葛根素納米乳生產(chǎn)工藝分析
【中圖分類號】TQ46 【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A 【文章編號】1672-3783(2011)02-0170-01
【摘要】文章分析了注射用葛根素納米乳的制備工藝，及質(zhì)量評價(jià)方法。
【關(guān)鍵詞】納米乳;制備
納米乳是近年來發(fā)展起來的一種新型給藥系統(tǒng)，能夠增加難溶性藥物的溶解度、促進(jìn)藥物經(jīng)胃腸道吸收或透皮吸收、延長藥物釋放時(shí)間、減輕注射疼痛和其他不良反應(yīng)，是一種極具發(fā)展?jié)摿Φ男滦徒o藥系統(tǒng)。
1 葛根素納米乳的制備方法
1.1 葛根素在不同油相中的溶解度。將過量的葛根素原料藥分別置于2 g的花生油、大豆油、液狀石蠟中，渦旋混勻0.5 h，37℃振蕩24 h，以達(dá)平衡，再以4 000 r•min-1離心，取上清液適量，測得葛根素的溶解度依次為(1.6±0.01)，(36±0.01)，(0.03±0.01)mg•g-1。由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，葛根素在大豆油中的溶解度最大，故可以考慮選擇大豆油作為制作葛根素納米乳的油相。
1.2 表面活性劑的篩選。葛根素在大豆油中的溶解度最大，但僅靠油相溶解不能滿足臨床給藥劑量，所以必須選擇對葛根素增溶能力強(qiáng)的表面活性劑。
1.3 油相和助表面活性劑的篩選。將磷脂分別與助表面活性劑無水乙醇、1,2-丙二醇、PEG400、山梨醇按重量比Km=1∶1配成相同濃度的膠束溶液10 ml，磷脂與助表面活性劑濃度各為0.25 g•ml-1，均分3份，每份膠束溶液分別滴入油相花生油、大豆油、液狀石蠟中形成體系，渦旋，以澄清度為指標(biāo)，觀察各體系的變化。結(jié)果表明，只有以大豆油為油相的體系能形成透明納米乳。室溫放置后，無水乙醇-水體系變濁，其余種體系仍澄清透明。
經(jīng)過以上一系列試驗(yàn)的篩選，空白納米乳的處方可以確定為：表面活性劑——磷脂，助表面活性劑——山梨醇，油相——大豆油。
1.4 空白納米乳偽三元相圖的繪制。以大豆油為油相，磷脂為表面活性劑，山梨醇為助表面活性劑，參照文獻(xiàn)繪制偽三元相圖，確定納米乳區(qū)的范圍，找出各組分的最佳比例。
將磷脂和山梨醇按質(zhì)量比Km=1∶1，1∶2，2∶1混勻后，再按磷脂與油酸乙醋的質(zhì)量比為1∶9，2∶8，3∶7，4∶6，5∶5的不同比例混合。先讓其磁力攪拌均勻，再邊攪拌邊用水滴定，以澄清度為指標(biāo)，判斷是否形成納米乳，記錄形成納米乳時(shí)臨界點(diǎn)各組分的質(zhì)量百分含量。在相圖中找出相應(yīng)的點(diǎn)，把能形成納米乳的各點(diǎn)以曲線相連繪制成偽三元相圖。
1.5 葛根素納米乳類型鑒別。采用離心法、染色法鑒別納米乳。離心法是以6 000 r•min-1離心30 min，觀察是否分層，顏色、澄清度是否改變，若經(jīng)過離心不分層，顏色、澄清度都無變化可判斷為納米乳。取葛根素納米乳成品進(jìn)行上述實(shí)驗(yàn)，證實(shí)制備的樣品為納米乳。
判斷葛根素納米乳的類型：利用油溶性染料蘇丹紅(紅色)和水溶性染料亞甲蘭(藍(lán)色)在納米乳中擴(kuò)散的快慢來判斷納米乳的類型，若紅色擴(kuò)散快于藍(lán)色則為W/O型納米乳,反之則為O/W型納米乳。結(jié)果表明，本實(shí)驗(yàn)所制得的葛根素納米乳為O/W型納米乳。
1.6 飽和葛根素納米乳液的制備。將過量的葛根素加入到由磷脂、山梨醇、大豆油按處方比例組成的混合液中，渦旋混勻，加入處方量的水，磁力攪拌混勻，于37℃攪拌24 h，然后再以6 000 r•min-1離心40 min，取上清液，即得到葛根素納米乳飽和液體。
將上述飽和液用超純水稀釋成適當(dāng)濃度，于305 nm處測吸收度并計(jì)算濃度。按上述方法實(shí)際測得飽和葛根素納米乳液的含量分別為(S1=25.50 mg•ml-1，S2=25.44 mg•ml-1，S3=25.50 mg•ml-1)取平均值為25.48 mg•ml-1，即葛根素在納米乳中的溶解度為25.48 mg•ml-1。
據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道葛根素在水中的溶解度約為0.011 mol•L-1，顯然低于本實(shí)驗(yàn)制得的納米乳中葛根素的含量。
1.7 葛根素納米乳質(zhì)量評價(jià)
(1)外觀性狀。制得的葛根素納米乳液為澄清、透明的淺黃色、流動(dòng)性極好的液體。
(2)理化性質(zhì)。電導(dǎo)率可以用來判斷納米乳的類型，電導(dǎo)率較大的為O/W型納米乳，電導(dǎo)率較小的為W/O型納米乳；粘度和折光率可以用來檢查納米乳的純度；納米乳的流變性對納米乳的制備和使用具有重要意義，注射劑必須通針性好，對機(jī)體刺激性小，不引起疼痛，故要求體系粘度較低。研究表明，葛根素納米乳中油量增加，則納米乳的粘度增加，但均能自由流動(dòng)，并具有良好的通針性。
取注射用葛根素納米乳樣品適量，用數(shù)字式粘度計(jì)測定粘度，用電導(dǎo)率儀測定電導(dǎo)率，用阿貝折光儀測定折光率。
形態(tài)和粒徑分布采用透射電鏡研究納米乳形態(tài)。取適量葛根素納米乳滴在銅網(wǎng)上，用磷鎢酸溶液負(fù)染后晾干，于透射電鏡下觀察。葛根素納米乳乳滴呈球形，大小均勻。
納米乳粒徑和粒徑分布采用激光散射粒度測徑儀測定。結(jié)果表明，葛根素納米乳平均粒徑為32.4nm，92.5%的乳滴粒徑在15.45～43.56 nm之間，說明制備的注射用葛根素納米乳粒徑分布較窄，粒徑較均勻。
(3)穩(wěn)定性。離心穩(wěn)定性：將制備的葛根素納米乳以6 000 r•min-1離心40 min，觀察有無分層、沉淀或渾濁等現(xiàn)象。結(jié)果表明葛根素納米乳未出現(xiàn)分層、沉淀或渾濁等異�，F(xiàn)象。
配伍穩(wěn)定性：用葡萄糖注射液或氯化鈉注射液將葛根素納米乳稀釋50倍，納米乳外觀仍澄清透明。長期穩(wěn)定性：將本實(shí)驗(yàn)制得的葛根素納注乳灌封于安瓿瓶中，分別置于4，25，37，60℃的條件下進(jìn)行穩(wěn)定性考察，于0，10，30，60，90，180 d分別取樣進(jìn)行性狀觀察、粒徑測定和含量分析。結(jié)果表明，葛根素納米乳在上述條件下，色澤、透明度、粒徑和含量未有顯著變化，說明葛根素納米乳受溫度影響較小，性質(zhì)比較穩(wěn)定。
3 討論
通過篩選合適的注射用油、乳化劑和助乳化劑，并通過偽三元相圖尋找最佳的納米乳處方和工藝，成功地制備了葛根素注射用納米乳，證實(shí)了納米乳能夠顯著增加在水和油中均難溶的藥物葛根素的溶解度，葛根素在納米乳中的溶解度是其在水中溶解度的6倍。國外報(bào)道的油、水均難溶的喜樹堿在納米乳中的溶解度是水溶液的23倍。溶解度增大，有助于提高難溶性藥物的生物利用度。
納米乳制備過程中往往須加入較高濃度的表面活性劑，以降低液滴表面張力，得到粒徑較小的乳滴。大量表面活性劑可能對機(jī)體產(chǎn)生不良反應(yīng)。本研究選用的表面活性劑為注射用豆磷脂，其毒性、刺激性和溶血性均較小，適合作為注射用乳劑的乳化劑。通過處方和工藝優(yōu)化，有效地降低了乳化劑的用量。, 百拇醫(yī)藥(張峰)
【摘要】文章分析了注射用葛根素納米乳的制備工藝，及質(zhì)量評價(jià)方法。
【關(guān)鍵詞】納米乳;制備
納米乳是近年來發(fā)展起來的一種新型給藥系統(tǒng)，能夠增加難溶性藥物的溶解度、促進(jìn)藥物經(jīng)胃腸道吸收或透皮吸收、延長藥物釋放時(shí)間、減輕注射疼痛和其他不良反應(yīng)，是一種極具發(fā)展?jié)摿Φ男滦徒o藥系統(tǒng)。
1 葛根素納米乳的制備方法
1.1 葛根素在不同油相中的溶解度。將過量的葛根素原料藥分別置于2 g的花生油、大豆油、液狀石蠟中，渦旋混勻0.5 h，37℃振蕩24 h，以達(dá)平衡，再以4 000 r•min-1離心，取上清液適量，測得葛根素的溶解度依次為(1.6±0.01)，(36±0.01)，(0.03±0.01)mg•g-1。由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，葛根素在大豆油中的溶解度最大，故可以考慮選擇大豆油作為制作葛根素納米乳的油相。
1.2 表面活性劑的篩選。葛根素在大豆油中的溶解度最大，但僅靠油相溶解不能滿足臨床給藥劑量，所以必須選擇對葛根素增溶能力強(qiáng)的表面活性劑。
1.3 油相和助表面活性劑的篩選。將磷脂分別與助表面活性劑無水乙醇、1,2-丙二醇、PEG400、山梨醇按重量比Km=1∶1配成相同濃度的膠束溶液10 ml，磷脂與助表面活性劑濃度各為0.25 g•ml-1，均分3份，每份膠束溶液分別滴入油相花生油、大豆油、液狀石蠟中形成體系，渦旋，以澄清度為指標(biāo)，觀察各體系的變化。結(jié)果表明，只有以大豆油為油相的體系能形成透明納米乳。室溫放置后，無水乙醇-水體系變濁，其余種體系仍澄清透明。
經(jīng)過以上一系列試驗(yàn)的篩選，空白納米乳的處方可以確定為：表面活性劑——磷脂，助表面活性劑——山梨醇，油相——大豆油。
1.4 空白納米乳偽三元相圖的繪制。以大豆油為油相，磷脂為表面活性劑，山梨醇為助表面活性劑，參照文獻(xiàn)繪制偽三元相圖，確定納米乳區(qū)的范圍，找出各組分的最佳比例。
將磷脂和山梨醇按質(zhì)量比Km=1∶1，1∶2，2∶1混勻后，再按磷脂與油酸乙醋的質(zhì)量比為1∶9，2∶8，3∶7，4∶6，5∶5的不同比例混合。先讓其磁力攪拌均勻，再邊攪拌邊用水滴定，以澄清度為指標(biāo)，判斷是否形成納米乳，記錄形成納米乳時(shí)臨界點(diǎn)各組分的質(zhì)量百分含量。在相圖中找出相應(yīng)的點(diǎn)，把能形成納米乳的各點(diǎn)以曲線相連繪制成偽三元相圖。
1.5 葛根素納米乳類型鑒別。采用離心法、染色法鑒別納米乳。離心法是以6 000 r•min-1離心30 min，觀察是否分層，顏色、澄清度是否改變，若經(jīng)過離心不分層，顏色、澄清度都無變化可判斷為納米乳。取葛根素納米乳成品進(jìn)行上述實(shí)驗(yàn)，證實(shí)制備的樣品為納米乳。
判斷葛根素納米乳的類型：利用油溶性染料蘇丹紅(紅色)和水溶性染料亞甲蘭(藍(lán)色)在納米乳中擴(kuò)散的快慢來判斷納米乳的類型，若紅色擴(kuò)散快于藍(lán)色則為W/O型納米乳,反之則為O/W型納米乳。結(jié)果表明，本實(shí)驗(yàn)所制得的葛根素納米乳為O/W型納米乳。
1.6 飽和葛根素納米乳液的制備。將過量的葛根素加入到由磷脂、山梨醇、大豆油按處方比例組成的混合液中，渦旋混勻，加入處方量的水，磁力攪拌混勻，于37℃攪拌24 h，然后再以6 000 r•min-1離心40 min，取上清液，即得到葛根素納米乳飽和液體。
將上述飽和液用超純水稀釋成適當(dāng)濃度，于305 nm處測吸收度并計(jì)算濃度。按上述方法實(shí)際測得飽和葛根素納米乳液的含量分別為(S1=25.50 mg•ml-1，S2=25.44 mg•ml-1，S3=25.50 mg•ml-1)取平均值為25.48 mg•ml-1，即葛根素在納米乳中的溶解度為25.48 mg•ml-1。
據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道葛根素在水中的溶解度約為0.011 mol•L-1，顯然低于本實(shí)驗(yàn)制得的納米乳中葛根素的含量。
1.7 葛根素納米乳質(zhì)量評價(jià)
(1)外觀性狀。制得的葛根素納米乳液為澄清、透明的淺黃色、流動(dòng)性極好的液體。
(2)理化性質(zhì)。電導(dǎo)率可以用來判斷納米乳的類型，電導(dǎo)率較大的為O/W型納米乳，電導(dǎo)率較小的為W/O型納米乳；粘度和折光率可以用來檢查納米乳的純度；納米乳的流變性對納米乳的制備和使用具有重要意義，注射劑必須通針性好，對機(jī)體刺激性小，不引起疼痛，故要求體系粘度較低。研究表明，葛根素納米乳中油量增加，則納米乳的粘度增加，但均能自由流動(dòng)，并具有良好的通針性。
取注射用葛根素納米乳樣品適量，用數(shù)字式粘度計(jì)測定粘度，用電導(dǎo)率儀測定電導(dǎo)率，用阿貝折光儀測定折光率。
形態(tài)和粒徑分布采用透射電鏡研究納米乳形態(tài)。取適量葛根素納米乳滴在銅網(wǎng)上，用磷鎢酸溶液負(fù)染后晾干，于透射電鏡下觀察。葛根素納米乳乳滴呈球形，大小均勻。
納米乳粒徑和粒徑分布采用激光散射粒度測徑儀測定。結(jié)果表明，葛根素納米乳平均粒徑為32.4nm，92.5%的乳滴粒徑在15.45～43.56 nm之間，說明制備的注射用葛根素納米乳粒徑分布較窄，粒徑較均勻。
(3)穩(wěn)定性。離心穩(wěn)定性：將制備的葛根素納米乳以6 000 r•min-1離心40 min，觀察有無分層、沉淀或渾濁等現(xiàn)象。結(jié)果表明葛根素納米乳未出現(xiàn)分層、沉淀或渾濁等異�，F(xiàn)象。
配伍穩(wěn)定性：用葡萄糖注射液或氯化鈉注射液將葛根素納米乳稀釋50倍，納米乳外觀仍澄清透明。長期穩(wěn)定性：將本實(shí)驗(yàn)制得的葛根素納注乳灌封于安瓿瓶中，分別置于4，25，37，60℃的條件下進(jìn)行穩(wěn)定性考察，于0，10，30，60，90，180 d分別取樣進(jìn)行性狀觀察、粒徑測定和含量分析。結(jié)果表明，葛根素納米乳在上述條件下，色澤、透明度、粒徑和含量未有顯著變化，說明葛根素納米乳受溫度影響較小，性質(zhì)比較穩(wěn)定。
3 討論
通過篩選合適的注射用油、乳化劑和助乳化劑，并通過偽三元相圖尋找最佳的納米乳處方和工藝，成功地制備了葛根素注射用納米乳，證實(shí)了納米乳能夠顯著增加在水和油中均難溶的藥物葛根素的溶解度，葛根素在納米乳中的溶解度是其在水中溶解度的6倍。國外報(bào)道的油、水均難溶的喜樹堿在納米乳中的溶解度是水溶液的23倍。溶解度增大，有助于提高難溶性藥物的生物利用度。
納米乳制備過程中往往須加入較高濃度的表面活性劑，以降低液滴表面張力，得到粒徑較小的乳滴。大量表面活性劑可能對機(jī)體產(chǎn)生不良反應(yīng)。本研究選用的表面活性劑為注射用豆磷脂，其毒性、刺激性和溶血性均較小，適合作為注射用乳劑的乳化劑。通過處方和工藝優(yōu)化，有效地降低了乳化劑的用量。, 百拇醫(yī)藥(張峰)
參見：首頁 > 新聞 > 醫(yī)藥前沿 > 納米專題