甲醛固定的不同組織中DNA提取的比較
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2013年7月15日
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曹晨 劉彥軍 鄭文 薛淑蓮 杜秋香 孫俊紅 王英元 山西醫(yī)科大學(xué)法醫(yī)學(xué)院;山西省運(yùn)城市公安局刑事技術(shù)支隊(duì);山西醫(yī)科大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院;
【摘要】目的研究運(yùn)用改良酚-氯仿法從甲醛固定組織中提取DNA的方法,對(duì)比心、肝、肺、腦4種臟器DNA提取質(zhì)量的優(yōu)劣,從而了解哪種經(jīng)甲醛固定后的組織易于得到質(zhì)量較為可靠的DNA,以達(dá)到對(duì)DNA擴(kuò)增及后續(xù)研究的目的。方法選取甲醛固定標(biāo)本臟器各14例,以蛋白酶K消化和酚-氯仿法提取檢材中DNA,對(duì)所得DNA質(zhì)量以紫外分光光度計(jì)、PCR擴(kuò)增及瓊脂糖凝膠電泳分析進(jìn)行結(jié)果判斷。結(jié)果心、肝、肺、腦4種組織所提DNA的OD_(260)/OD_(280)比值分別為(1.842±0.380)、(1.861±0.076)、(1.387±0.113)、(1.428±0.087)。每100毫克組織中DNA含量(μg)分別為(0.944±0.530)、(1.096±0.544)、(0.348±0.273)、(0.601±0.238)。PCR擴(kuò)增后經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳分析顯示,心肌和肝臟組織的條帶清晰度高于肺臟和腦組織。結(jié)論經(jīng)甲醛浸泡固定的心肌組織和肝臟組織,運(yùn)用改良酚-氯仿法所得DNA質(zhì)量較為可靠,可以用于后續(xù)研究。
【關(guān)鍵詞】 法醫(yī)病理學(xué) 甲醛固定 改良酚一氯仿法 DNA提取
【分類(lèi)號(hào)】D919
檢材中DNA的提取是法醫(yī)學(xué)中常用的一項(xiàng)技術(shù)，同時(shí)也是分子生物學(xué)中研究基因功能的重要步驟l’}。目前，從新鮮組織中提取高質(zhì)量DNA的技術(shù)已經(jīng)比較成熟，但由于某些疾病的新鮮標(biāo)本獲取較為困難，使通過(guò)新鮮組織進(jìn)仃DNA水平的研究相對(duì)受限。在國(guó)內(nèi)，兒乎所有的醫(yī)院及司法鑒定機(jī)
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