肉桂酸鍺對(duì)小鼠S180肉瘤的影響
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摘 要:目的:探討肉桂酸鍺對(duì)荷S180肉瘤小鼠凋亡相關(guān)蛋白Caspase-3的合成及核仁組成區(qū)嗜銀蛋白(AgNOR)合成的影響。方法:建立荷S180肉瘤小鼠模型,肉桂酸鍺口服灌胃給藥后,應(yīng)用Western blotting法定量檢測(cè)凋亡相關(guān)蛋白Caspase-3的合成情況以及油鏡下觀察S180肉瘤細(xì)胞中AgNOR顆粒增值情況。結(jié)果:肉桂酸鍺用藥組S180細(xì)胞中Caspase-3蛋白含量及AgNOR顆粒數(shù),均與空白對(duì)照組有顯著性差異(P<0.01)。結(jié)論:肉桂酸鍺能顯著促進(jìn)Caspase-3的合成,誘導(dǎo)其細(xì)胞凋亡,并能抑制S180細(xì)胞中AgNOR的合成,抑制腫瘤細(xì)胞增值,肉桂酸鍺具有明顯的抗腫瘤作用。
關(guān)鍵詞:肉桂酸鍺 S180 Caspase-3 核仁組成區(qū)嗜銀蛋白
Caspase-3 (分子量為 32kDa)是執(zhí)行凋亡的主要酶,存在于細(xì)胞漿和細(xì)胞核,負(fù)責(zé)大概所有關(guān)鍵蛋白的切割。Caspase-3 在組織中廣泛分布,在淋巴細(xì)胞發(fā)育中高度表達(dá),為多數(shù)細(xì)胞凋亡途徑中的末端關(guān)鍵效應(yīng)蛋白酶,是細(xì)胞凋亡蛋白酶級(jí)聯(lián)反應(yīng)的必經(jīng)之路,其表達(dá)意味著細(xì)胞死亡[1] 。核仁組成相關(guān)嗜銀蛋白(Nucleolar organizer region assoiated argyrophil protein, AgNOR)位于細(xì)胞核核仁中的DNA環(huán)上,因?yàn)楹衦RNA基因而與核仁形成有關(guān),因而籍AgNOR染色技術(shù)對(duì)腫瘤研究有重要意義。在腫瘤的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中,良性腫瘤與惡性腫瘤的細(xì)胞核及核仁結(jié)構(gòu)和功能都會(huì)出現(xiàn)不同的變化,這種變化有助于區(qū)分良、惡性腫瘤及判斷惡性腫瘤預(yù)后。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)體內(nèi)實(shí)驗(yàn)應(yīng)用Western blotting和AgNOR染色技術(shù)分別檢測(cè)各實(shí)驗(yàn)組S180肉瘤細(xì)胞中的Caspase-3和 AgNOR的表達(dá),研究比較各實(shí)驗(yàn)組腫瘤細(xì)胞的增殖與凋亡現(xiàn)象,從病理學(xué)和細(xì)胞分子生物學(xué)的角度探討肉桂酸鍺的抗腫瘤作用機(jī)制。
1 實(shí)驗(yàn)材料和方法
1.1材料
1.1.1 動(dòng)物 近交系昆明種清潔級(jí)小鼠50只,雄性,18-22g,一級(jí)屏障環(huán)境飼養(yǎng)、溫度20-24℃、相對(duì)濕度40﹪-60﹪的環(huán)境下完成動(dòng)物實(shí)驗(yàn),小鼠由江西中醫(yī)學(xué)院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供。
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