薄層掃描法測定三七消痔栓中人參皂甙Re的含量
作者：鄭峰 葉桂生
單位：鄭峰(安徽省淮北市藥品檢驗(yàn)所 235000)；葉桂生(安徽大學(xué)化學(xué)化工學(xué)院 230001)
關(guān)鍵詞：三七消痔栓；人參皂甙Re；薄層掃描法
首都醫(yī)藥000622摘要 采用雙波長薄層掃描法測定中成藥三七消痔栓中人參皂甙Re的含量，平均回收率為99.28%，RSD為0.64%。本方法簡便，靈敏度高，重現(xiàn)性好，可作為該藥的質(zhì)量控制指標(biāo)之一，也可為含三七類中成藥栓劑的定量作參考。
三七消痔栓是由三七、冰片、紅花等十一味中藥組成的復(fù)方制劑。其中三七為首藥，故本文選擇人參皂甙Re為指標(biāo)，用雙波長薄層掃描法測定其含量，控制其內(nèi)在質(zhì)量。
1.儀器與試藥
CS-930型雙波長薄層掃描儀(日本島津)。人參皂甙Re(中國藥品生物制品檢定所)，硅膠G(青島海洋化工廠)，溶劑和試劑均為分析純。樣品(解放軍291醫(yī)院)。
, 百拇醫(yī)藥
2.實(shí)驗(yàn)方法
2.1 層析條件 吸附劑：將硅膠G與0.5%CMC-Na(1:3)混合鋪板，105℃活化1小時備用。展開劑：氯仿一醋酸乙酯一甲醇一水(15：40：22：10)10℃下放置的下層溶液(1)。顯色劑：噴10%硫酸乙醇溶液后在105℃加熱5分鐘。
2.2 掃描條件 雙波長反射吸收法，鋸齒掃描。狹縫1.2×1.2mm，靈敏度中等，測定波長λS＝530nm，參比波長λR＝600nm，線性化參數(shù)SX＝3。
2.3 對照品溶液的制備 取人參皂甙Re標(biāo)準(zhǔn)品約5mg，精密稱定置于5ml量瓶中，加入甲醇溶解并稀釋至刻度。
2.4 供試品溶液的制備 取本品約8g，精密稱定至燒瓶中，加乙醚100ml，水浴回流提取2小時，棄去乙醚液。殘?jiān)鼡]干溶劑，加甲醇100ml，水浴回流提取4小時，放冷，過濾，殘?jiān)偌蛹状?0ml，回流提取1小時，放冷、過濾，殘?jiān)儆眉状枷磧纱�，每�?0ml，過濾、合并濾液。濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml微熱溶解后加入氨水1ml搖勻，用水飽和正丁醇提取5次(20、20、10、10、10ml)，合并正丁醇提取液，用20ml氨水分兩次洗滌正丁醇提取液，每次10ml，棄去氨水液，將正丁醇提取液蒸干，殘?jiān)蛹状既芙�，冰水浴中冷卻后過濾，濾液轉(zhuǎn)入10ml量瓶中，用甲醇洗滌后，并入10ml量瓶中，用甲醇稀釋至刻度。
, 百拇醫(yī)藥
2.5線性關(guān)系考查 用定量毛細(xì)管吸取1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ul對照品溶液，點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，按上述層析條件展開，顯色后掃描，用最小兩乘法求得回歸方程為：Y＝3793.77X-858.97 γ＝0.9983 (Y為吸收度積分值，X為標(biāo)準(zhǔn)品的量：ug)結(jié)果表明：人參皂甙Re在1.02-5.10ug范圍內(nèi)線性良好。
2.6 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取供試品溶液10μl，點(diǎn)于硅膠G薄層板上，按上述層析條件展開，顯色，每隔20分鐘掃描，其結(jié)果在3小時內(nèi)面積積分值不變。
2.7 精密度考察 用定量毛細(xì)管吸取供試品溶液10μl，點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上6個點(diǎn)，按上述條件展開，顯色后掃描，RSD＝2.13%。
2.8加樣回收試驗(yàn) 準(zhǔn)確稱取已知含量的樣品5份，每份約8g，精密加入標(biāo)準(zhǔn)品約2mg，除對照品溶液點(diǎn)3μl和5μl，其它操作按樣品測定的方法制備并測定，結(jié)果見表1。
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表1 加樣回收試驗(yàn)結(jié)果 測定
次數(shù)
樣品量
(g)
供試品含
量(μg)
對照品加
入量(μg)
供試品及對照品
測得總量(μg)
回收率
(%)
1
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7.7418
1.192
2.14
3.327
99.77
2
7.8503
1.209
2.02
3.208
98.96
3
7.7989
, 百拇醫(yī)藥
1.201
2.07
3.241
98.55
4
8.3684
1.289
2.15
3.442
100.1
5
7.7286
1.190
, http://www.www.srpcoatings.com
2.12
3.289
99.01
平均值(%)：99.28，RSD(%)：0.64
2.9樣品中人參皂甙Re的含量測定 精密吸取供試品溶液10μl，對照品溶液1μl和3μl分別交叉點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，按上述條件展開，顯色后掃描，結(jié)果見表2。
表2 樣品中人參皂甙Re的含量 (n＝5) 批 號
樣品量(g)
測得量(μg)
含量(mg/g)
RSD(%)
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991225
7.8812
1.216
0.154
1.12
991227
8.1165
1.351
0.166
1.47
991229
8.2857
1.238
, http://www.www.srpcoatings.com
0.149
1.56
3.討論
三七中所含有的人參皂甙Re與三七皂甙R1極性相近，本文所采用的展開劑恰能使二者分開，為含三七類中成藥中人參皂Re的測定提供了方法。
本法為薄層掃描法測定，很大程度上排除了其它成分和雜質(zhì)的干擾，使測得結(jié)果準(zhǔn)確，可作為三七消痔栓質(zhì)量控制指標(biāo)之一。
參考文獻(xiàn)
1，藥典委員會編.中國藥典(一部)，廣東科技出版社，1995，9
2，肖崇厚主編.中藥化學(xué)，上�？萍汲霭嫔�，1992，293
3，魏獻(xiàn)春.廣東藥學(xué)院學(xué)報，1999，15(1)：13
(2000-04-27 收稿), 百拇醫(yī)藥
單位：鄭峰(安徽省淮北市藥品檢驗(yàn)所 235000)；葉桂生(安徽大學(xué)化學(xué)化工學(xué)院 230001)
關(guān)鍵詞：三七消痔栓；人參皂甙Re；薄層掃描法
首都醫(yī)藥000622摘要 采用雙波長薄層掃描法測定中成藥三七消痔栓中人參皂甙Re的含量，平均回收率為99.28%，RSD為0.64%。本方法簡便，靈敏度高，重現(xiàn)性好，可作為該藥的質(zhì)量控制指標(biāo)之一，也可為含三七類中成藥栓劑的定量作參考。
三七消痔栓是由三七、冰片、紅花等十一味中藥組成的復(fù)方制劑。其中三七為首藥，故本文選擇人參皂甙Re為指標(biāo)，用雙波長薄層掃描法測定其含量，控制其內(nèi)在質(zhì)量。
1.儀器與試藥
CS-930型雙波長薄層掃描儀(日本島津)。人參皂甙Re(中國藥品生物制品檢定所)，硅膠G(青島海洋化工廠)，溶劑和試劑均為分析純。樣品(解放軍291醫(yī)院)。
, 百拇醫(yī)藥
2.實(shí)驗(yàn)方法
2.1 層析條件 吸附劑：將硅膠G與0.5%CMC-Na(1:3)混合鋪板，105℃活化1小時備用。展開劑：氯仿一醋酸乙酯一甲醇一水(15：40：22：10)10℃下放置的下層溶液(1)。顯色劑：噴10%硫酸乙醇溶液后在105℃加熱5分鐘。
2.2 掃描條件 雙波長反射吸收法，鋸齒掃描。狹縫1.2×1.2mm，靈敏度中等，測定波長λS＝530nm，參比波長λR＝600nm，線性化參數(shù)SX＝3。
2.3 對照品溶液的制備 取人參皂甙Re標(biāo)準(zhǔn)品約5mg，精密稱定置于5ml量瓶中，加入甲醇溶解并稀釋至刻度。
2.4 供試品溶液的制備 取本品約8g，精密稱定至燒瓶中，加乙醚100ml，水浴回流提取2小時，棄去乙醚液。殘?jiān)鼡]干溶劑，加甲醇100ml，水浴回流提取4小時，放冷，過濾，殘?jiān)偌蛹状?0ml，回流提取1小時，放冷、過濾，殘?jiān)儆眉状枷磧纱�，每�?0ml，過濾、合并濾液。濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml微熱溶解后加入氨水1ml搖勻，用水飽和正丁醇提取5次(20、20、10、10、10ml)，合并正丁醇提取液，用20ml氨水分兩次洗滌正丁醇提取液，每次10ml，棄去氨水液，將正丁醇提取液蒸干，殘?jiān)蛹状既芙�，冰水浴中冷卻后過濾，濾液轉(zhuǎn)入10ml量瓶中，用甲醇洗滌后，并入10ml量瓶中，用甲醇稀釋至刻度。
, 百拇醫(yī)藥
2.5線性關(guān)系考查 用定量毛細(xì)管吸取1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ul對照品溶液，點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，按上述層析條件展開，顯色后掃描，用最小兩乘法求得回歸方程為：Y＝3793.77X-858.97 γ＝0.9983 (Y為吸收度積分值，X為標(biāo)準(zhǔn)品的量：ug)結(jié)果表明：人參皂甙Re在1.02-5.10ug范圍內(nèi)線性良好。
2.6 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取供試品溶液10μl，點(diǎn)于硅膠G薄層板上，按上述層析條件展開，顯色，每隔20分鐘掃描，其結(jié)果在3小時內(nèi)面積積分值不變。
2.7 精密度考察 用定量毛細(xì)管吸取供試品溶液10μl，點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上6個點(diǎn)，按上述條件展開，顯色后掃描，RSD＝2.13%。
2.8加樣回收試驗(yàn) 準(zhǔn)確稱取已知含量的樣品5份，每份約8g，精密加入標(biāo)準(zhǔn)品約2mg，除對照品溶液點(diǎn)3μl和5μl，其它操作按樣品測定的方法制備并測定，結(jié)果見表1。
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表1 加樣回收試驗(yàn)結(jié)果 測定
次數(shù)
樣品量
(g)
供試品含
量(μg)
對照品加
入量(μg)
供試品及對照品
測得總量(μg)
回收率
(%)
1
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7.7418
1.192
2.14
3.327
99.77
2
7.8503
1.209
2.02
3.208
98.96
3
7.7989
, 百拇醫(yī)藥
1.201
2.07
3.241
98.55
4
8.3684
1.289
2.15
3.442
100.1
5
7.7286
1.190
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2.12
3.289
99.01
平均值(%)：99.28，RSD(%)：0.64
2.9樣品中人參皂甙Re的含量測定 精密吸取供試品溶液10μl，對照品溶液1μl和3μl分別交叉點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，按上述條件展開，顯色后掃描，結(jié)果見表2。
表2 樣品中人參皂甙Re的含量 (n＝5) 批 號
樣品量(g)
測得量(μg)
含量(mg/g)
RSD(%)
, http://www.www.srpcoatings.com
991225
7.8812
1.216
0.154
1.12
991227
8.1165
1.351
0.166
1.47
991229
8.2857
1.238
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0.149
1.56
3.討論
三七中所含有的人參皂甙Re與三七皂甙R1極性相近，本文所采用的展開劑恰能使二者分開，為含三七類中成藥中人參皂Re的測定提供了方法。
本法為薄層掃描法測定，很大程度上排除了其它成分和雜質(zhì)的干擾，使測得結(jié)果準(zhǔn)確，可作為三七消痔栓質(zhì)量控制指標(biāo)之一。
參考文獻(xiàn)
1，藥典委員會編.中國藥典(一部)，廣東科技出版社，1995，9
2，肖崇厚主編.中藥化學(xué)，上�？萍汲霭嫔�，1992，293
3，魏獻(xiàn)春.廣東藥學(xué)院學(xué)報，1999，15(1)：13
(2000-04-27 收稿), 百拇醫(yī)藥