恒溫?cái)U(kuò)增芯片法在下呼吸道感染細(xì)菌耐藥基因檢測(cè)中的應(yīng)用(2)
目前抗生素的耐藥性已經(jīng)成為全球醫(yī)療界共同面臨的問題,了解致病菌的耐藥性是指導(dǎo)臨床用藥的重要依據(jù)[1]。作為金標(biāo)準(zhǔn)的細(xì)菌培養(yǎng)和藥敏試驗(yàn)耗時(shí)長(zhǎng),可能使患者錯(cuò)過最佳的治療時(shí)機(jī)。近年來(lái),耐藥基因檢測(cè)已在科研中推廣,但臨床鮮有應(yīng)用,主要原因?yàn)榭蓹z測(cè)的耐藥基因比較單一,難以反映復(fù)雜的耐藥表型。因此,需要一種特異性更好,且能同時(shí)對(duì)多個(gè)耐藥基因進(jìn)行檢測(cè)的方法。2000年,日本的Notomi等[2]報(bào)道了一種恒溫的核酸擴(kuò)增方法,即環(huán)介導(dǎo)恒溫?cái)U(kuò)增技術(shù)(1oop-mediated isothermal amplification,LAMP),其優(yōu)點(diǎn)在于特異性強(qiáng)、等溫高效、敏感性高,而且操作簡(jiǎn)便,更加適用于臨床。該技術(shù)目前已被應(yīng)用于病毒、細(xì)菌、真菌、支原體和寄生蟲等方面的檢測(cè)[3-6],且已應(yīng)用于臨床醫(yī)學(xué)檢測(cè)[3]。本研究將LAMP與微流體芯片技術(shù)結(jié)合,設(shè)計(jì)成恒溫?cái)U(kuò)增芯片,能同時(shí)檢測(cè)20個(gè)耐藥基因,基本覆蓋了常見感染性疾病尤其是下呼吸道感染常見致病菌的耐藥基因。本研究收集了下呼吸道樣本進(jìn)行基因芯片檢測(cè),與細(xì)菌培養(yǎng)+藥敏試驗(yàn)對(duì)比,旨在探討恒溫?cái)U(kuò)增芯片法在下呼吸道感染細(xì)菌耐藥基因檢測(cè)中的應(yīng)用 ......
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