一種鉤藤屬植物的rDNA ITS序列分析(2)
SYBR Green Ⅰ電泳染料購自北京百泰克生物技術有限公司,DL2000 DNA Marker購自TIANGEN生化科技(北京)有限公司,pMD18-T Vector、Taq酶以及DNA凝膠回收試劑盒均購自TaKaRa大連寶生物工程有限公司,通用引物合成由生工生物工程(上海)股份有限公司完成,十六烷基三甲基溴化銨(cetyltrimethyl ammonium bromide,CTAB)、乙二胺四乙酸(ethylene diamine tetraacetic acid,EDTA)、聚乙烯吡咯烷酮(polyvinyl pyrrolidone,PVP)、三羥甲基氨基甲烷(Tris)購自北京鼎國昌盛生物技術有限責任公司。其余試劑均為分析純。1.3 方法
1.3.1 鉤藤植物基因組DNA的提取 鉤藤植物基因組DNA的提取采用改良的CTAB法[13]:稱量約1 g新鮮采集的葉片在液氮的低溫條件下研磨成細粉末。將粉末轉移到50 ml的離心管中 ......
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