多發(fā)性硬化腦苷酯抗體檢測
http://www.www.srpcoatings.com
37c醫(yī)學網(wǎng)
作者：林艾羽 吳秀麗 慕容慎行 許國英 林嘉友
單位：林艾羽(350005 福建醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院神經(jīng)內科)；吳秀麗(350005 福建醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院神經(jīng)內科)；慕容慎行(350005 福建醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院神經(jīng)內科)；許國英(350005 福建醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院神經(jīng)內科)；林嘉友(中國醫(yī)學科學院)
關鍵詞：
腦與神經(jīng)疾病雜志000223 腦苷酯是一種髓鞘成分，存在于神經(jīng)元表面，調節(jié)多種神經(jīng)過程。在脫髓鞘的情況下，CSF中各種抗體增加，也包括腦苷酯抗體[1]。為了進一步探討MS的自身免疫機制，我們檢測了MS患者血清和CSF腦苷酯抗體。
資料和方法 1.一般資料 實驗組20例，均來自我科住院確診的MS病人，符合Poster等的診斷標準[2]；男9例，女11例，年齡21～54歲，平均34歲，病程6月～9年，平均17.1月。臨床主要表現(xiàn)為視力障礙，肢體麻木無力，行走不穩(wěn)。輔助檢查包括誘發(fā)電位、CT或MRI。對照組血清采自15例健康成人，腦脊髓液取自非神經(jīng)系統(tǒng)疾病的外科手術行腰麻的病人。實驗組和對照組成員分別抽取1ml腦脊髓液；抽取2ml外周血，離心后取其上清液，均保存于-20℃。
, 百拇醫(yī)藥
2.方法 采用改良Marcus法[3]。將腦苷酯(10ug/50ul)包被于聚苯乙每孔包被50ul，4℃過夜，晾干；用1%BSA-PBS封閉，每孔100ul，封閉4～6小時；用0.15MPBS洗3×5’(簡稱洗3次)；加1∶80稀釋待測血清，4℃過夜。洗3次；加結合物MAH-IG-HRPO(1∶2000稀釋)，置4℃6小時，洗3次；加底物液：底物緩沖液10ml，鄰苯二胺(OPD)4mg，30%HO216ul，室溫放置15’2MHSO4每孔20ul終止反應；于492nm測定OD值。
3.統(tǒng)計學檢驗 采用t檢驗，以大于X+2SD為陽性標準。
結 果 1.在血清檢驗中，20例MS患者腦苷酯抗體陽性14例(陽性率70%)；在腦脊液中，20例MS患者腦苷酯抗體陽性14例(陽性率70%)。
2.經(jīng)統(tǒng)計學檢驗，以上兩組兩種抗體的水平在MS組和對照組間差異均有顯著性意義。
, 百拇醫(yī)藥
討 論 MS患者體內同時存在著細胞免疫異常和體液免疫異常，MS病人的外周血對腦組織抗原(MBP、神經(jīng)節(jié)苷酯、腦苷酯)有特異性細胞免疫應答。
n(個)
腦苷酯抗體(OD)
P值
MS組
血清
19
0.7930±0.3960
P<0.01
CSF
19
, http://www.www.srpcoatings.com
0.6985±0.1838
P<0.01
HC組
血清
15
0.4213±0.1397
CSF
15
0.3393±0.1290
本研究旨從體液免疫角度出發(fā)，了解在急性期MS病人血清及CSF中除MBP抗體、神經(jīng)節(jié)苷酯抗體外，腦苷酯抗體的存在情況。本研究對20例急性期MS病人的CSF及血清腦苷酯抗體進行了檢測并與對照組相比較，以大于對照組X+2SD為陽性標準，結果顯示患者組CSF及血清中此二抗體均有70%的陽性率。說明此抗體同MBP抗體、神經(jīng)節(jié)苷酯抗體一樣，在急性期對反應病情的活動有一定幫助，進一步對MS的可能發(fā)病機制作出了闡明，該病的發(fā)病可能由于感染等原因，使得針對自身組分的MBP、神經(jīng)節(jié)苷酯、腦苷酯等自身免疫機制被激活，體液免疫和細胞免疫共同參與的免疫應答過程，選擇性地攻擊中樞神經(jīng)白質，導致一系列的病理變化和臨床過程。
, 百拇醫(yī)藥
本實驗通過對MS血清及腦脊液腦苷酯抗體的檢測，補充說明了髓鞘脂質抗體在脫髓鞘活動期同樣參與MS的發(fā)病過程。CSF中這些抗體的存在反應了神經(jīng)系統(tǒng)的體液免疫狀態(tài)，乃神經(jīng)系統(tǒng)炎性脫髓鞘疾病的機理。早年發(fā)現(xiàn)MSCSFIgG增高，Toutellotte通過計算發(fā)現(xiàn)其鞘內IgG合成增高證明MS病人神經(jīng)系統(tǒng)有體液免疫學異常。關于腦脊液抗體的來源以及與血清抗體的關系，人們提出了中樞神經(jīng)系統(tǒng)內部本身可以合成免疫球蛋白的說法[4]是因為MS病人外周產生特異性抗體的免疫活性B細胞可以通過遭破壞的血腦屏障，進入中樞神經(jīng)系統(tǒng)產生特異性抗體。 參考文獻
1 許賢豪. 神經(jīng)免疫學. 第1版. 北京醫(yī)科大學. 中國協(xié)和醫(yī) 科大學聯(lián)合出版社， 1995；10∶177-182.
2 Poster CM. Patty DW, Scheiberg L, et al. New diagnostic criteria for multiple sclerosis:guidelines for research protocols. Ann Neural. 1983; 13∶227.
3 Marcus DM, Latte N, Hsi BP, Gillard BK Measurement and significance o f antibodies against GM1 ganglioside. Neuroimmuno, 1989 Dec; 25(2-3)∶255-9.
4 楚蘭等. 24小時鞘內IgG合成率檢測的臨床意義. 卒中和神經(jīng)疾病， 1998， 9( 4).
(1999-07-10 收稿), 百拇醫(yī)藥
單位：林艾羽(350005 福建醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院神經(jīng)內科)；吳秀麗(350005 福建醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院神經(jīng)內科)；慕容慎行(350005 福建醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院神經(jīng)內科)；許國英(350005 福建醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院神經(jīng)內科)；林嘉友(中國醫(yī)學科學院)
關鍵詞：
腦與神經(jīng)疾病雜志000223 腦苷酯是一種髓鞘成分，存在于神經(jīng)元表面，調節(jié)多種神經(jīng)過程。在脫髓鞘的情況下，CSF中各種抗體增加，也包括腦苷酯抗體[1]。為了進一步探討MS的自身免疫機制，我們檢測了MS患者血清和CSF腦苷酯抗體。
資料和方法 1.一般資料 實驗組20例，均來自我科住院確診的MS病人，符合Poster等的診斷標準[2]；男9例，女11例，年齡21～54歲，平均34歲，病程6月～9年，平均17.1月。臨床主要表現(xiàn)為視力障礙，肢體麻木無力，行走不穩(wěn)。輔助檢查包括誘發(fā)電位、CT或MRI。對照組血清采自15例健康成人，腦脊髓液取自非神經(jīng)系統(tǒng)疾病的外科手術行腰麻的病人。實驗組和對照組成員分別抽取1ml腦脊髓液；抽取2ml外周血，離心后取其上清液，均保存于-20℃。
, 百拇醫(yī)藥
2.方法 采用改良Marcus法[3]。將腦苷酯(10ug/50ul)包被于聚苯乙每孔包被50ul，4℃過夜，晾干；用1%BSA-PBS封閉，每孔100ul，封閉4～6小時；用0.15MPBS洗3×5’(簡稱洗3次)；加1∶80稀釋待測血清，4℃過夜。洗3次；加結合物MAH-IG-HRPO(1∶2000稀釋)，置4℃6小時，洗3次；加底物液：底物緩沖液10ml，鄰苯二胺(OPD)4mg，30%HO216ul，室溫放置15’2MHSO4每孔20ul終止反應；于492nm測定OD值。
3.統(tǒng)計學檢驗 采用t檢驗，以大于X+2SD為陽性標準。
結 果 1.在血清檢驗中，20例MS患者腦苷酯抗體陽性14例(陽性率70%)；在腦脊液中，20例MS患者腦苷酯抗體陽性14例(陽性率70%)。
2.經(jīng)統(tǒng)計學檢驗，以上兩組兩種抗體的水平在MS組和對照組間差異均有顯著性意義。
, 百拇醫(yī)藥
討 論 MS患者體內同時存在著細胞免疫異常和體液免疫異常，MS病人的外周血對腦組織抗原(MBP、神經(jīng)節(jié)苷酯、腦苷酯)有特異性細胞免疫應答。
n(個)
腦苷酯抗體(OD)
P值
MS組
血清
19
0.7930±0.3960
P<0.01
CSF
19
, http://www.www.srpcoatings.com
0.6985±0.1838
P<0.01
HC組
血清
15
0.4213±0.1397
CSF
15
0.3393±0.1290
本研究旨從體液免疫角度出發(fā)，了解在急性期MS病人血清及CSF中除MBP抗體、神經(jīng)節(jié)苷酯抗體外，腦苷酯抗體的存在情況。本研究對20例急性期MS病人的CSF及血清腦苷酯抗體進行了檢測并與對照組相比較，以大于對照組X+2SD為陽性標準，結果顯示患者組CSF及血清中此二抗體均有70%的陽性率。說明此抗體同MBP抗體、神經(jīng)節(jié)苷酯抗體一樣，在急性期對反應病情的活動有一定幫助，進一步對MS的可能發(fā)病機制作出了闡明，該病的發(fā)病可能由于感染等原因，使得針對自身組分的MBP、神經(jīng)節(jié)苷酯、腦苷酯等自身免疫機制被激活，體液免疫和細胞免疫共同參與的免疫應答過程，選擇性地攻擊中樞神經(jīng)白質，導致一系列的病理變化和臨床過程。
, 百拇醫(yī)藥
本實驗通過對MS血清及腦脊液腦苷酯抗體的檢測，補充說明了髓鞘脂質抗體在脫髓鞘活動期同樣參與MS的發(fā)病過程。CSF中這些抗體的存在反應了神經(jīng)系統(tǒng)的體液免疫狀態(tài)，乃神經(jīng)系統(tǒng)炎性脫髓鞘疾病的機理。早年發(fā)現(xiàn)MSCSFIgG增高，Toutellotte通過計算發(fā)現(xiàn)其鞘內IgG合成增高證明MS病人神經(jīng)系統(tǒng)有體液免疫學異常。關于腦脊液抗體的來源以及與血清抗體的關系，人們提出了中樞神經(jīng)系統(tǒng)內部本身可以合成免疫球蛋白的說法[4]是因為MS病人外周產生特異性抗體的免疫活性B細胞可以通過遭破壞的血腦屏障，進入中樞神經(jīng)系統(tǒng)產生特異性抗體。 參考文獻
1 許賢豪. 神經(jīng)免疫學. 第1版. 北京醫(yī)科大學. 中國協(xié)和醫(yī) 科大學聯(lián)合出版社， 1995；10∶177-182.
2 Poster CM. Patty DW, Scheiberg L, et al. New diagnostic criteria for multiple sclerosis:guidelines for research protocols. Ann Neural. 1983; 13∶227.
3 Marcus DM, Latte N, Hsi BP, Gillard BK Measurement and significance o f antibodies against GM1 ganglioside. Neuroimmuno, 1989 Dec; 25(2-3)∶255-9.
4 楚蘭等. 24小時鞘內IgG合成率檢測的臨床意義. 卒中和神經(jīng)疾病， 1998， 9( 4).
(1999-07-10 收稿), 百拇醫(yī)藥