不同采收期的芒果葉中總黃酮的變化規(guī)律研究(1)
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[摘要] 目的 研究不同采收期的芒果葉中總黃酮的變化規(guī)律。 方法 采用乙醇回流法從芒果葉中提取黃酮類物質(zhì)，并用紫外分光光度法測定不同采收期芒果葉的總黃酮含量。 結果 芒果葉中總黃酮的含量隨采收季節(jié)不同呈一定幅度變化，其中以1、11月總黃酮含量最高，5～7月含量較低。 結論 不同采收期是影響芒果葉中總黃酮質(zhì)量的重要因素。
[關鍵詞] 不同采收期；芒果葉；紫外分光光度法；總黃酮
[中圖分類號] R927.2 [文獻標識碼] A [文章編號] 1674-4721(2013)02(c)-0074-02
芒果葉為漆樹科植物芒果(Mangifera indica L.)的葉。芒果葉味酸、甘，性涼、平，具有平喘、止咳、祛痰、抗炎、鎮(zhèn)痛、保肝利膽、抗脂質(zhì)過氧化、抗病毒、抗腫瘤、抗菌等作用，對中樞神經(jīng)系統(tǒng)和心血管系統(tǒng)等疾病也都有明顯療效[1-2]。芒果葉主要有效成分為黃酮類成分[3-4]，有關黃酮類成分的提取報道已有文獻報導[5]，本文報道了不同采收期芒果葉中總黃酮變化規(guī)律，為深入研究開發(fā)芒果葉中總黃酮成分提供科學依據(jù)。
1 儀器與試藥
1.1 儀器
UV-1800紫外-可見分光光度儀(上海美譜達儀器廠)；AG285電子分析天平(瑞士METTLER公司)。
1.2 試藥
芒果葉采摘于廣東省東莞市芒果種植園，經(jīng)廣東醫(yī)學院藥學院閆沖博士鑒定。采摘后于50℃烘箱干燥備用，每周采摘1次，持續(xù)1年。蘆丁標準品購自南京替斯艾么中藥研究所(批號：TCM027-091210)；乙醇等試劑均為分析純。
2 方法與結果
2.1 對照品溶液的制備
精密稱取干燥蘆丁對照品13.40 mg，用50%乙醇定容至100 mL，精密吸取此溶液并用50%乙醇分別稀釋成0.080 4、0.026 8 g/L的蘆丁對照品溶液，備用。
2.2 供試品溶液的制備
精密稱取不同采收期芒果葉各0.5 g，揉碎，用100 mL50%乙醇80℃回流3 h，冷卻過濾，即得供試品溶液[6]。
2.3 標準曲線的繪制
準確吸取0.026 8 g/L的蘆丁對照溶液1.00、2.00 mL，0.080 4 g/L的對照液1.00、2.00、3.00、4.00 mL分別置于10 mL容量瓶中，準確吸取0.134 g/L的蘆丁溶液2.00 mL，至10 mL容量瓶中，分別加入5%亞硝酸鈉溶液0.5 mL，搖勻，放置6 min后加入10%硝酸鋁溶液0.5 mL，搖勻，放置6 min；再加入5%氫氧化鈉溶液4 mL，分別用50%乙醇加至刻度，搖勻，放置15 min后，以空白試劑為對照調(diào)0，于紫外分光光度計510 nm處測定，結果顯示其吸光度分別為：0、0.025、0.051、0.088、0.183、0.262、0.366、0.867，通過最少二乘法得回歸方程Y = 0.092 1 X - 0.000 1[Y：濃度(g/L)；X：吸光度(A510 nm)]，R2 = 0.999 1，證明線性關系良好。
2.4 精密度試驗
精密量取0.032 16 g/L的對照品溶液1 mL于10 mL容量瓶中，平行制備6份，按“2.3”項下操作步驟，加入亞硝酸鈉、硝酸鋁及氫氧化鈉溶液，于紫外分光光度計510 nm處測定吸光度分別為0.366、0.366、0.366、0.367、0.366、0.366(RSD = 0.11%，n = 6)，表明精密度良好。
2.5 重復性試驗
精密稱取同一采收期(采摘于08年10月18日)的芒果葉6份(每份0.5 g)，揉碎，分別用100 mL 50%乙醇80℃回流3 h，冷卻過濾。精密吸取濾液1 mL于10 mL容量瓶中，按“2.3”操作步驟，測定吸光度分別為0.442、0.397、0.432、0.430、0.450、0.408(RSD = 4.74%，n = 6)，表明重復性良好。
2.6 穩(wěn)定性試驗
精密吸取芒果葉0.5 g(采摘于08年10月18日)提取液1 mL于10 mL容量瓶中，按“2.3”操作步驟，于紫外分光光度計510 nm處每10分鐘測定吸光度1次，結果分別為：0.397、0.397、0.398、0.397、0.396、0.396、0.396。表明樣品在60 min內(nèi)穩(wěn)定，RSD = 0.19%(n = 7)。
2.7 回收率試驗
精密吸取芒果葉(采摘于09年2月21日，總黃酮含量為9.31%)提取液0.50 mL共9份，分別加入蘆丁對照品適量(0.18、0.23、0.28 mg)各3份，按“2.3”項下操作步驟，于紫外分光光度計510 nm處測定吸光度分別為0.466、0.467、0.466、0.526、0.526、0.528、0.589、0.591、0.59，計算回收率，平均加樣回收率為109.30%，RSD = 0.84%(n = 9)。
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