MAGE-A9基因原核表達(dá)系統(tǒng)的構(gòu)建及其在肝細(xì)胞癌中的表達(dá)(3)
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本研究利用RT-PCR 方法,從人肝癌組織中克隆出目的基因全長片段,構(gòu)建了原核表達(dá)載體pBAD/gIII-MAGE-A9,通過細(xì)胞融合技術(shù),制備了一株抗MAGE-A9分子的單克隆抗體,證實(shí)可與MAGE-A9分子特異性結(jié)合。在以往研究中,由于缺乏特異性單抗,很多腫瘤因子的表達(dá)都是基因水平的研究,關(guān)于MAGE-A9在腫瘤中的表達(dá)研究也不例外[4],包括MAGE-A9在食管腺癌相關(guān)的Barrett食道中過表達(dá)[5],在皮膚T細(xì)胞淋巴瘤陽性表達(dá)率27%[6]。但基因與蛋白水平的表達(dá)并不完全一致,更重要的是,腫瘤免疫治療是以抗原的確切定位為基礎(chǔ)的。本文在制備了抗MAGE-A9單克隆抗體的基礎(chǔ)上,應(yīng)用免疫組化技術(shù),首次證實(shí)MAGE-A9抗原在肝癌癌細(xì)胞中主要表達(dá)在胞漿,未見同一標(biāo)本中部分腫瘤細(xì)胞MAGE-A9抗原陽性而另一部分腫瘤細(xì)胞MAGE-A9 抗原陰性的情況,只是見標(biāo)本中全部腫瘤細(xì)胞MAGE-A9 抗原陽性或全部陰性,這提示,選用MAGE-A9 基因產(chǎn)物作為靶分子對(duì)陽性患者進(jìn)行免疫治療有可能對(duì)全部的腫瘤細(xì)胞都產(chǎn)生殺傷效應(yīng) ......
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