標(biāo)志酶的電鏡細(xì)胞化學(xué)技術(shù)探討
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[摘要]目的探討電鏡標(biāo)志酶細(xì)胞化學(xué)的技術(shù)關(guān)鍵及標(biāo)準(zhǔn)化操作。方法用相同的操作步驟和方法,對新西蘭兔肝組織及血液樣品進(jìn)行12種標(biāo)志酶的超微細(xì)胞化學(xué)實驗,于透射電鏡下觀察酶的活性定位和變化。結(jié)果建立了一套統(tǒng)一和實用的酶細(xì)胞化學(xué)操作程序和方法,12種標(biāo)志酶的活性反應(yīng)產(chǎn)物準(zhǔn)確定位于相應(yīng)的細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)。結(jié)論固定和孵育是關(guān)鍵性步驟,其中固定劑的濃度和固定時間以及孵育液的配制質(zhì)量尤為重要。操作標(biāo)準(zhǔn)化有利于提高多種酶檢測的成功率和實驗結(jié)果的可重復(fù)性。
[關(guān)鍵詞]電鏡;細(xì)胞化學(xué);酶
電鏡酶細(xì)胞化學(xué)技術(shù)能夠在超微結(jié)構(gòu)水平上顯示酶的活性定位和變化,對研究細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能的相互關(guān)系具有重要意義,同時一些酶學(xué)檢測已經(jīng)成為臨床病理診斷中不可缺少的方法。但是,電鏡酶細(xì)胞化學(xué)技術(shù)比較復(fù)雜,影響因素較多,以致實驗結(jié)果的成功率和重復(fù)性不高。自從1985年以來,我們經(jīng)過學(xué)習(xí)和探索,建立了一套比較統(tǒng)一和實用的標(biāo)志酶細(xì)胞化學(xué)操作步驟和方法,取得較好結(jié)果,現(xiàn)介紹如下。
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