基因克隆和DNA分析第五版.pdf
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2020年11月9日
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基因克隆和DNA分析第五版詳細闡述了分子生物學(xué)之基因克隆、基因表達、PCR、基因組學(xué)等基本研究技術(shù)原理，系統(tǒng)介紹了基因克隆和DNA分析在基礎(chǔ)研究、醫(yī)學(xué)、農(nóng)學(xué)、法醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域中的實際應(yīng)用，并且在第5版中增加了生物制藥、基因治療、基因改良作物等新的拓展
編輯推薦
全書分為三個部分。部分闡述了基因克隆和DNA分析的基本原理。包括基因克隆，基因操作，基因克隆的載體、酶類，DNA的純化，將DNA引入活細胞，PcR技術(shù)等。第二部分闡述了基因克隆和DNA分析在研究中的應(yīng)用。包括基因定位的研究、基因結(jié)構(gòu)的預(yù)測，基因表達和功能的研究，基因組的研究等。第三部分闡述了基因克隆和DNA分析在生物技術(shù)中的應(yīng)用，在醫(yī)學(xué)、農(nóng)業(yè)、法醫(yī)學(xué)、考古學(xué)等學(xué)科中的應(yīng)用等。全書深入淺出，即使讀者在沒有太多分子生物學(xué)基礎(chǔ)知識的情況下，也能夠理解這些知識。 本書適合作為大專院校生物學(xué)系及農(nóng)林醫(yī)藥工院校教學(xué)參考用書，也可供生命科學(xué)有關(guān)研究人員、企業(yè)人員和中學(xué)生物教師及有興趣了解當(dāng)代生命科學(xué)人士閱讀。
遺傳學(xué)的早期發(fā)展
在最初的30年里，這門新出現(xiàn)的學(xué)科以令人吃驚的速度向前發(fā)展著：W.Sutton首先于1903年提出了基因是定位于染色體(chromosome)上的假設(shè)，隨后在1910年，這一假設(shè)得到了T.H.Morgan的實驗證實；接下來，Morgan和他的同事們開發(fā)出了基因作圖(gene mapping)技術(shù)，并通過這一技術(shù)于1922年取得了對果蠅全部4條染色體上的2 000多個基因相對位置的全面分析。
但除了這些經(jīng)典遺傳學(xué)研究的輝煌成果外，直到20世紀(jì)40年代，人們?nèi)匀粵]有認(rèn)識到基因的分子本質(zhì)。事實上，直到Avery，MacLeod和McCarty在1944年的試驗以及Hershey和Chase在1952年的試驗出現(xiàn)前，沒有任何人會相信脫氧核糖核酸(DNA)是遺傳物質(zhì)，因為在這之前，人們普遍認(rèn)為基因是由蛋白質(zhì)構(gòu)成的。DNA所扮演的角色的發(fā)現(xiàn)給遺傳學(xué)研究帶來了巨大的促進，這個時期許多著名的生物學(xué)家(Delbrack，Chargaff，Crick以及Monod是其中最有影響力的)都為遺傳學(xué)的第二個發(fā)展高峰做出了杰出的貢獻。這一時期的成果是驚人的：在1952-1966年這14年間，DNA的結(jié)構(gòu)被精確地表述，遺傳密碼被破解、轉(zhuǎn)錄和翻譯的過程也得到了描述。
如何使用這本書
本書向大家解釋了基因克隆、PCR以及其他一些DNA分析技術(shù)是如何實施的，并描述了這些技術(shù)在現(xiàn)代生物學(xué)中的應(yīng)用狀況。關(guān)于這些應(yīng)用的介紹是接下來第二和第三部分需要詳細說明的。第二部分主要介紹基因和基因組方面的研究進展，第三部分對基因克隆和PCR在生物技術(shù)中的廣泛應(yīng)用進行了全面說明。
第一部分中我們所要面對的主要是一些基本原理。這9章中的絕大部分都圍繞基因克隆進行敘述，因為這項技術(shù)要比PCR更加復(fù)雜。當(dāng)你理解了克隆是如何進行的同時，也就了解了DNA分析的許多基本原理。在第2章中，我們主要將注意力集中在基因克隆實驗的核心部分-載體上，它負責(zé)將需要克隆的基因運輸進入宿主細胞，并使這部分基因在隨后的步驟中實現(xiàn)復(fù)制擴增。作為克隆載體的DNA分子必須首先能夠進入宿主細胞，而且一旦進入，就能夠自身發(fā)生復(fù)制產(chǎn)生多個拷貝。天然條件下，有兩種DNA分子能夠滿足這些要求：
(1)質(zhì)粒(plasmid)，在細菌和其他一些生物體內(nèi)發(fā)現(xiàn)的小的環(huán)狀DNA，它能夠獨立于宿主染色體而實現(xiàn)復(fù)制。
(2)病毒染色體(virus chromosome)，尤其是噬菌體(專一性感染細菌的一類病毒)的染色體。在感染期間，嗟菌體DNA分子被注人宿主細胞進行復(fù)制擴增。
第3章介紹的是如何從活細胞中純化出DNA，既包括將要被克隆的DNA，也包括載體DNA，第4章涉及各種各樣實驗室內(nèi)處理純化的DNA分子的技術(shù)。這樣的技術(shù)非常之多，但是其中有兩種是格外重要的。它們是：在專一性位點切割載體并在插入基因后修復(fù)載體的技術(shù)(圖1.1)。這些以及其他一些DNA操作技術(shù)都被作為活細胞內(nèi)進行的基本的DNA分析和修飾技術(shù)的分支被開發(fā)出來，并且這些操作技術(shù)大部分都使用到了純化過的酶。這些酶的性質(zhì)和它們用于DNA研究的方法都將在第4章中介紹。
一旦一個重組DNA分子被構(gòu)建出來，就必須要引人到宿主細胞內(nèi)才能夠進行復(fù)制。將重組體轉(zhuǎn)人宿主細胞的方法利用到了宿主細胞獲取質(zhì)粒和病毒DNA分子的天然過程。這些過程和它們在基因克隆中所使用的方法都會在第5章中介紹，此外最重要的克隆載體的類型，及其檢驗會出現(xiàn)在第6.7章的內(nèi)容中。作為總結(jié)性地概括基因克隆的第8章，還要涉及重組體選擇的問題(圖1.4)。第9章中主要對PCR及相關(guān)的一些技術(shù)加以詳細的說明。
基因克隆和DNA分析第五版截圖
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