PCR法檢測戊型肝炎患者唾液和尿液中的HEVRNA
作者：芮志蓮 吳家明
單位：溧陽市人民醫(yī)院(213300)
關(guān)鍵詞：
江蘇醫(yī)藥991235 關(guān)于戊型肝炎(戊肝)患者體液有無傳染性的問題，極少有報道。為此我們收集了我院1997年～1998年間38例戊肝患者的唾液和尿液，檢測HEVRNA，并對其意義進(jìn)行探討，現(xiàn)將結(jié)果報告如下。
資料與方法
一、資料：38份血清采自本院傳染科住院的38例戊肝患者，男22例，女16例，年齡18～67歲，平均40.5歲，病程1～6個月不等。血清抗HEV-IgM和抗HEV-IgG反復(fù)陽性，ALT反復(fù)異常，病后未經(jīng)過抗病毒治療。
二、標(biāo)本處理：在采集血標(biāo)本的同一天內(nèi)，用無菌容器收集患者清晨和進(jìn)食前的唾液；第一次中段尿液3ml。并于采集后1小時內(nèi)，將唾液和尿液分別離心20分鐘，棄上清液，留取沉淀，置-70℃冰箱保存直至進(jìn)行HEVRNA的檢測。
三、檢測試劑與儀器：HEVRNA試劑為華美生物工程有限公司生產(chǎn)，擴(kuò)增儀為美國PE-2400型。
四、檢測方法：嚴(yán)格按試劑盒說明書操作，所用試劑每一包裝僅供一批實驗應(yīng)用；實驗所用反應(yīng)管、離心管、吸頭均無菌消毒后一次性使用；每份標(biāo)本均重復(fù)二次測定，結(jié)果均相符。
結(jié)果
38份唾液和尿液均無特異性擴(kuò)增帶出現(xiàn)，均為HEVRNA陰性，而用同樣PCR方法所檢測的38例血清在預(yù)期位置上均出現(xiàn)特異性擴(kuò)增帶，均為HEVRNA陽性。同時我們檢測了30例正常人血清HEVRNA，結(jié)果均為陰性，說明本次實驗結(jié)果是可信的。
討論
本文所檢測的38份血清HEVRNA均為陽性，說明該方法的敏感性較好，可排除方法本身對結(jié)果的影響。對象為住院病人，血清ALT反復(fù)異常，黃疸較重，其血清中HEV的滴度至少不低于一般水平，故避免了病情的輕重對體液中HEVRNA檢出率的影響。
唾液和尿液中未能檢測出HEVRNA，可能由于(1)乙肝患者，其HBV在血清和體液間濃度梯度高達(dá)109～1010病毒顆粒/ml，易形成病毒在血清與體液間的被動擴(kuò)散。而戊肝患者血清HEV滴度很低，即使HEV能通過破損的脈管和上皮組織進(jìn)入體液，經(jīng)過體液的進(jìn)一步稀釋，其含量也是極微量的，我們認(rèn)為這可能是唾液和尿液中未能檢出HEVRNA的一個重要原因。(2)體液中RNA酶能降解破壞HEVRNA。我們在采集唾液和尿液標(biāo)本時，于采集后一小時內(nèi)作標(biāo)本處理，后置-70℃保存�？赡芪旄尾《驹隗w內(nèi)時，已被存在于體液中的RNA酶降解，以至不能檢出。
本文結(jié)果表明，我們未能在戊肝患者的唾液和尿液中檢出HEVRNA，是否戊肝患者通過尿液和唾液傳染性的可能性較小。但我們的結(jié)果僅是初步探討，有關(guān)戊肝患者唾液和尿液的傳染性問題，尚待進(jìn)一步研究和探索。, 百拇醫(yī)藥
單位：溧陽市人民醫(yī)院(213300)
關(guān)鍵詞：
江蘇醫(yī)藥991235 關(guān)于戊型肝炎(戊肝)患者體液有無傳染性的問題，極少有報道。為此我們收集了我院1997年～1998年間38例戊肝患者的唾液和尿液，檢測HEVRNA，并對其意義進(jìn)行探討，現(xiàn)將結(jié)果報告如下。
資料與方法
一、資料：38份血清采自本院傳染科住院的38例戊肝患者，男22例，女16例，年齡18～67歲，平均40.5歲，病程1～6個月不等。血清抗HEV-IgM和抗HEV-IgG反復(fù)陽性，ALT反復(fù)異常，病后未經(jīng)過抗病毒治療。
二、標(biāo)本處理：在采集血標(biāo)本的同一天內(nèi)，用無菌容器收集患者清晨和進(jìn)食前的唾液；第一次中段尿液3ml。并于采集后1小時內(nèi)，將唾液和尿液分別離心20分鐘，棄上清液，留取沉淀，置-70℃冰箱保存直至進(jìn)行HEVRNA的檢測。
三、檢測試劑與儀器：HEVRNA試劑為華美生物工程有限公司生產(chǎn)，擴(kuò)增儀為美國PE-2400型。
四、檢測方法：嚴(yán)格按試劑盒說明書操作，所用試劑每一包裝僅供一批實驗應(yīng)用；實驗所用反應(yīng)管、離心管、吸頭均無菌消毒后一次性使用；每份標(biāo)本均重復(fù)二次測定，結(jié)果均相符。
結(jié)果
38份唾液和尿液均無特異性擴(kuò)增帶出現(xiàn)，均為HEVRNA陰性，而用同樣PCR方法所檢測的38例血清在預(yù)期位置上均出現(xiàn)特異性擴(kuò)增帶，均為HEVRNA陽性。同時我們檢測了30例正常人血清HEVRNA，結(jié)果均為陰性，說明本次實驗結(jié)果是可信的。
討論
本文所檢測的38份血清HEVRNA均為陽性，說明該方法的敏感性較好，可排除方法本身對結(jié)果的影響。對象為住院病人，血清ALT反復(fù)異常，黃疸較重，其血清中HEV的滴度至少不低于一般水平，故避免了病情的輕重對體液中HEVRNA檢出率的影響。
唾液和尿液中未能檢測出HEVRNA，可能由于(1)乙肝患者，其HBV在血清和體液間濃度梯度高達(dá)109～1010病毒顆粒/ml，易形成病毒在血清與體液間的被動擴(kuò)散。而戊肝患者血清HEV滴度很低，即使HEV能通過破損的脈管和上皮組織進(jìn)入體液，經(jīng)過體液的進(jìn)一步稀釋，其含量也是極微量的，我們認(rèn)為這可能是唾液和尿液中未能檢出HEVRNA的一個重要原因。(2)體液中RNA酶能降解破壞HEVRNA。我們在采集唾液和尿液標(biāo)本時，于采集后一小時內(nèi)作標(biāo)本處理，后置-70℃保存�？赡芪旄尾《驹隗w內(nèi)時，已被存在于體液中的RNA酶降解，以至不能檢出。
本文結(jié)果表明，我們未能在戊肝患者的唾液和尿液中檢出HEVRNA，是否戊肝患者通過尿液和唾液傳染性的可能性較小。但我們的結(jié)果僅是初步探討，有關(guān)戊肝患者唾液和尿液的傳染性問題，尚待進(jìn)一步研究和探索。, 百拇醫(yī)藥