HPLC法測定金鵑咳喘�？诜褐虚纹に氐暮�
作者：張良
單位：張良(成都市藥品檢驗所 610061)
關鍵詞：
藥物分析雜志000127 金鵑咳喘停口服液是由涼山杜鵑(Rhododendrron liangshanium L.S.Chen et W.P.Fang mss.)一味藥制成的液體制劑，收載于四川省藥品標準(中藥成方制劑)1993年版，主要用于慢性支氣管炎[1]。原標準采用比色法測定總黃酮含量，但樣品空白干擾較大。涼山杜鵑含黃酮類成分，水解后主要黃酮苷元成分為槲皮素[2]，其含量情況尚未見報道。本文采用HPLC法對金鵑咳喘�？诜航�(jīng)水解后其中所含槲皮素進行含量測定，操作簡便、快速、重現(xiàn)性好。
1 儀器、試藥
Hewlett-Packard高效液相色譜儀，DAD檢測器，HP ChemStation化學工作站。
, 百拇醫(yī)藥
槲皮素對照品購自中國藥品生物制品檢定所；甲醇(色譜純)，磷酸、鹽酸(分析純)，重蒸餾水。
金鵑咳喘�？诜河伤拇ㄊ∥鞑龡钐熘扑幱邢薰咎峁�(guī)格：每支10 mL。
2 實驗方法
2.1 色譜條件 Shim-pack CLC-ODS分析柱(150 mm×6.0 mm,5 μm)；流動相：甲醇-0.5%磷酸(50∶50)；流速1.0 mL.min-1；柱溫：35 ℃；檢測波長：370 nm；進樣量：10 μL；在本色譜條件下，對照品及樣品色譜圖見圖1。
圖1 HPLC圖
A.對照品 B.樣品
, 百拇醫(yī)藥
1.槲皮素
2.2 線性范圍 準確配制每1 mL含槲皮素對照品0.02 mg的甲醇溶液，精密吸取4.0，8.0，12.0，16.0，20.0 μL依次進樣，按上述色譜條件測定峰面積，以峰面積積分值Y對進樣量X(μg)進行線性回歸，回歸方程為：
Y=4306.53X-10.73 r=0.999 9
槲皮素線性范圍為0.08～0.4 μg。
2.3 精密度試驗 精密吸取濃度為0.01968 mg.mL-1的對照品溶液10 μL進樣，重復5次，測定峰面積，RSD為0.45%。
2.4 穩(wěn)定性試驗 按照含量測定條件，取對照品溶液于0，1，2，4，8，24，32 h進樣10 μL，測定槲皮素峰面積，RSD為0.22%(n=6)。
, 百拇醫(yī)藥
2.5 重復性試驗 按照樣品測定方法，對同一批樣品進行測定，計算槲皮素含量為1.294 7 mg.mL-1(n=5)，RSD為0.7%。
2.6 加樣回收率試驗 精密吸取已測含量的樣品5.0 mL，置錐形瓶中，分別精密加入對照品0.246，0.492，0.984 mg，按照樣品測定方法操作，測定，計算，平均回收率為98.53% (n=6)，RSD為1.5%。
3 樣品測定
精密吸取樣品5.0 mL，置錐形瓶中，加甲醇-25%鹽酸(4∶1) 20 mL，水浴加熱回流30 min，放冷，置50 mL量瓶中，用甲醇適量分數(shù)次洗滌容器，洗液合并至同一量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，精密吸取10 mL置50 mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，棄去初濾液，精密量取續(xù)濾液10 μL進樣，以外標法計算樣品中槲皮素的含量，結(jié)果批號為970701，970707，970802，970807，970901，970903，970906，971003，990401，990402的樣品含量分別為1.301，1.308，1.276，1.303，1.303，1.337，1.376，1.295，2.491，2.204 mg.mL-1，n=2。
, 百拇醫(yī)藥
4 討論
實驗對原標準[1]含量測定方法(以蘆丁為對照采用比色法測定總黃酮的含量)進行了考察，樣品空白干擾較大；選用不同顯色劑進行含量測定，均未獲得成功，作者認為是樣品成分的干擾。
實驗對加熱回流時間進行了考察，結(jié)果表明加熱回流30 min即可水解完全�！�
參考文獻：
[1]四川省藥品標準(中藥成方制劑).1993.172
[2]國家醫(yī)藥管理局中草藥情報中心站編.植物藥有效成分手冊.北京：人民衛(wèi)生出版社，1986.876
收稿日期：1999-04-01, http://www.www.srpcoatings.com
單位：張良(成都市藥品檢驗所 610061)
關鍵詞：
藥物分析雜志000127 金鵑咳喘停口服液是由涼山杜鵑(Rhododendrron liangshanium L.S.Chen et W.P.Fang mss.)一味藥制成的液體制劑，收載于四川省藥品標準(中藥成方制劑)1993年版，主要用于慢性支氣管炎[1]。原標準采用比色法測定總黃酮含量，但樣品空白干擾較大。涼山杜鵑含黃酮類成分，水解后主要黃酮苷元成分為槲皮素[2]，其含量情況尚未見報道。本文采用HPLC法對金鵑咳喘�？诜航�(jīng)水解后其中所含槲皮素進行含量測定，操作簡便、快速、重現(xiàn)性好。
1 儀器、試藥
Hewlett-Packard高效液相色譜儀，DAD檢測器，HP ChemStation化學工作站。
, 百拇醫(yī)藥
槲皮素對照品購自中國藥品生物制品檢定所；甲醇(色譜純)，磷酸、鹽酸(分析純)，重蒸餾水。
金鵑咳喘�？诜河伤拇ㄊ∥鞑龡钐熘扑幱邢薰咎峁�(guī)格：每支10 mL。
2 實驗方法
2.1 色譜條件 Shim-pack CLC-ODS分析柱(150 mm×6.0 mm,5 μm)；流動相：甲醇-0.5%磷酸(50∶50)；流速1.0 mL.min-1；柱溫：35 ℃；檢測波長：370 nm；進樣量：10 μL；在本色譜條件下，對照品及樣品色譜圖見圖1。
圖1 HPLC圖
A.對照品 B.樣品
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1.槲皮素
2.2 線性范圍 準確配制每1 mL含槲皮素對照品0.02 mg的甲醇溶液，精密吸取4.0，8.0，12.0，16.0，20.0 μL依次進樣，按上述色譜條件測定峰面積，以峰面積積分值Y對進樣量X(μg)進行線性回歸，回歸方程為：
Y=4306.53X-10.73 r=0.999 9
槲皮素線性范圍為0.08～0.4 μg。
2.3 精密度試驗 精密吸取濃度為0.01968 mg.mL-1的對照品溶液10 μL進樣，重復5次，測定峰面積，RSD為0.45%。
2.4 穩(wěn)定性試驗 按照含量測定條件，取對照品溶液于0，1，2，4，8，24，32 h進樣10 μL，測定槲皮素峰面積，RSD為0.22%(n=6)。
, 百拇醫(yī)藥
2.5 重復性試驗 按照樣品測定方法，對同一批樣品進行測定，計算槲皮素含量為1.294 7 mg.mL-1(n=5)，RSD為0.7%。
2.6 加樣回收率試驗 精密吸取已測含量的樣品5.0 mL，置錐形瓶中，分別精密加入對照品0.246，0.492，0.984 mg，按照樣品測定方法操作，測定，計算，平均回收率為98.53% (n=6)，RSD為1.5%。
3 樣品測定
精密吸取樣品5.0 mL，置錐形瓶中，加甲醇-25%鹽酸(4∶1) 20 mL，水浴加熱回流30 min，放冷，置50 mL量瓶中，用甲醇適量分數(shù)次洗滌容器，洗液合并至同一量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，精密吸取10 mL置50 mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，棄去初濾液，精密量取續(xù)濾液10 μL進樣，以外標法計算樣品中槲皮素的含量，結(jié)果批號為970701，970707，970802，970807，970901，970903，970906，971003，990401，990402的樣品含量分別為1.301，1.308，1.276，1.303，1.303，1.337，1.376，1.295，2.491，2.204 mg.mL-1，n=2。
, 百拇醫(yī)藥
4 討論
實驗對原標準[1]含量測定方法(以蘆丁為對照采用比色法測定總黃酮的含量)進行了考察，樣品空白干擾較大；選用不同顯色劑進行含量測定，均未獲得成功，作者認為是樣品成分的干擾。
實驗對加熱回流時間進行了考察，結(jié)果表明加熱回流30 min即可水解完全�！�
參考文獻：
[1]四川省藥品標準(中藥成方制劑).1993.172
[2]國家醫(yī)藥管理局中草藥情報中心站編.植物藥有效成分手冊.北京：人民衛(wèi)生出版社，1986.876
收稿日期：1999-04-01, http://www.www.srpcoatings.com