高效液相色譜法測(cè)定蒿甲醚膠囊的含量
作者：王子幼 陳祖芬
單位：王子幼(昆明制藥股份有限公司 昆明 650100)；陳祖芬(云南省藥品檢驗(yàn)所 昆明 650011)
關(guān)鍵詞：高效液相色譜；蒿甲醚膠囊；蒿甲醚
藥物分析雜志000314 摘要 目的：建立測(cè)定蒿甲醚膠囊中蒿甲醚含量的高效液相色譜法。方法：選用ODS分析柱，流動(dòng)相：水-乙腈(45∶55)，檢測(cè)波長(zhǎng)：210 nm,流速：1.0 mL.min-1，柱溫：室溫，外標(biāo)法定量。結(jié)果：本法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、快速。線性范圍：50～250 μg(r=0.999 8)。平均回收率為100.8%，RSD=1.5%(n=6)。結(jié)論：建立的方法利于蒿甲醚膠囊的質(zhì)量控制。
Determination of Artemether in Artemether Capsules by HPLC
, http://www.www.srpcoatings.com
Wang Ziyou
(Kunming Pharmaceutical Corp,Kunming 650100)
Chen Zufen
(Yunnan Institute for Drug Control，Kunming 650011)
Abstract Objective：To establish HPLC method for the determination of artemether in artemether capsules.Methods:PUROSPHER(Merck)C18 column(4.0 mm×125 mm,5 μm),with the mobile phase consisted of warter-acetonitrile(45∶55),detection wavelength at 210 nm and external standard method.Results:The average recovery of artemether was 100.8%,with RSD of 1.5%(n=6).Conclusion:The method is simple,rapid and the results is accurate and reliable.
, 百拇醫(yī)藥
Key words HPLC,artemether capsules,artemether
蒿甲醚膠囊是新一代具有特效的抗瘧藥和血吸蟲(chóng)病預(yù)防藥，在部頒標(biāo)準(zhǔn)中膠囊的含量測(cè)定采用紫外分光光度法[1]。本文用高效液相色譜外標(biāo)法直接測(cè)定其含量，使檢測(cè)準(zhǔn)確、快速、簡(jiǎn)便，專屬性提高，利于更好地控制產(chǎn)品質(zhì)量。進(jìn)一步完善標(biāo)準(zhǔn)。
1 試藥與儀器
蒿甲醚對(duì)照品(含量99.8%)，蒿甲醚膠囊(每粒40 mg)均由昆明制藥股份有限公司提供。Waters高效液相色譜儀，乙腈為色譜級(jí)，超純水自制。
2 色譜條件
以PUROSPHER填充RP-18(Merck)，5 μm,4 mm×125 mm色譜分析柱，流動(dòng)相：乙腈-水(55∶45)，檢測(cè)波長(zhǎng)：210 nm，流速：1.0 mL.min-1，柱溫：室溫，理論塔板數(shù)以蒿甲醚計(jì)不低于2 000。
, http://www.www.srpcoatings.com
3 實(shí)驗(yàn)方法
3.1 線性關(guān)系 準(zhǔn)確配制每1 mL含蒿甲醚4 mg的流動(dòng)相溶液，再分別精密量取一定量加流動(dòng)相稀釋制成系列梯度(2.5～12.5 mg.mL-1)的溶液，進(jìn)樣量20 μL，按上述色譜條件測(cè)定峰面積，以峰面積積分值為縱坐標(biāo)，進(jìn)樣量(μg)為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程為：
Y=2.06×104X+0.9×104 r=0.999 8
蒿甲醚峰面積與進(jìn)樣量之間有良好的線性關(guān)系，線性范圍在50～250 μg之間。
3.2 進(jìn)樣重現(xiàn)性與穩(wěn)定性試驗(yàn) 取“樣品測(cè)定”項(xiàng)下的每1 mL含蒿甲醚4 mg的對(duì)照品溶液，重復(fù)進(jìn)樣6次，每次進(jìn)樣20 μL，按上述色譜條件測(cè)定峰面積，RSD=0.62%。經(jīng)放置24 h后測(cè)定，其峰面積基本一致，無(wú)雜質(zhì)峰產(chǎn)生。
, 百拇醫(yī)藥
3.3 干擾性試驗(yàn) 按處方稱取除主藥外的各組分，按樣品測(cè)定方法同法處理，試驗(yàn)結(jié)果表明在蒿甲醚峰保留時(shí)間處無(wú)峰出現(xiàn)，即輔料無(wú)干擾。色譜圖見(jiàn)圖1。
圖1 蒿甲醚對(duì)照品(A)、蒿甲醚膠囊(B)及
膠囊輔料(C)的色譜圖
1.蒿甲醚
3.4 加樣回收率試驗(yàn) 精密稱取蒿甲醚對(duì)照品500 mg，置25 mL量瓶中，加流動(dòng)相溶解完全并稀釋至刻度、搖勻即得對(duì)照品溶液。精密稱取已知含量的同一批樣品的內(nèi)容物適量(相當(dāng)于蒿甲醚100 mg)共6份，分別置25 mL量瓶中，精密加入對(duì)照品溶液5.0 mL,用流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，照“樣品測(cè)定”項(xiàng)下的方法，分別測(cè)定蒿甲醚峰面積，計(jì)算得平均回收率為100.8%，RSD為1.5%(n=6)。
, http://www.www.srpcoatings.com
3.5 樣品含量測(cè)定 取本品10粒精密稱定，傾出內(nèi)容物，研勻，精密稱取適量(相當(dāng)于蒿甲醚100 mg)置25 mL量瓶中，加流動(dòng)相超聲溶解，濾過(guò)，續(xù)濾液作樣品溶液。另取蒿甲醚對(duì)照品加流動(dòng)相溶解制成4 mg.mL-1的溶液作對(duì)照品溶液，按上述色譜條件，分別進(jìn)樣20 μL，按外標(biāo)法計(jì)算其標(biāo)示含量，結(jié)果與部頒標(biāo)準(zhǔn)(UV)法[1]比較，見(jiàn)表1。試驗(yàn)結(jié)果表明，2法測(cè)定結(jié)果基本相符。
表1 本法與部頒標(biāo)準(zhǔn)法含量測(cè)定結(jié)果(%，n=3) 批 次
本 法
部頒法
970240970611
970805
971127
, http://www.www.srpcoatings.com
971208
980305
100.8
98.6
101.2
102.7
100.2
102.6
102.2
96.3
104.6
104.8
100.5
, 百拇醫(yī)藥
101.5
4 討論
4.1 通過(guò)實(shí)驗(yàn)表明高效液相色譜法測(cè)定蒿甲醚膠囊含量較部頒標(biāo)準(zhǔn)既簡(jiǎn)化了操作，縮短試驗(yàn)周期，又能直接采用色譜峰面積定量，結(jié)果準(zhǔn)確，提高專屬性。
4.2 本實(shí)驗(yàn)經(jīng)方法學(xué)考察表明蒿甲醚膠囊中其他組分對(duì)主藥測(cè)定無(wú)干擾，其精密性、重現(xiàn)性均好，回收率好，結(jié)果較滿意，且測(cè)定結(jié)果能更真實(shí)地反映主藥蒿甲醚的含量。使蒿甲醚膠囊的質(zhì)量檢測(cè)更趨全面和完善。
4.3 實(shí)驗(yàn)中所需蒿甲醚對(duì)照品因含水低(小于0.5%)，經(jīng)實(shí)驗(yàn)證明，未經(jīng)五氧化二磷干燥過(guò)夜完全能達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)要求。
參考文獻(xiàn)
1，中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部部頒標(biāo)準(zhǔn).WS1-(X-119)-96Z
(本文于1999年4月5日收到), 百拇醫(yī)藥
單位：王子幼(昆明制藥股份有限公司 昆明 650100)；陳祖芬(云南省藥品檢驗(yàn)所 昆明 650011)
關(guān)鍵詞：高效液相色譜；蒿甲醚膠囊；蒿甲醚
藥物分析雜志000314 摘要 目的：建立測(cè)定蒿甲醚膠囊中蒿甲醚含量的高效液相色譜法。方法：選用ODS分析柱，流動(dòng)相：水-乙腈(45∶55)，檢測(cè)波長(zhǎng)：210 nm,流速：1.0 mL.min-1，柱溫：室溫，外標(biāo)法定量。結(jié)果：本法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、快速。線性范圍：50～250 μg(r=0.999 8)。平均回收率為100.8%，RSD=1.5%(n=6)。結(jié)論：建立的方法利于蒿甲醚膠囊的質(zhì)量控制。
Determination of Artemether in Artemether Capsules by HPLC
, http://www.www.srpcoatings.com
Wang Ziyou
(Kunming Pharmaceutical Corp,Kunming 650100)
Chen Zufen
(Yunnan Institute for Drug Control，Kunming 650011)
Abstract Objective：To establish HPLC method for the determination of artemether in artemether capsules.Methods:PUROSPHER(Merck)C18 column(4.0 mm×125 mm,5 μm),with the mobile phase consisted of warter-acetonitrile(45∶55),detection wavelength at 210 nm and external standard method.Results:The average recovery of artemether was 100.8%,with RSD of 1.5%(n=6).Conclusion:The method is simple,rapid and the results is accurate and reliable.
, 百拇醫(yī)藥
Key words HPLC,artemether capsules,artemether
蒿甲醚膠囊是新一代具有特效的抗瘧藥和血吸蟲(chóng)病預(yù)防藥，在部頒標(biāo)準(zhǔn)中膠囊的含量測(cè)定采用紫外分光光度法[1]。本文用高效液相色譜外標(biāo)法直接測(cè)定其含量，使檢測(cè)準(zhǔn)確、快速、簡(jiǎn)便，專屬性提高，利于更好地控制產(chǎn)品質(zhì)量。進(jìn)一步完善標(biāo)準(zhǔn)。
1 試藥與儀器
蒿甲醚對(duì)照品(含量99.8%)，蒿甲醚膠囊(每粒40 mg)均由昆明制藥股份有限公司提供。Waters高效液相色譜儀，乙腈為色譜級(jí)，超純水自制。
2 色譜條件
以PUROSPHER填充RP-18(Merck)，5 μm,4 mm×125 mm色譜分析柱，流動(dòng)相：乙腈-水(55∶45)，檢測(cè)波長(zhǎng)：210 nm，流速：1.0 mL.min-1，柱溫：室溫，理論塔板數(shù)以蒿甲醚計(jì)不低于2 000。
, http://www.www.srpcoatings.com
3 實(shí)驗(yàn)方法
3.1 線性關(guān)系 準(zhǔn)確配制每1 mL含蒿甲醚4 mg的流動(dòng)相溶液，再分別精密量取一定量加流動(dòng)相稀釋制成系列梯度(2.5～12.5 mg.mL-1)的溶液，進(jìn)樣量20 μL，按上述色譜條件測(cè)定峰面積，以峰面積積分值為縱坐標(biāo)，進(jìn)樣量(μg)為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程為：
Y=2.06×104X+0.9×104 r=0.999 8
蒿甲醚峰面積與進(jìn)樣量之間有良好的線性關(guān)系，線性范圍在50～250 μg之間。
3.2 進(jìn)樣重現(xiàn)性與穩(wěn)定性試驗(yàn) 取“樣品測(cè)定”項(xiàng)下的每1 mL含蒿甲醚4 mg的對(duì)照品溶液，重復(fù)進(jìn)樣6次，每次進(jìn)樣20 μL，按上述色譜條件測(cè)定峰面積，RSD=0.62%。經(jīng)放置24 h后測(cè)定，其峰面積基本一致，無(wú)雜質(zhì)峰產(chǎn)生。
, 百拇醫(yī)藥
3.3 干擾性試驗(yàn) 按處方稱取除主藥外的各組分，按樣品測(cè)定方法同法處理，試驗(yàn)結(jié)果表明在蒿甲醚峰保留時(shí)間處無(wú)峰出現(xiàn)，即輔料無(wú)干擾。色譜圖見(jiàn)圖1。
圖1 蒿甲醚對(duì)照品(A)、蒿甲醚膠囊(B)及
膠囊輔料(C)的色譜圖
1.蒿甲醚
3.4 加樣回收率試驗(yàn) 精密稱取蒿甲醚對(duì)照品500 mg，置25 mL量瓶中，加流動(dòng)相溶解完全并稀釋至刻度、搖勻即得對(duì)照品溶液。精密稱取已知含量的同一批樣品的內(nèi)容物適量(相當(dāng)于蒿甲醚100 mg)共6份，分別置25 mL量瓶中，精密加入對(duì)照品溶液5.0 mL,用流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，照“樣品測(cè)定”項(xiàng)下的方法，分別測(cè)定蒿甲醚峰面積，計(jì)算得平均回收率為100.8%，RSD為1.5%(n=6)。
, http://www.www.srpcoatings.com
3.5 樣品含量測(cè)定 取本品10粒精密稱定，傾出內(nèi)容物，研勻，精密稱取適量(相當(dāng)于蒿甲醚100 mg)置25 mL量瓶中，加流動(dòng)相超聲溶解，濾過(guò)，續(xù)濾液作樣品溶液。另取蒿甲醚對(duì)照品加流動(dòng)相溶解制成4 mg.mL-1的溶液作對(duì)照品溶液，按上述色譜條件，分別進(jìn)樣20 μL，按外標(biāo)法計(jì)算其標(biāo)示含量，結(jié)果與部頒標(biāo)準(zhǔn)(UV)法[1]比較，見(jiàn)表1。試驗(yàn)結(jié)果表明，2法測(cè)定結(jié)果基本相符。
表1 本法與部頒標(biāo)準(zhǔn)法含量測(cè)定結(jié)果(%，n=3) 批 次
本 法
部頒法
970240970611
970805
971127
, http://www.www.srpcoatings.com
971208
980305
100.8
98.6
101.2
102.7
100.2
102.6
102.2
96.3
104.6
104.8
100.5
, 百拇醫(yī)藥
101.5
4 討論
4.1 通過(guò)實(shí)驗(yàn)表明高效液相色譜法測(cè)定蒿甲醚膠囊含量較部頒標(biāo)準(zhǔn)既簡(jiǎn)化了操作，縮短試驗(yàn)周期，又能直接采用色譜峰面積定量，結(jié)果準(zhǔn)確，提高專屬性。
4.2 本實(shí)驗(yàn)經(jīng)方法學(xué)考察表明蒿甲醚膠囊中其他組分對(duì)主藥測(cè)定無(wú)干擾，其精密性、重現(xiàn)性均好，回收率好，結(jié)果較滿意，且測(cè)定結(jié)果能更真實(shí)地反映主藥蒿甲醚的含量。使蒿甲醚膠囊的質(zhì)量檢測(cè)更趨全面和完善。
4.3 實(shí)驗(yàn)中所需蒿甲醚對(duì)照品因含水低(小于0.5%)，經(jīng)實(shí)驗(yàn)證明，未經(jīng)五氧化二磷干燥過(guò)夜完全能達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)要求。
參考文獻(xiàn)
1，中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部部頒標(biāo)準(zhǔn).WS1-(X-119)-96Z
(本文于1999年4月5日收到), 百拇醫(yī)藥