花粉癥患者IL-10的檢測及其意義
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作者：張宗芬 袁潤英 賈金波 關(guān)晶
單位：張宗芬(北京積水潭醫(yī)院耳鼻咽喉科 郵政編碼 100035)；袁潤英(北京市創(chuàng)傷骨科研究所)；賈金波(北京積水潭醫(yī)院耳鼻咽喉科 郵政編碼 100035)；關(guān)晶(北京積水潭醫(yī)院耳鼻咽喉科 郵政編碼 100035)
關(guān)鍵詞：
北京醫(yī)學000518 為探討IL-10與花粉癥的關(guān)系及臨床應(yīng)用價值，我們采用雙抗體夾心ELISA法測定了花粉癥發(fā)作期患者的血清和鼻分泌物中IL-10的濃度，并與緩解期患者和正常人進行了比較分析。
對象與方法
一、對象
選擇我科變態(tài)反應(yīng)門診確診的花粉癥患者，診斷條件符合1990年烏魯木齊鼻科會議制定的診斷和療效評定標準。
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1.實驗組：花粉癥急性發(fā)作期患者20例，男10例，女10例；平均年齡39.5(18～58)歲；有典型的癥狀和體征，處于發(fā)作狀態(tài)。需用藥物控制，未接受過脫敏、手術(shù)、封閉治療。
2.對照組：花粉癥緩解期患者14例，男8例，女6例，平均年齡38.5(18～59)歲；無臨床表現(xiàn)，不需用藥，處于緩解狀態(tài)。
3.正常對照組25例，男16例，女9例，平均年齡32.9(19～52)歲。無個人及家族過敏史，無鼻部疾病，大便蟲卵陰性，近期無任何服藥史。
二、實驗方法
1.標本收集：于上午采用明膠海綿6cm×2cm×0.5cm各一塊分別放入兩側(cè)鼻腔，10～15分鐘后取出，將分泌物擠于試管中。同時抽取靜脈血，沉淀、離心，取其上清液和血清，-20℃冰箱保存待測。所有受檢對象受檢前3天內(nèi)未用過糖皮質(zhì)類固醇激素和抗組胺藥及滴鼻劑。
, 百拇醫(yī)藥
2.實驗步驟：鼻分泌物和血清IL-10的測定采用雙抗體夾心ELISA法，用抗IL-10單克隆抗體包被(4μg/ml，4℃過夜)于96孔酶標板(美國Corming酶標板)。平衡至室溫，加入待測血清或鼻分泌物上清液及不同濃度的標準品100μl至相應(yīng)孔中，用封板膠紙封住反應(yīng)孔，37℃，90分鐘。洗板4次，除零孔外，每孔加1∶250生物素二次抗體n-z-S10 100μl，封住板孔，37℃ 60分鐘洗板4次。除零孔外，每孔加1∶800酶聯(lián)物100μl，封住板孔。37℃，30分鐘。洗板4次，每孔加底物(顯色劑)A、B各50μl避光37℃ 15分鐘。加終止液50μl，終止反應(yīng)。在Dynatech MR 500酶標儀測定450nm值。以IL-10標準品濃度作橫坐標，OD值作縱坐標。通過待測血清和鼻分泌物樣品IL-10的OD值可在標準曲線上查出其濃度，以pg/ml表示。IL-10試劑盒由深圳晶美生物工程有限公司提供。
三、統(tǒng)計學分析
檢測數(shù)據(jù)用
±s表示，采用t檢驗。
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結(jié) 果
一、血清IL-10水平
各組IL-10水平比較，花粉癥急性發(fā)作組(9.7±5.7pg/ml)明顯低于緩解期組(17.1±9.2pg/ml)和正常對照組(20.8±9.8pg/ml)(P<0.05，P<0.01)。后兩組無顯著性差異(P>0.05)。
二、鼻分泌物IL-10水平
各組鼻分泌物IL-10水平比較，實驗組(8.6±4.8pg/ml)與緩解期組(15.3±9.5pg/ml)和正常對照(16.9±8.0pg/ml)有顯著性差異(P<0.05，P<0.01)。緩解組與正常組比較無顯著性差異(P>0.05)。
討 論
本試驗結(jié)果表明花粉癥急性發(fā)作期患者血清和鼻分泌物中IL-10水平均明顯低于緩解期和正常人群(P<0.01)，而緩解期患者與正常人則無明顯差異，提示IL-10的水平與花粉癥的病理生理過程密切相關(guān)。
本實驗中，花粉癥發(fā)作期、緩解期、正常人群血清IL-10的濃度均較鼻分泌物高，說明IL-10主要存在于血清中，但實驗組與緩解組、正常組鼻分泌物IL-10濃度比較仍有顯著性差異(P<0.05，P<0.01)，表明IL-10在鼻變應(yīng)性疾病的發(fā)病過程中起到一定作用，用激素和/或其他能誘導(dǎo)IL-10合成和釋放的藥物或方法則可減輕氣道的炎癥反應(yīng)，對變應(yīng)性疾病的治療具有一定的價值。
收稿：1998-04-03
修回：1998-10-15, 百拇醫(yī)藥
單位：張宗芬(北京積水潭醫(yī)院耳鼻咽喉科 郵政編碼 100035)；袁潤英(北京市創(chuàng)傷骨科研究所)；賈金波(北京積水潭醫(yī)院耳鼻咽喉科 郵政編碼 100035)；關(guān)晶(北京積水潭醫(yī)院耳鼻咽喉科 郵政編碼 100035)
關(guān)鍵詞：
北京醫(yī)學000518 為探討IL-10與花粉癥的關(guān)系及臨床應(yīng)用價值，我們采用雙抗體夾心ELISA法測定了花粉癥發(fā)作期患者的血清和鼻分泌物中IL-10的濃度，并與緩解期患者和正常人進行了比較分析。
對象與方法
一、對象
選擇我科變態(tài)反應(yīng)門診確診的花粉癥患者，診斷條件符合1990年烏魯木齊鼻科會議制定的診斷和療效評定標準。
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1.實驗組：花粉癥急性發(fā)作期患者20例，男10例，女10例；平均年齡39.5(18～58)歲；有典型的癥狀和體征，處于發(fā)作狀態(tài)。需用藥物控制，未接受過脫敏、手術(shù)、封閉治療。
2.對照組：花粉癥緩解期患者14例，男8例，女6例，平均年齡38.5(18～59)歲；無臨床表現(xiàn)，不需用藥，處于緩解狀態(tài)。
3.正常對照組25例，男16例，女9例，平均年齡32.9(19～52)歲。無個人及家族過敏史，無鼻部疾病，大便蟲卵陰性，近期無任何服藥史。
二、實驗方法
1.標本收集：于上午采用明膠海綿6cm×2cm×0.5cm各一塊分別放入兩側(cè)鼻腔，10～15分鐘后取出，將分泌物擠于試管中。同時抽取靜脈血，沉淀、離心，取其上清液和血清，-20℃冰箱保存待測。所有受檢對象受檢前3天內(nèi)未用過糖皮質(zhì)類固醇激素和抗組胺藥及滴鼻劑。
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2.實驗步驟：鼻分泌物和血清IL-10的測定采用雙抗體夾心ELISA法，用抗IL-10單克隆抗體包被(4μg/ml，4℃過夜)于96孔酶標板(美國Corming酶標板)。平衡至室溫，加入待測血清或鼻分泌物上清液及不同濃度的標準品100μl至相應(yīng)孔中，用封板膠紙封住反應(yīng)孔，37℃，90分鐘。洗板4次，除零孔外，每孔加1∶250生物素二次抗體n-z-S10 100μl，封住板孔，37℃ 60分鐘洗板4次。除零孔外，每孔加1∶800酶聯(lián)物100μl，封住板孔。37℃，30分鐘。洗板4次，每孔加底物(顯色劑)A、B各50μl避光37℃ 15分鐘。加終止液50μl，終止反應(yīng)。在Dynatech MR 500酶標儀測定450nm值。以IL-10標準品濃度作橫坐標，OD值作縱坐標。通過待測血清和鼻分泌物樣品IL-10的OD值可在標準曲線上查出其濃度，以pg/ml表示。IL-10試劑盒由深圳晶美生物工程有限公司提供。
三、統(tǒng)計學分析
檢測數(shù)據(jù)用
±s表示，采用t檢驗。, http://www.www.srpcoatings.com
結(jié) 果
一、血清IL-10水平
各組IL-10水平比較，花粉癥急性發(fā)作組(9.7±5.7pg/ml)明顯低于緩解期組(17.1±9.2pg/ml)和正常對照組(20.8±9.8pg/ml)(P<0.05，P<0.01)。后兩組無顯著性差異(P>0.05)。
二、鼻分泌物IL-10水平
各組鼻分泌物IL-10水平比較，實驗組(8.6±4.8pg/ml)與緩解期組(15.3±9.5pg/ml)和正常對照(16.9±8.0pg/ml)有顯著性差異(P<0.05，P<0.01)。緩解組與正常組比較無顯著性差異(P>0.05)。
討 論
本試驗結(jié)果表明花粉癥急性發(fā)作期患者血清和鼻分泌物中IL-10水平均明顯低于緩解期和正常人群(P<0.01)，而緩解期患者與正常人則無明顯差異，提示IL-10的水平與花粉癥的病理生理過程密切相關(guān)。
本實驗中，花粉癥發(fā)作期、緩解期、正常人群血清IL-10的濃度均較鼻分泌物高，說明IL-10主要存在于血清中，但實驗組與緩解組、正常組鼻分泌物IL-10濃度比較仍有顯著性差異(P<0.05，P<0.01)，表明IL-10在鼻變應(yīng)性疾病的發(fā)病過程中起到一定作用，用激素和/或其他能誘導(dǎo)IL-10合成和釋放的藥物或方法則可減輕氣道的炎癥反應(yīng)，對變應(yīng)性疾病的治療具有一定的價值。
收稿：1998-04-03
修回：1998-10-15, 百拇醫(yī)藥