HPLC法測定復(fù)方甲苯咪唑片中甲苯咪唑和左旋咪唑的含量
作者：夏晴 相應(yīng)征 戴興凌 陳明水
單位：夏晴 相應(yīng)征 戴興凌 陳明水(解放軍323醫(yī)院藥械科 西安 71 0054)
關(guān)鍵詞：甲苯咪唑；左旋咪唑；高效液相色譜法
西北藥學(xué)雜志000101摘要 采用C8不銹鋼柱，以甲醇-0.5%醋酸銨作流動相(pH＝5.0)， 檢測波長220nm，多潘立酮作為內(nèi)標(biāo)物，峰面積比定量。結(jié)果：該方法回收率甲苯咪唑98.8 0%(RSD＝1.24%)，鹽酸左旋咪唑99.37%(RSD＝0.77%)。
Determination of mebendazole and levamisole in compound mebendazole tab lets by HPLC
Xia Qing, Xiang Yingzheng, Dai Xingling and Chen Mingshui
, 百拇醫(yī)藥
(De partment of Pharmacy, PLA 323 Hospital, Xi'an, 710054)
ABSTRACT To develop a RP-HPLC method for assay of compound m ebendazole tablets with a reverse phase C18(5μm) column(220mm×2.1mm). The mixture of methanol and 0.5% ammonium acetate solution (pH＝5.0) was used as the mobile phase. The detector set at 220nm. Domperidone was used as internal standard substance and peak area ratio was the basis of counting the ingredient contents. The recovery of mebendazole and levamisole were 98.80% and 99.37% r espectively.
, 百拇醫(yī)藥
KEY WORDS compound mebendazole tablets;mebendazole; levamisol e; HPLC
復(fù)方甲苯咪唑片是根據(jù)甲苯咪唑和左旋咪唑?qū)οx體不同的作用機理和 特點配伍制成的復(fù)方制劑〔1〕。中國藥典1995版該藥項下含量測定中，采用分光光 度法測定甲苯咪唑，非水滴定法測定鹽酸左旋咪唑。本文建立HPLC測定其含量，現(xiàn)報道如下 。
1 儀器與試藥
1.1 儀器 P1000高效液相色譜儀，UV1000紫外檢測器及 SP4600積分儀(美國TSP公司)。UV-2100型紫外分光光度計(日本島津)。
1.2 試藥 甲苯咪唑、鹽酸左旋咪唑?qū)φ掌?中國藥品生 物制品檢定所，含量分別為99.20%和98.80%)；甲醇(色譜純)；復(fù)方甲苯咪唑片(陜西省漢 江制藥廠)。
, 百拇醫(yī)藥
2 方法
2.1 色譜條件 SPHERI-5RP-C8色譜柱(220mm×2.1 mm，5μm)，流動相：甲醇-0.5%醋酸銨(53∶47)，用甲酸調(diào)pH為5.0；檢測波長：220nm ，流速：0.4ml/min。
2.2 試液的配制 取多潘立酮約35mg，精密稱定，置100 ml量瓶中，用60%甲醇溶解并稀釋至刻度作內(nèi)標(biāo)溶液。
分別取干燥至恒重的甲苯咪唑?qū)φ掌芳s50mg和鹽酸左旋咪唑?qū)φ掌芳s12.5mg，精密稱定， 分別置于100ml量瓶中，各加入甲酸2ml溶解，加60%甲醇稀釋至刻度，搖勻；分別精密量取5 ml，置25ml量瓶中，加內(nèi)標(biāo)溶液5ml，用60%甲醇稀釋至刻度，即得對照品溶液。
取復(fù)方甲苯咪唑20片，研細(xì)，取適量(約相當(dāng)于甲苯咪唑50mg和鹽酸左旋咪唑12.5mg)，精 密稱定，置100ml量瓶中，加甲酸2ml振搖溶解或超聲2min，加60%甲醇稀釋至刻度，搖勻， 過濾；精密量取續(xù)濾液5ml，置25ml量瓶中，加內(nèi)標(biāo)溶液5ml，加60%甲醇稀釋至刻度，即得 供試品溶液。
, http://www.www.srpcoatings.com
2.3 線性范圍 分取對照品溶液適量配制成一系列濃度 的混合液，在2.1條件下測定，得到峰面積比A(與內(nèi)標(biāo)峰面積相比)與濃度C(μg/ml)的線 性方程分別為A甲＝0.049+0.016C，r＝0.9998；A左＝-0.001+0.014C， r＝0.9992。線性范圍甲苯咪唑為33.32～166.60μg/ml，鹽酸左旋咪唑為8.51～42. 57μg/ml。
2.4 含量測定 精密吸取對照品溶液和供試品溶液各3μ l，進樣，分別記錄峰面積值。內(nèi)標(biāo)法計算出供試品溶液含量(見圖1、表1)。甲苯咪唑和鹽 酸左旋咪唑的平均回收率分別為98.80%(RSD＝1.24%)，99.37%(RSD＝0.77%)。
圖1 復(fù)方甲苯咪唑片HPLC色譜圖
a-鹽酸左旋咪唑 b-多潘立酮(內(nèi)標(biāo)) c-甲苯咪唑
, 百拇醫(yī)藥
表1 復(fù)方甲苯咪唑片含量測定結(jié)果(%，n＝5，
±s) 批 號
甲苯咪唑
鹽酸左旋咪唑
HPLC法
藥典法
HPLC法
藥典法
9702016
98.33
97.89
96.90
, 百拇醫(yī)藥
96.34
9703026-1
96.29
95.75
95.18
93.93
9704043-2
97.50
97.97
97.66
94.28
9705054-2
, 百拇醫(yī)藥 97.40
99.28
96.13
97.25
9706065-1
96.48
98.17
99.32
95.16
3 討論
①甲苯咪唑和鹽酸左旋咪唑均為含氨基的堿性化合物，為了使2種組分得到很好的分離，作 者通過調(diào)試不同溶劑系統(tǒng)、不同比例、不同酸度的流動相，最終選用甲醇-0.5%醋酸銨溶 液(53∶47，pH 5.0)作流動相。
②考察了極性相近的幾個化合物在本色譜條件下的保留行為，多潘立酮峰形尖銳，保留時間 適中，且與甲苯咪唑和鹽酸左旋咪唑能夠分離，故選作內(nèi)標(biāo)物。
參考文獻(xiàn)
1 金同珍總編.中國藥物大辭典.下冊.北京：中 國醫(yī)藥科技出版社，1991：382～383
2 中國藥典1995年版.二部.1995：483～484
(收稿：1999-10-10), 百拇醫(yī)藥
單位：夏晴 相應(yīng)征 戴興凌 陳明水(解放軍323醫(yī)院藥械科 西安 71 0054)
關(guān)鍵詞：甲苯咪唑；左旋咪唑；高效液相色譜法
西北藥學(xué)雜志000101摘要 采用C8不銹鋼柱，以甲醇-0.5%醋酸銨作流動相(pH＝5.0)， 檢測波長220nm，多潘立酮作為內(nèi)標(biāo)物，峰面積比定量。結(jié)果：該方法回收率甲苯咪唑98.8 0%(RSD＝1.24%)，鹽酸左旋咪唑99.37%(RSD＝0.77%)。
Determination of mebendazole and levamisole in compound mebendazole tab lets by HPLC
Xia Qing, Xiang Yingzheng, Dai Xingling and Chen Mingshui
, 百拇醫(yī)藥
(De partment of Pharmacy, PLA 323 Hospital, Xi'an, 710054)
ABSTRACT To develop a RP-HPLC method for assay of compound m ebendazole tablets with a reverse phase C18(5μm) column(220mm×2.1mm). The mixture of methanol and 0.5% ammonium acetate solution (pH＝5.0) was used as the mobile phase. The detector set at 220nm. Domperidone was used as internal standard substance and peak area ratio was the basis of counting the ingredient contents. The recovery of mebendazole and levamisole were 98.80% and 99.37% r espectively.
, 百拇醫(yī)藥
KEY WORDS compound mebendazole tablets;mebendazole; levamisol e; HPLC
復(fù)方甲苯咪唑片是根據(jù)甲苯咪唑和左旋咪唑?qū)οx體不同的作用機理和 特點配伍制成的復(fù)方制劑〔1〕。中國藥典1995版該藥項下含量測定中，采用分光光 度法測定甲苯咪唑，非水滴定法測定鹽酸左旋咪唑。本文建立HPLC測定其含量，現(xiàn)報道如下 。
1 儀器與試藥
1.1 儀器 P1000高效液相色譜儀，UV1000紫外檢測器及 SP4600積分儀(美國TSP公司)。UV-2100型紫外分光光度計(日本島津)。
1.2 試藥 甲苯咪唑、鹽酸左旋咪唑?qū)φ掌?中國藥品生 物制品檢定所，含量分別為99.20%和98.80%)；甲醇(色譜純)；復(fù)方甲苯咪唑片(陜西省漢 江制藥廠)。
, 百拇醫(yī)藥
2 方法
2.1 色譜條件 SPHERI-5RP-C8色譜柱(220mm×2.1 mm，5μm)，流動相：甲醇-0.5%醋酸銨(53∶47)，用甲酸調(diào)pH為5.0；檢測波長：220nm ，流速：0.4ml/min。
2.2 試液的配制 取多潘立酮約35mg，精密稱定，置100 ml量瓶中，用60%甲醇溶解并稀釋至刻度作內(nèi)標(biāo)溶液。
分別取干燥至恒重的甲苯咪唑?qū)φ掌芳s50mg和鹽酸左旋咪唑?qū)φ掌芳s12.5mg，精密稱定， 分別置于100ml量瓶中，各加入甲酸2ml溶解，加60%甲醇稀釋至刻度，搖勻；分別精密量取5 ml，置25ml量瓶中，加內(nèi)標(biāo)溶液5ml，用60%甲醇稀釋至刻度，即得對照品溶液。
取復(fù)方甲苯咪唑20片，研細(xì)，取適量(約相當(dāng)于甲苯咪唑50mg和鹽酸左旋咪唑12.5mg)，精 密稱定，置100ml量瓶中，加甲酸2ml振搖溶解或超聲2min，加60%甲醇稀釋至刻度，搖勻， 過濾；精密量取續(xù)濾液5ml，置25ml量瓶中，加內(nèi)標(biāo)溶液5ml，加60%甲醇稀釋至刻度，即得 供試品溶液。
, http://www.www.srpcoatings.com
2.3 線性范圍 分取對照品溶液適量配制成一系列濃度 的混合液，在2.1條件下測定，得到峰面積比A(與內(nèi)標(biāo)峰面積相比)與濃度C(μg/ml)的線 性方程分別為A甲＝0.049+0.016C，r＝0.9998；A左＝-0.001+0.014C， r＝0.9992。線性范圍甲苯咪唑為33.32～166.60μg/ml，鹽酸左旋咪唑為8.51～42. 57μg/ml。
2.4 含量測定 精密吸取對照品溶液和供試品溶液各3μ l，進樣，分別記錄峰面積值。內(nèi)標(biāo)法計算出供試品溶液含量(見圖1、表1)。甲苯咪唑和鹽 酸左旋咪唑的平均回收率分別為98.80%(RSD＝1.24%)，99.37%(RSD＝0.77%)。
圖1 復(fù)方甲苯咪唑片HPLC色譜圖
a-鹽酸左旋咪唑 b-多潘立酮(內(nèi)標(biāo)) c-甲苯咪唑
, 百拇醫(yī)藥
表1 復(fù)方甲苯咪唑片含量測定結(jié)果(%，n＝5，
±s) 批 號甲苯咪唑
鹽酸左旋咪唑
HPLC法
藥典法
HPLC法
藥典法
9702016
98.33
97.89
96.90
, 百拇醫(yī)藥
96.34
9703026-1
96.29
95.75
95.18
93.93
9704043-2
97.50
97.97
97.66
94.28
9705054-2
, 百拇醫(yī)藥 97.40
99.28
96.13
97.25
9706065-1
96.48
98.17
99.32
95.16
3 討論
①甲苯咪唑和鹽酸左旋咪唑均為含氨基的堿性化合物，為了使2種組分得到很好的分離，作 者通過調(diào)試不同溶劑系統(tǒng)、不同比例、不同酸度的流動相，最終選用甲醇-0.5%醋酸銨溶 液(53∶47，pH 5.0)作流動相。
②考察了極性相近的幾個化合物在本色譜條件下的保留行為，多潘立酮峰形尖銳，保留時間 適中，且與甲苯咪唑和鹽酸左旋咪唑能夠分離，故選作內(nèi)標(biāo)物。
參考文獻(xiàn)
1 金同珍總編.中國藥物大辭典.下冊.北京：中 國醫(yī)藥科技出版社，1991：382～383
2 中國藥典1995年版.二部.1995：483～484
(收稿：1999-10-10), 百拇醫(yī)藥