基因克隆和DNA分析第七版最新去水印版.pdf
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2020年11月9日
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基因克隆和DNA分析第七版深入淺出地闡述了分子生物學(xué)基本技術(shù)如基因克隆、基因表達(dá)、PCR、基因組學(xué)等的原理，同時又生動地介紹了基因克隆和DNA分析在基礎(chǔ)研究、醫(yī)學(xué)、農(nóng)學(xué)、法醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域中的實(shí)際應(yīng)用。第7版更是對大家關(guān)注的生物制藥、基因治療、基因改良作物等方面作了很多的拓展。
質(zhì)粒的分類
天然存在的質(zhì)粒的最有用的分類是基于質(zhì)粒的主要特征來進(jìn)行的，這種主要特征本質(zhì)上又是由質(zhì)粒的基因所決定的。根據(jù)這一分類方法，把質(zhì)粒分為以下5種：
(1)致育(fertility)質(zhì)�；蚍QF質(zhì)粒(F plasmid)，僅攜帶轉(zhuǎn)移基因，并且除了能夠促進(jìn)質(zhì)粒間有性接合的轉(zhuǎn)移外，不再具備其他的特征，如大腸桿菌中的F質(zhì)粒。
(2)耐藥性(resistance)質(zhì)�；蚍QR質(zhì)粒(R plasmid)攜帶有能夠賦予宿主細(xì)菌對某一種或多種抗菌劑的耐藥性的基因，如抗氯霉素、氨芐青霉素或水銀。R質(zhì)粒因其通過正常的繁殖而傳播，在臨床微生物學(xué)上具有重要作用，能夠?qū)?xì)菌感染的治療產(chǎn)生深遠(yuǎn)的影響，如RP4，通常在假單胞菌中被發(fā)現(xiàn)，但也能夠在其他細(xì)菌中出現(xiàn)。
(3)Col質(zhì)粒(Col plasmid)編碼大腸桿菌素，一種能夠殺死其他細(xì)菌的蛋白，比如大腸桿菌的ColE1質(zhì)粒，(4)降解質(zhì)粒(degradative plasmid)使宿主菌能夠代謝一些通常情況下無法利用的分子，如甲苯和水楊酸，例如，惡臭假單胞菌中的TOL質(zhì)粒。
(5)毒性質(zhì)粒(virulence plasmid)賦予宿主菌致病性，比如根瘤農(nóng)桿菌(Agrobacterium tumefa-
ciens)中的Ti質(zhì)粒(Ti plasmid)，能夠在雙子葉植物中誘導(dǎo)冠瘦瘤。
細(xì)菌外其他生物體中的質(zhì)粒
盡管質(zhì)粒在細(xì)菌中廣泛存在，但在其他生物體中卻并不常見。最具特征意義的真核狀態(tài)的質(zhì)粒是在釀酒酵母菌株中觀察到的2 um質(zhì)粒(2 um cirele)，2 um質(zhì)粒的發(fā)現(xiàn)是非常幸運(yùn)的，因?yàn)槿藗兛梢該?jù)此構(gòu)建載體來轉(zhuǎn)化酵母這種非常重要的生物。然而，在其他真核生物中對質(zhì)粒的研究(比如纖維狀霉菌、植物和動物)已證明是令人失望的，這也暗示著似乎許多高等生物細(xì)胞并不適合作為質(zhì)粒的停泊所。
溶源性噬菌體
相對于裂解性侵染，溶源(lysogenic)侵染的標(biāo)志是噬菌體DNA分子在宿主細(xì)胞中能夠穩(wěn)定存在，可能在細(xì)菌細(xì)胞的上千次分裂后仍然存在。對許多溶源性噬菌體來說，噬菌體DNA是以一種游離基因插入的方式插入到細(xì)菌的基因組中。這種噬菌體DNA的整合形式[稱作原噬菌體(prophage)]是不發(fā)揮侵染作用的靜止?fàn)顟B(tài)，而一個攜帶有原噬菌體的細(xì)菌[這里指的是溶源菌
(lysogen)]通常從生理上無法與未被侵染的細(xì)菌細(xì)胞相區(qū)分。然而，原噬菌體最終會被從宿主細(xì)胞基因組中釋放出來，且噬菌體恢復(fù)裂解形式，并裂解細(xì)胞釋放出子代噬菌體。在圖2.7中顯示的入噬菌體[lambda())]的侵染循環(huán)，就是一個典型的溶源性噬菌體侵染循環(huán)。
另有很少一部分溶源性噬菌體進(jìn)行的是一個完全不同的侵染循環(huán)。當(dāng)M13或相關(guān)的噬菌體侵染大腸桿菌時，新的噬菌體顆粒連續(xù)裝配并從宿主細(xì)胞中釋放出來。M13 DNA并沒有整合到細(xì)菌基因組中，因此也不會變成靜止?fàn)顟B(tài)。對于這類噬菌體來說，細(xì)胞裂解永遠(yuǎn)都不會發(fā)生，而被侵染細(xì)菌能夠持續(xù)生長和分裂，但是以一種相對于未侵染細(xì)菌來說較慢的速度進(jìn)行的。
基因克隆和DNA分析第七版截圖
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