至恒重的鹽酸偽麻黃堿；60 ℃減壓干燥至恒重的氫溴酸右美沙芬及真空干燥至恒重的愈創(chuàng)木酚甘油醚化學(xué)對照品適量，用50%甲醇溶液配制成濃度順次為1.50，0.75，5.00 mg。mL-1的混合對照品溶液。分別精密吸取上述2種溶液各5 μL，注入液相色譜儀，記錄峰面積，計算，即得。3批樣品測定結(jié)果見表2(色譜圖見圖1)。
, 百拇醫(yī)藥
表2 口服液樣品測定結(jié)果(%) 批號
鹽酸偽麻黃堿
愈創(chuàng)木酚甘油醚
氫溴酸右美沙芬
941101
99.0
97.6
98.4
941002
98.6
98.4
99.0
, 百拇醫(yī)藥
941003
100.4
101.3
101.9
圖1 混合對照品溶液(A)與樣品溶液(B)色譜圖
1.鹽酸偽麻黃堿(3.52 min)2.愈創(chuàng)木酚甘油醚(4.90 min)
3.氫溴酸右美沙芬(7.48 min)
4 討論
由于愈創(chuàng)木酚甘油醚在水中有一定的溶解度，因此在提取過程中本文采取鹽析的方法，避免愈創(chuàng)木酚甘油醚的損失。在方法研制中我們發(fā)現(xiàn)，用未經(jīng)處理的氯仿提取鹽酸偽麻黃堿有分解現(xiàn)象，可能是氯仿中含有微量光氣的結(jié)果，改用經(jīng)氫氧化鈉試液洗滌并重蒸的氯仿提取，避免了鹽酸偽麻黃堿在提取過程中分解。采用氯仿-甲醇混合溶劑提取，一方面可以緩解乳化，另一方面可增加右美沙芬的提取率。
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經(jīng)陰性實驗，結(jié)果證明本品輔料對3種成分含量測定結(jié)果無干擾。
參考文獻(xiàn)
1，安國升，李玉珍.HPLC法測定愈創(chuàng)木酚甘油醚的血藥濃度.中國藥學(xué)雜志，1995，30(6)：317
2，高素英，陳鎮(zhèn)生，鄭國源.HPLC法測定鹽酸偽麻黃堿撲爾敏膠囊含量.現(xiàn)代醫(yī)用藥學(xué)，1995，12(3)：37
3，文潔，彭維，陸學(xué)筠等.薄層掃描法測定國產(chǎn)麻黃中麻黃堿的含量.中藥材，1995，13(5)：248
4，屈愛桃，孫利明，屈志軍.麻黃堿電極法測定止咳糖漿中的鹽酸麻黃堿含量.藥物分析雜志，1993，13(4)：248
(本文于1998年12月29日收到), http://www.www.srpcoatings.com